诺如病毒P-partical-GnIH抗原制备及抗原性初步检测

为探索调控家鹅繁殖性能的技术,本研究通过设计合成鹅促性腺激素抑制激素(gonadotropin-inhibitory hormone,GnIH)序列片段,酶切后连接到诺如病毒(Nov)P基因重组pEGX-4T-1载体,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,提取阳性菌重组质粒,并通过测序和酶切进行验证。将测序正确的质粒转化大肠杆菌BL21感受态细胞,利用IPTG诱导重组蛋白表达,SDS-PAGE及Western blotting检测重组蛋白表达。进一步在不同IPTG浓度及诱导时间条件下进行原核表达,确定最佳诱导条件,在最佳条件下的诱导菌液经过离心收集菌体,并超声波破碎离心后对重组蛋白可溶性进行分析。利用xTractor Buffer和Glutathione Superflow树脂对重组蛋白进行纯化,并使用自制的抗GnIH鹅血清及抗鹅二抗通过Western blotting检测重组蛋白。结果显示,重组质粒Nov P-partical-GnIH经双酶切鉴定获得大小约为96 bp的目的基因条带,进一步测序结果证明重组质粒构建成功。诱导表达的重组蛋白分子质量约为64 ku,与预期大小一致,且在37℃、1.0 mmol/L IPTG、诱导2 h条件下表达量最高;菌体超声破碎后经SDS-PAGE检测,重组蛋白主要表达在沉淀中。重组蛋白与GST单抗及抗GnIH阳性血清均能反应,表明此重组蛋白具有较好的反应原性和免疫原性。本研究通过对Nov P-partical-GnIH蛋白原核表达及纯化成功获得了大量纯度较高的重组蛋白,将有助于进一步建立家鹅的繁殖性能免疫调控方法,为提高繁殖性能及调控繁殖机制的研究奠定基础。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒山西分离株ORF7基因序列分析

采用RT-PCR方法对疑似猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)阳性病料进行克隆和测序,获得2个ORF7基因片段,并对其基因序列和推导的氨基酸序列与国内外毒株进行了同源性比较分析。序列分析结果显示,2个ORF7基因之间核苷酸和氨基酸同源性分别为99.7%和98.4%,其与欧洲型代表毒株LV、美洲型代表毒株VR-2332、高致病性PRRSV变异株(JXA1、HUN4、HEB1、HUB1)及我国早期分离毒株CH-1a的核苷酸同源性分别为65.9%、93.0%～93.3%、97.6%～98.1%、94.6%～94.9%,氨基酸同源性分别为58.1%、93.5%～94.4%、95.2%～96.0%、91.9%～92.7%。遗传进化树分析结果表明,分离的2个ORF7基因与美洲型代表毒株VR-2332亲缘关系较近,属于美洲型,与CH-1a、HB-2(sh)、我国2006年以后分离的10株(JXA1、SD-09、HUB1、HEB1、HUN4、Henan-A14、GD、GDQY2、GZgy15-1、GD-2011)组成同一个亚群。     

美国扩大农产品出口的新战略分析

2010年初美国提出五年内使出口翻番、创造200万个就业机会的目标,并连同美国商务部推出"国家出口倡议"(National Export Initiative),农业出口是该倡议的重要组成部分.根据美国农业部在2010年3月5日提出的新战略中,美国将根据各国在农产品贸易连续体中的位置来分类,从而制定"量体裁衣"式策略,以便向不同国家增加出口.本文探讨了美国扩大农产品出口的背景,重点分析了2010年美国对世界各个市场所采取的市场新战略以及扩大农产品出口的战略措施,并为中国扩大农产品出口提出了几点启示及建议.     

猪流行性腹泻病毒山西分离株ORF3基因序列分析

为了研究山西地区猪流行性腹泻病毒ORF3基因的遗传变异情况,2014-2015年从山西地区11个地市收集的PEDV阳性病料中扩增到4株PEDV的ORF3基因,并进行序列比对及遗传分析。序列分析结果表明,4株PEDV山西分离毒株的ORF3基因与CV777毒株相比,无核苷酸插入和缺失,有部分核苷酸及氨基酸发生变异;4株PEDV山西分离毒株的ORF3基因之间核苷酸和氨基酸的同源性分别为99.6%~100.0%和98.7%~99.6%,与CV777、疫苗株CV777 truncated和attenuated DR13核苷酸同源性分别为96.6%~97.0%,90.6%,97.6%~98.1%,氨基酸同源性分别为95.1%~96.0%,88.0%,97.1%~98.1%。遗传进化分析结果显示,4株PEDV山西分离毒株与12株2010-2015年我国各地方分离的毒株和2009年分离的CH/JL/09毒株亲缘关系较近;与CV777、LZC、Brl/87和2个疫苗株(CV777truncated和attenuated DR13)亲缘关系较远。     

不同施肥方式对食用向日葵经济性状及产量的影响

向日葵花盘形成至开花期是向日葵的需肥高峰,通过科学合理的施肥可以促进向日葵的多种代谢及增加蔗糖的合成,加速蔗糖的转运,从而提高向日葵的结实率、降低空壳率,增加粒重。通过开展食用向日葵花蕾期喷施硼肥和磷酸二氢钾2种施肥方式对其产量及籽粒商品性的影响试验,结果表明,在向日葵现蕾期喷施磷酸二氢钾和硼肥均可提高产量和籽粒商品性,且施用磷酸二氢钾的效果优于硼肥。     

非洲猪瘟病毒E183L、B602L、K205R和A104R基因表达及诊断抗原筛选

为了获得非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)重组蛋白pK205R、pE183L、pA104R和pB602L,将Ba71V株的K205R、E183L、A104R和B602L基因分别亚克隆进行原核表达载体pET30a(+),构建重组质粒pET-E183L、pET-B602L、pET-K205R和pET-A104R,转化大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3)。IPTG诱导后,纯化表达的蛋白,并进行Western blotting鉴定,结果4种重组蛋白与预期大小一致,且与ASFV抗体发生特异性反应。为了从表达的4种重组蛋白中筛选最佳诊断抗原,将其分别包被酶标板,间接ELISA检测ASFV阳性血清,发现重组蛋白pK205R、p54和pB602L血清学反应良好;在检测ASFV感染后第13天分离血清时,重组蛋白p54和pK205R效果更佳,这表明p54和pK205R重组蛋白是较好的诊断抗原,可用于ASFV感染后早期或中后期血清学诊断。     

要把全心全意为人民服务的思想贯穿于农机工作的始终

去冬，我县开展了“三面、三同、三下”教育活动，机关干部走出办公室，深入到农牧区，体察民情民意，为农牧民办实事、办好事，转变了机关作风，提高了效率，增强了服务观念。奇台县农机部门把全心全意为人民服务的思想贯穿于农机化工作的始终，现根据“三面、三同、三下”教育活动的实践和农机化工作的特点，谈几点体会。１农机主管部门必须将全心全意为人民服务的思想贯穿于农机工作的始终１．１广大基层干群的迫切要求 改革开放２０年来奇台县各级政府始终把农业机械化放在整个农村经济发展的总格局中作为一项根本性的任务，有计划、有…     

站在烦恼里仰望幸福

人生烦恼无数。先贤说，把心静下来，什么也不去想，就没有烦恼了。先贤的话，像扔进水中的石头，而芸芸众生在听得“咕咚”一声闷响之后，烦恼便又涟漪一般荡漾开来，而且层出不穷。     

灌区农民用水者协会的规模研究

发展农民用水者的组织可以使交易成本降低、集体行动力增强，但随着其组织规模的增大，也不可避免地带来组织协调成本的增加和集体行动的困难。如何确定合理的组织规模是大家所关心的。在交易费用理论和集体行动理论的指导下，建立用水户协会合理规模的计算模型，通过回归拟合的方法寻求各变量间的数学关系，确定出用水户协会的最佳规模。