菊花CmPAL基因的克隆及表达分析

[目的]本文旨在克隆菊花中苯丙氨酸解氨酶基因(PAL),并探讨其在不同组织的表达特性以及在胁迫和激素处理下的响应模式。[方法]以菊花‘神马’为试验材料,依据其转录组数据库信息,克隆CmPAL全长,并利用生物信息学方法对其进行分析。利用荧光定量PCR检测该基因在不同组织中的相对表达量,在蚜虫和干旱胁迫以及不同激素处理下的表达变化。[结果]CmPAL基因开放阅读框(ORF)全长2 154 bp,编码氨基酸717个,理论等电点(p I)为5.75,预测蛋白相对分子质量为77.73×10~3。系统进化分析表明该基因编码的蛋白与黄花蒿和泡黄金菊的PAL亲缘关系最近,同源性分别为97.94%和91.88%,具有较高的保守性。CmPAL在菊花根中表达量最高,管状花中次之。蚜虫胁迫和茉莉酸甲酯(MeJA)可诱导CmPAL基因的表达,水杨酸(SA)、独角金内酯类似物GR24则抑制CmPAL的表达。干旱胁迫3 h处理组CmPAL基因表达量高于对照组。[结论]菊花‘神马’CmPAL基因在菊花的根中表达量最高,并受蚜虫和MeJA诱导,受SA和独角金内酯类似物GR24抑制,表明该基因可能参与多种胁迫防御反应和激素应答。     

警惕种子传带的南方番茄病毒Southern tomatovirus对我国番茄产业的危害

南方番茄病毒Southern tomato virus (STV)是近年来新发现的一种侵染番茄的病毒, 通常与多种病毒复合侵染, 可能与番茄的褪绿、黄化、衰退、果实变小等症状相关。该病毒最早在1984年发现, 并于2005年命名。我国首先于2015年在山东寿光发现。最近, 我们在山东和北京市多地的番茄样品中均检测到了该病毒, 并通过检测发现国内一些主要品种番茄种子的STV携带率达40%。STV基因组为一条双链RNA, 隶属Amalgaviridae科Amalgavirus属, 是严格种传病毒, 不能通过汁液摩擦接种和嫁接传播。鉴于STV的潜在危害以及与其他病毒高度复合侵染造成的严重损失, 本文介绍了STV检测方法, 并提出应开展对主栽品种的种子检测和针对性防控。     

茶用菊苗期枯萎病抗性鉴定技术研究

为了建立茶用菊枯萎病抗性鉴定的方法,了解茶用菊种质资源对枯萎病抗性的差异,筛选抗性种质用于抗病育种,本研究以茶用菊为试验材料,通过枯萎病病原菌分离、形态学和真菌18S rDNA/ITS鉴定和致病力研究,开展茶用菊资源苗期枯萎病人工接种鉴定,并筛选优异抗病种质。结果表明,从发病的福白菊植株上分离到M15和M16 2株枯萎病病原菌菌株,经鉴定,这2株菌株均属于尖孢镰刀菌,致病力检测发现M15为强致病力菌株。通过枯萎病抗性鉴定,筛选到七月白1份高抗品种,杭白菊、苏菊7号等9份抗病品种,滁菊、亳菊等17份中抗品种,福白菊、苏菊6号等3份感病品种以及皇菊1份高感品种。本研究建立了一种高效的茶用菊品种抗枯萎病的鉴定方法,为茶用菊抗枯萎病品种改良奠定了基础。     

切花菊苗期抗寒性评价及相关的分子标记挖掘

为明确切花菊抗寒性的遗传变异,挖掘优异基因资源,本研究利用电导率结合Logistic方程评价83个切花菊品种苗期叶片的低温半致死温度(LT₅₀),通过关联分析探究抗寒性相关的优异等位变异位点并筛选抗性品种资源。结果表明,83个切花菊品种的LT₅₀在-10.99~1.86℃之间,变异系数为79.81%,说明切花菊抗寒性差异较大;依据LT₅₀的聚类分析将83份供试品种分为抗寒、中抗寒、低抗寒和不抗寒4种类型,分别占21.67%、22.89%、32.53%和22.89%。基于混合线性模型进行关联分析,共检测到11个等位变异位点(P<0.01),表型效应值为-3.51~0.83,表型变异贡献率为11.54%~18.83%;其中8个变异位点表现为增效,特别是携带E7M12-13位点品种的耐寒性显著(P<0.01)高于未携带该位点的品种。此外,根据增效位点挖掘到南农金柠檬、Qx097、QD028、Qx049、Qx153和Qx008等6个抗寒性强的品种资源。本研究结果为今后菊花耐寒性的遗传改良和分子标记辅助育种奠定了重要基础。     

松茸人工抚育促繁技术规程

<正>四川松茸主要分布在四川甘孜藏族自治州、阿坝藏族羌族自治州、凉山藏族自治州等地[1],是一种味道鲜美、营养丰富的珍稀名贵食用菌。自1984年开发以来,受到市场高价的诱惑,农民遍山搜寻、轮番抢挖,对松茸展开了掠夺式采集,使四川松茸的产量急剧下降[2]。为了更好地保护与开发松茸资源,笔者在阿坝州开展了多年松茸人工抚育的试验研究,总结出一套松茸人工抚育促繁技术规程。1适用范围规程规定了四川藏区松茸林地清理,自然留种,人工辅     

银叶树耐水淹和高盐适应性研究

[目的]研究银叶树的耐水淹、耐盐特性。[方法]测定不同水淹程度、不同盐浓度处理下的银叶树幼苗存活率、生长量和生物量。[结果]银叶树在正常浇水、水淹至地径、水淹至苗高的1/2、完全淹没处理60 d后均能存活,但完全水淹明显抑制了银叶树的生长;银叶树在6种盐浓度处理60 d后均能存活,在土壤全盐量14 g/kg以下能够正常生长,土壤全盐量超过14 g/kg后对银叶树的生长抑制作用显著。[结论]银叶树具有较强的耐水淹和耐盐特性。     

甜瓜黄斑病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法

为建立检测甜瓜黄斑病毒(melon yellow spot virus, MYSV)的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR(qPCR)方法。基于MYSV核衣壳蛋白基因保守序列设计qPCR特异性引物对,针对引物退火温度、引物浓度、特异性和敏感性进行系列优化。结果显示,优化后的qPCR方法最适退火温度为61.3℃,最适引物浓度为0.65μmol·L^-1,特异性强,灵敏度高,比PCR高100倍。以携带目的基因片段的重组质粒为标准品,构建的qPCR标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,相关系数为0.999 7。实验样品验证表明建立的qPCR方法可用于MYSV的定量检测。     

稻草还田对设施切花菊品质及连作土壤养分的影响

【目的】针对设施切花菊连作土壤质量严重下降切花菊品质逐年下降的现象，研究探讨暗管排水 (埋管最适间距 2 m)条件下，稻草还田措施对设施切花菊‘神马’连作土壤理化性质及品质的改善效果。【方法】试验设5个处理:1) 无暗管和无秸秆还田 (CK)；2) 有暗管和无秸秆还田 (PS₀)；3) 有暗管和800 kg/hm2秸秆还田 (PS₈₀₀)；4) 有暗管和1600 kg/hm2秸秆还田 (PS₁₆₀₀)；5) 有暗管和2400 kg/hm2秸秆还田 (PS₂₄₀₀)。 测定温室耕作层土壤 (0—15 cm) 养分含量、阳离子交换量、全盐含量以及植株主要生理指标。【结果】暗管排水条件下，不同稻草还田量均可显著增加土壤中的有机质含量、有效磷含量及速效钾含量。与CK相比，1600 kg/hm2稻草还田量处理后土壤碱解氮含量最低，而土壤的阳离子交换量与其他处理相比分别增加了32.7%、23.6%、11.4%、8.23%；除此之外，各稻草还田处理均可有效降低土壤pH值、土壤全盐量及电导率，其中1600 kg/hm2稻草还田量处理后土壤耕作层电导率最低，为167 μS/cm，相比CK下降了31.1%；各稻草还田处理使切花菊的株高、茎粗、舌状花数、花鲜重和生物量等主要生理指标显著提高，切花菊‘神马’的株高、舌状花数、生物量在1600 kg/hm2稻草还田处理下显著高于其他处理。【结论】1600 kg/hm2稻草还田量为本试验综合效果最佳的处理，其对设施切花菊‘神马’土壤理化性质改善明显，土壤肥力增加显著，切花菊品质提高最佳。     

聊城市官方兽医实施动物检疫应熟知的特别规定

为更好的适应新形势下动物检疫工作,进一步提升官方兽医的业务水平和能力,本文汇总了部分省(市)动物及动物产品企业备案、家禽跨省调运、山东省内羊调运、山东省内犬猫调运、山东省无规定动物疫病区外引进易感动物和动物产品、部分省(自治区)跨省引进乳用种用动物审批权限调整、家畜产地检疫与"瘦肉精"检验同步、牲畜布病检疫监管共八个方面的特殊规定,介绍了目前国家各级农业部门规定的动物检疫应注意的事项,供聊城官方兽医实施动物检疫参考。     

菊花管状花数量和花心直径的QTL分析

[目的]发掘控制菊花管状花数量和花心直径的主效QTL,为菊花花器性状的分子改良提供参考依据.[方法]以142株菊花‘雨花落英'x‘奥运含笑'F1代群体为材料,调查管状花数量和花心直径两个性状在2008-2009两个年度的分离情况,并基于菊花SRAP遗传图对其进行QTL定位分析.[结果]管状花数量和花心直径在两年间均表现为连续分布,具有数量性状的典型特征,且两者具有极显著的相关性(r=0.37,P<0.01).基于菊花SRAP遗传图谱的QTL定位研究共检测到2个QTL与菊花管状花数量显著相关,7个QTL与花心直径显著相关.这9个QTL主要分布在亲本‘雨花落英'遗传图的Y1、Y2和Y21以及‘奥运含笑'遗传图的A5、A13和A19共计6个连锁群上,各个QTL的LOD值介于2.50-4.18,可以解释6.17%-13.72%的表型变异.其中在两年中检测到控制管状花数量的TfnElY21和TfnE2Y21以及控制花心直径的FcdE1Y1和FcdE2Y1在连锁群上所处的标记区间相同,应分别属于同一个QTL,受环境的影响较小,其余在单个环境中检测到的QTL受环境影响较大.[结论]共获得9个QTL与菊花管状花数量和花心直径显著相关,其中受环境影响较小的主效QTL可用于菊花分子标记辅助选择育种.