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采用国产硅胶Gk254(60型)代替进口Glass bead的改良方法抽提土壤微生物DNA,然后设计了一对扩增木聚糖酶基因片段的新简并引物,对抽提的土壤微生物DNA进行PCR扩增。扩增片段连接pMD18T载体,转化大肠杆菌,重组片段通过酶切进行RFLP分析后,测序分析得到10个木聚糖酶基因片段。对所得片段翻译的氨基酸序列进行BLAST分析表明有8个片段与来自放线菌的木聚糖酶具有较高的同源性,2个与假单胞菌的木聚糖酶具有较高的同源性。所得10个木聚糖酶片段的氨基酸序列同源性比较显示,第27个氨基酸均为天冬酰胺(N),暗示这些来自土壤微生物DNA的基因片段编码耐碱的木聚糖酶。通过构建系统进化树,发现扩增的木聚糖酶片段之间的相似性均在70%以上。 相似文献
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毕赤酵母GS115/phyA产植酸酶诱导条件研究 总被引:1,自引:0,他引:1
植酸酶是催化植酸及其盐类水解成肌醇和磷酸的一类酶的总称。在饲料工业和食品工业中添加植酸酶可分解植酸磷为可利用磷,同时消除抗营养作用,提高蛋白质、微量元素的利用率,有重要的应用价值。自然界存在广泛可分解植酸的菌株, 相似文献
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将透明颤菌血红蛋白基因(vgb)转移到链霉菌染色体整合载体的构建 总被引:2,自引:0,他引:2
链霉菌抗生素的生物合成对培养环境中氧的供应相当敏感,为了改善这一溶氧问题,本研究通过将透明颤菌血红蛋白基因(vgb)克隆到含ФC31int,attP基因的诱导型表达载体pU8600上,构建了可接合转移到链霉菌的整合型表达vgb基因的质粒pHZ1276。pHZ1276通过接合转移导入变铅青链霉菌(Streptomyces lividans),所得重组子经Southern杂交验证后,进行诱导表达,菌体经破碎后所得蛋白粗提物经Western杂交和CO结合试验表明vgb基因在该菌中表达出了有活性的VHb蛋白。 相似文献
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茶籽壳中原花青素提取工艺参数的研究 总被引:8,自引:0,他引:8
采用超声波辅助提取法进行茶籽壳中原花青素提取工艺参数研究。研究表明,在材料粉碎度80目、提取时间30 min、乙醇浓度60%、提取温度50℃、料液比为1∶6和提取2次时可取得较好的效果。 相似文献
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烟曲霉植酸酶基因的克隆及在毕赤酵母的高效表达 总被引:6,自引:0,他引:6
根据文献报道的烟曲霉植酸酶序列,设计引物以烟曲霉CCTCCAF93044的总DNA为模板进行梯度PCR,扩增出了1条约1.4kh的带,将该片段进行DNA序列测定,其序列与已报道的烟曲霉植酸酶序列完全一致,但只编码完整的成熟植酸酶序列。将该片段克隆到毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K上,获得表达质粒pHBM108。该质粒转化毕赤酵母KM71所得重组子经PCR验证后进行诱导表达,其中一重组子经144h诱导,植酸酶表达量至少为1.25mg/ml,比同类报道的表达量高出60%以上,以植酸钠为底物测得酶活为11.17U/ml。 相似文献
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水是人类生存的基本保障,饮水安全和农业用水一直是全世界关注的焦点问题,虽然世界各国在水供应上作出了不懈努力,但是在干旱半干旱地区,饮水和农业用水问题仍十分突出,不但危害到人民群众的身体健康,还影响了当地社会经济的和谐发展。文章从饮用水和农业用水两方面,就干旱地区摆脱缺水困境展开了讨论,以期构建出合理的农村用水综合保障体系,为农村建设出一份薄力。 相似文献