3株鸽源新城疫病毒的分子特征及对鸽的致病性

2011―2013年在新城疫流行病学调查中分离到3株鸽源新城疫病毒(SDS,SD01和SD02),为了进一步了解其生物学特性和遗传进化规律,对3株病毒进行了测序和生物活性分析,并对分离株SDS对鸽的致病性进行了评价。结果表明,毒株SDS基因组全长为15192 bp,基因排列方式为3′-NP-P-M-F-HN-L-5′,3个分离株F蛋白裂解位点氨基酸序列均为¹¹²RRQKRF¹¹⁷,具有典型的新城疫强毒的分子特征。系统进化分析表明这3个毒株与基因Ⅵ型NDV毒株聚于一簇,属于ClassⅡ系Ⅵb基因型。3个分离株F蛋白的融合肽和七肽重复区,HN蛋白的抗原中和表位存在多处突变,与单克隆抗体1E5、2F10的反应性也发生改变,表明3个分离株与疫苗株LaSota有明显的抗原差异。SDS攻毒试验结果显示,试验鸽自攻毒后5 d出现明显的临床症状,滴鼻组和肌肉注射组的死亡率分别为60%和70%;病死鸽剖检可见脑膜充血出血,腺胃乳头、腺胃肌胃交界及肠道出血,肝脏肿大,脾有淤血斑。滴鼻组在攻毒后5~14 d于喉头和泄殖腔检出排毒,而肌肉注射组在攻毒后3~14 d于喉头和泄殖腔有排毒。     

鸡传染性支气管炎弱毒疫苗株安全性和免疫效力初步评价

通过对QX基因型IBV分离株SDZB0808进行鸡胚连续100次传代致弱后获得子代病毒P100。为了明确P100的的致弱效果和免疫原性,对其进行了安全性和免疫效力评价。安全性试验结果显示,P100以105.5 EID50/只的剂量对3日龄的SPF鸡进行免疫后试验,与正常对照组相比没有明显临床症状和病理变化,气管和肾脏组织也没有病理组织损伤。免疫效力试验结果发现,P100以104.5 EID50/只的剂量免疫3日龄SPF鸡,14d后对同源强毒SDZB0808和异源强毒SDIB821/2012的攻击都具有100%的临床保护,病理组织学检查发现P100免疫攻毒组试验鸡气管和肾脏与正常对照没有差异,排毒检测结果显示P100免疫攻毒组试验鸡内脏组织病毒检出率大大低于攻毒对照组。本研究结果表明P100对SPF鸡具有良好的安全性和免疫效力,可以作为IBV弱毒疫苗候选株。     

基于WebGIS的县域测土配方施肥系统的建立

在测土配方施肥项目的基础上,采用了B/S结构,选择SuperMap IS.NET平台,设计并实现了网络测土配方施肥系统.对系统数据库的建立,以及精准施肥、区域施肥、土壤养分、地力评价和土壤分布五大功能和模块设计进行介绍,并以安徽省太湖县为例,给出了该系统的实际应用.     

铁皮石斛人工繁育技术

以铁皮石斛商品瓶苗和盆栽苗茎段为试材,添加不同浓度6-BA、NAA,诱导茎段腋芽、原球茎和不定根,建立再生体系,快速繁殖铁皮石斛组培苗,以期为秦岭淮河一线以北地区人工繁殖铁皮石斛提供参考依据。结果表明:外植体宜采用70%酒精浸泡20 s,0.1%升汞浸泡8 min消毒;MS+6-BA 3.0~5.0 mg·L^-1+NAA 0.1~1.0 mg·L^-1适合腋芽分化和增殖,分化率92%~100%;1/2MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1+土豆泥15%适合原球茎诱导增殖,增殖倍数7.7;1/2MS+NAA 0.3 mg·L^-1生根率为100%;以松针土移栽,成活率83%。     

泡桐转TCS基因初步研究

运用花粉管导入和农杆菌介导两种方法,对泡桐转TCS基因受体表现性状进行研究,结果表明:泡桐花导入TCS基因后导致泡桐坐果率和畸形率升高;农杆菌介导TCS基因于泡桐组培苗的愈伤组织、茎段、茎尖后,致使其死亡率、分化率、分化数、苗高和颜色发生显著变化,极差分析表明,最佳转基因方式是以茎尖为受体,预培养3d,浸染时间15min,共培养条件为半黑暗。     

卡帕茨杨组培快繁技术试验报告

取卡帕茨杨叶片作为外植体，筛选出不定芽诱导培养基为MS＋BA2mg/L 2.4-D0.03mg/L；最佳增殖培养基为MS＋BA0.03/L IBA0.1mg/L；生根培养基为1／2MS＋IBA0.2mg/L。适合试管苗移栽的基质为细沙：草炭土＝1：1。     

TCS基因转化泡桐及抗病能力

泡桐(Paulownia)是经济价值较高的优良绿化造林树种.由于丛枝病的危害,每年我国林业的直接经济损失就高达数千万元,并且严重影响农民种植泡桐的积极性(杨俊秀等,2007).     

山东宁阳大枣快繁体系的建立

为探讨山东宁阳大枣组培快繁技术,以宁阳大枣新生枝条为外植体,通过诱导愈伤组织形成及不定芽分化,对建立高效的快繁体系进行研究。试验结果表明:同一基因型的不同取材部位其培养效果间差异不大;枣树新生枝条是建立无菌外植体的合适的外植体材料,适宜枣树分化愈伤组织的培养基是MS+BA1.0mg/L+KT1.0mg/L+NAA0.01mg/L+琼脂0.75%+蔗糖3%。适宜不定芽诱导的适宜培养基是MS+BA1.0mg/L+KT1.0mg/L+NAA0.05mg/L+琼脂0.75%+蔗糖3%。     

应用HiTrap protein-A层析柱纯化新城疫病毒单克隆抗体

两株针对新城疫病毒HN基因的单抗1E5和C3一B7，均具有血凝抑制性（HI），免疫球蛋白亚类分别为IgG2a和IgG1。用HiTrap protein—A层析柱对这两株单抗进行了亲和纯化。收集不同洗脱阶段的液体进行蛋白含量测定，结果表明，5mL的洗脱液洗脱后，第1～2mL洗脱液中单抗含量最高。用SDS—PAGE电泳对纯化产物进行纯度鉴定，结果表明单抗纯化后只有重链和轻链两条带。     

转基因三倍体毛白杨抗盐试验研究

试验设计4～11 g·kg-1 8个NaCl浓度梯度,对转PLD/AtNHXI基因抗盐碱三倍体毛白杨进行组培苗抗盐分化试验,设计2～10 g·kg-19个NaCl浓度梯度进行组培苗抗盐生根试验,设计3～12 g·kg-1 10个NaCl浓度梯度对1年生盆栽苗进行抗盐试验,结果表明:在NaCl浓度达8 g·kg-1时,转基因三倍体毛白杨分化培养37 d后,组培苗的叶色、分化芽数及新稍长度开始受到影响,随着NaCl浓度的增大将抑制组培苗分化生长,甚至枯萎死亡;在含NaCl 7 g·kg-1的生根培养基中,培养20 d后,虽然叶色没有受到盐太大的影响,但生根和新稍的生长都开始受到抑制,根系明显的减少;在含NaCl 7 g·kg-1的土壤条件下,盆栽苗培养32 d后,开始表现出盐害症状.