针叶树苗圃病害调查与主要病害发生规律研究

本文调查了针叶树苗期病害的种类和苗期病害的发生规律，结果表明针叶树苗期病害有8种，其中侵染性病害有6种，生理性病害有2种。猝倒病是针叶树苗期主要的病害，表现为3种症状类型。日灼型猝倒是气象性病害的主要形式，由丝核菌Rhizoctonia和镰刀菌Fusarium引起的生物猝倒型和立枯型病害是针叶树育苗的主要病害，其发生与育苗地所处的环境、营养土基质有关,同时提出了对针叶树苗期病害防治的对策。     

核桃五个主栽品种对Botryosphaeria溃疡病的抗性测定

为测定陕西、川北地区核桃主栽品种对溃疡病的抗性差异，本文通过和针刺接种法，对11个核桃良种栽培品种1年生枝条进行了抗Botryosphaeria的初步评估；在此基础上，对其中抗性较强的5个品种，采用打孔法接种2年生枝条进一步进行了抗性测定和评估。结果表明“清香”和“香玲”对溃疡病的抗病性强，“鲁光”、“西林3号”和“西洛”对溃疡病的抗病性弱。核桃品种抗病性差异与接种方式和时间有关，但抗病品种清香和香玲抗性表现稳定。该研究结果为核桃引种栽培提供了依据。     

北美栅锈菌和松杨栅锈菌可视化检测体系建立

[目的 ]为实现北美栅锈菌和松杨栅锈菌快速有效的鉴别及鉴定。[方法 ]本研究根据两种锈菌的28SrDNA基因序列设计若干组LAMP引物。经筛选得到的引物以北美栅锈菌、松杨栅锈菌、图拉斯叉钩丝壳菌、芍药白粉菌、梨胶锈菌、羊肚菌、金针菇的基因组DNA为模板进行LAMP反应并完成特异性检测;首先建立初始LAMP反应体系,再进一步优化LAMP反应体系的组分和反应条件,加入羟基萘酚蓝实现可视化检测;最后确定检测体系灵敏度。[结果 ]表明,筛选出的引物具有特异性;25μL北美栅锈菌LAMP检测体系最佳Mg2+浓度为6 mmol·L^-1,最佳内外引物比例为8:1,最佳dNTPs浓度为1.2 mmol·L^-1;同样地,25μL松杨栅锈菌LAMP检测体系最佳Mg2+浓度为4 mmol·L^-1,最佳内外引物比例为6:1,最佳dNTPs浓度为1 mmol·L^-1。加入160μM羟基萘酚蓝(HNB)可清晰地指示反应结果,两种检测体系在61℃条件下,分别反应30 min和40 min可实现目视判断结果,且灵敏度分别可达34 ...     

温度和叶表化学物质对松杨栅锈菌夏孢子萌发的影响

松杨栅锈菌夏孢子萌发适宜温度范围为10～24℃,最适温度20℃左右。供试的2菌株对温度有不同的依赖性。TH菌株温度适应性范围较宽,GL菌株较窄。在最适温度范围内,供试的2个菌株呈现相同的萌发动力学模式,萌发最大速率出现在4～12h,温度越高,最大萌发速率出现时间越晚,并随时间的延长,萌发速率逐渐减小。在5、30℃,萌发速率有2～3个峰值,第1峰值最大,第2、第3峰值逐渐减小或消失。26℃下峰值呈现过渡型状态,有1个较小的次高峰。供试的2菌株,TH的萌发速率较GL稍高并在出现时间上略前。最适萌发条件下,石油醚、乙醚、乙酸乙酯、正丁醇、水的卜氏杨和毛白杨提取物对松杨栅锈菌夏孢子萌发有不同的影响。毛白杨所有提取物在接种12h内,均抑制夏孢子的萌发,而卜氏杨乙醚提取物则促进夏孢子萌发,其余则抑制夏孢子萌发。所有水提取物在接种12h均表现为抑制作用。接种12～24h,2种杨树叶片正丁醇萃取物对夏孢子萌发速率均有一定程度的促进作用。     

七叶树溃疡病病原真菌的分离与鉴别

【目的】分离和鉴别引起七叶树溃疡病的病原菌,为制定合理的防治技术提供依据。【方法】采用组织分离培养、人工接种、形态观察及核糖体转录间隔区序列(ITS-rDNA)分析,对引起七叶树溃疡病的水渍型溃疡病病原菌NW397和干腐型溃疡病病原菌NW3362种真菌进行鉴别与比较。【结果】引起七叶树溃疡病的病原为2种不同的真菌,并表现出不同的危害特征。水渍型溃疡病菌NW397 ITS-rDNA序列与多主葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea Sacc.)等的序列同源性高达99%;干腐型溃疡病菌NW336ITS-rDNA序列与乌饭树拟茎点菌(Phomopsisvaccinii)等的同源性高达95%以上。【结论】七叶树水渍型溃疡病菌定名为多主葡萄座腔菌(Botryosphaeria do-thidea Sacc.),干腐型溃疡病菌定名为梨干枯拟茎点菌(Phompsis fukushii Tanaka et Mill)。     

美洲黑杨无性系对杨叶锈病的抗性研究

研究了美洲黑杨(Populus deltoides)无性系对杨叶锈病(Melampsora larici-populina)的抗性问题。结果表明，供试的美洲黑杨无性系对杨叶锈病的抗性可分为4种类型，即高抗型、抗病型、感病型和高感型。     

杨树锈病的PCR检测

利用一对特异性引物进行PCR扩增，可以检测到感病杨树体内的病原物。     

落叶松-杨栅锈菌夏孢子萌发条件研究

以落叶松-杨栅锈菌(Melampsora larici-populina)的Th053(Th)和Gl051(Gl)菌系为材料,通过研究不同温度、不同琼脂糖浓度及叶片浸出液对夏孢子萌发的影响,分析影响夏孢子萌发的因素。结果表明:(1)在供试温度范围(0~30℃)内,琼脂糖浓度对夏孢子萌发没有显著影响,但最高温度(32℃)时,高琼脂糖浓度对夏孢子的萌发有明显的促进作用;(2)夏孢子萌发的最适温度为20℃,最低萌发温度为5℃,最高萌发温度为32℃,高于32℃几乎不萌发。在最适温度下,Th菌系6~8 h萌发速率最大,24 h累计萌发率达63.40%;Gl菌系4~6 h萌发速率最大,前24 h累计萌发率达60.28%;(3)不同浓度的太白杨叶片浸出液对该锈菌夏孢子萌发有不同程度的影响,10 g.L-1的水浸液对夏孢子萌发有明显的促进作用,但高浓度的水浸液、叶组织粉碎抽取液对夏孢子萌发具有抑制作用。     

落叶松－杨栅锈菌 MKK基因的克隆与生物信息学分析1）

利用同源克隆技术，从落叶松－杨栅锈菌（ Melampsora larici-populina Kleb．）菌株Wh03中克隆得到酿酒酵母MKK1和MKK2的同源基因，命名为MlpMK K1／2－WH。测序结果显示，MlpMKK1／2－WH基因的开放阅读框长度为1218 bp，编码405个氨基酸。 MlpMKK1／2－WH蛋白具有保守的PKc＿Pek1＿like和Pkinase结构域。系统进化树分析表明，MlpMKK12／－WH与柄锈菌属3种锈菌中的同源蛋白亲缘关系最近。