不同海拔高度牛宰后牛肉AMPK活性及能量代谢研究

为了研究不同海拔高度生长的牛宰后牛肉一磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)活性与糖酵解指标,以探讨宰后肌肉生理机理,测定了玉树牦牛(海拔4 500 m)、甘南牦牛(海拔3 000 m)和西门塔尔杂交肉牛(海拔1 500 m)宰后成熟过程中牛肉AMPK活性、AMPK基因(PRKAA1、PRKAA2)mRNA表达量、糖酵解和能量代谢的变化。结果表明,12~168 h时间内,AMPK活性从小到大依次为西门塔尔杂交牛、甘南牦牛、玉树牦牛;西门塔尔杂交牛PRKAA1基因的表达量比甘南牦牛和玉树牦牛略低;西门塔尔杂交牛PRKAA2基因表达量显著小于甘南牦牛和玉树牦牛(P0.05);72~168 h时间内,乳酸含量和游离葡萄糖含量从小到大依次为西门塔尔杂交牛、甘南牦牛、玉树牦牛,p H值、肌糖原含量从大到小依次为西门塔尔杂交牛、甘南牦牛、玉树牦牛;成熟前期ATP、ADP、AMP含量从大到小依次为西门塔尔杂交牛、甘南牦牛、玉树牦牛。高海拔品种牛肉机体PRKAA1和PRKAA2基因表达量高时,AMPK被激活从而活性增加,ATP的浓度水平降低,AMP生成量增加,加速组织内的糖酵解,增加肌肉乳酸含量,降低p H值,进而影响牛肉品质。     

顶复门原虫糖酵解代谢及其关键酶:己糖激酶的研究进展

顶复门原虫是包括刚地弓形虫、疟原虫及球虫等在内的一大类寄生性原虫的总称,引起重要的人畜寄生虫病。由于药物的长期使用,对于原有的药物产生了明显的抗药性,急需新型抗寄生虫药物的出现。顶复门原虫不能利用脂肪和蛋白质作为能量来源,只能依赖己糖激酶(Hex-okinase,HK)参与的糖酵解途径提供ATP。顶复门原虫HK的基因序列、结构特征与植物等一些低等生物更为接近,而明显区别于脊椎动物和大多数的真核生物,成为研究开发药物的理想靶位。本文对顶复门原虫糖酵解途径及其关键酶进行了综述。     

糖酵解潜力、深色切块牛肉(干、硬、黑)以及牛肉烹调后风味之间的关系

从 3个屠宰场采集 1 0 0份牛胴体样本 ,用于测定糖酵解潜力 (GP)和干硬黑肉 (肉 )之间有关系 ,以及这二者对牛肉烹调风味的影响 ,在屠宰后7d的胴体后躯部分上分别取 8个肌肉块 :腰部背最长肌、腰肌、臀肌、张肌筋膜、股直肌、股二头肌和半腱肌。以上样本测量最终 p H,肉色度以及Warner- - Bratzler剪切力。由 9位通过专业培训的风味品评小组评定烹调后背最长肌、臀肌和半膜肌肉块。仅对腰部背最长肌测定的指标是糖酵解潜力 (2× (糖原 +葡萄糖 +葡萄糖 - 6 -磷酸 ) +乳酸 )和乙酸醚抽提脂肪含量。研究结果表明 :腰部背最长肌的最终 p H和…     

不同脂肪和葡萄糖水平对大黄鱼生长性能、肝脏糖酵解和糖异生关键酶活性的影响

本试验旨在研究不同脂肪和葡萄糖水平对大黄鱼生长性能、肝脏糖酵解和糖异生关键酶活性、血清生化指标、糖原含量及消化酶活性等的影响。采用2×3双因素试验设计,其中脂肪设5%、10%2个水平,葡萄糖设10%、20%、30%3个水平,共配制6种试验饲料。每种饲料设3个重复,每个重复放养平均体重为(14.79±0.13)g的大黄鱼幼鱼50尾。试验期为8周。结果表明:饲料脂肪和葡萄糖水平的交互作用对大黄鱼增重率(WGR)、特定生长率(SGR)和饲料效率(FE)的影响不显著(P0.05)。在饲料脂肪水平为5%时,WGR和SGR随饲料葡萄糖水平增加而降低,30%葡萄糖组的WGR和SGR显著低于10%葡萄糖组(P0.05)。饲料脂肪和葡萄糖水平的交互作用对大黄鱼全鱼水分和粗脂肪含量的影响显著(P0.05),而对全鱼粗蛋白质含量无显著影响(P0.05)。饲料脂肪和葡萄糖水平的交互作用对大黄鱼肝糖原、肌糖原含量有显著影响(P0.05)。在饲料脂肪水平为5%时,肝糖原含量随饲料葡萄糖水平的升高而升高,而肌糖原含量随着饲料葡萄糖水平的升高先升高后降低;在饲料脂肪水平为10%时,肝糖原含量随饲料葡萄糖水平的升高先降低后升高,肌糖原含量随着饲料葡萄糖水平的升高而升高。饲料脂肪和葡萄糖水平的交互作用对大黄鱼血清总蛋白(TP)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、葡萄糖含量及丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性无显著影响(P0.05);然而,在饲料脂肪水平相同时,血清葡萄糖含量随饲料葡萄糖水平的升高而升高,30%葡萄糖组血清葡萄糖含量显著高于10%葡萄糖组(P0.05)。饲料脂肪和葡萄糖水平的交互作用对大黄鱼肝脏葡萄糖激酶(GK)、磷酸果糖激酶(PFK)、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)活性有显著影响(P0.05),而对丙酮酸激酶(PK)、1,6-二磷酸果糖酶(FBPase)、6-磷酸葡萄糖酶(G6 Pase)活性无显著影响(P0.05)。在饲料脂肪水平为10%时,随饲料葡萄糖水平的升高,肝脏GK、PFK活性升高,肝脏PEPCK活性先升高后降低。由结果可知,与饲料脂肪水平为10%时相比,在饲料脂肪水平为5%时,随饲料葡萄糖的水平的升高,大黄鱼能够通过调节糖代谢关键酶活性及肝糖原含量来维持血糖含量的平衡,有效利用饲料中的葡萄糖。综合本试验结果,建议大黄鱼幼鱼阶段饲料适宜的脂肪和糖水平分别为10%和20%。     

木薯种茎离体脱水胁迫下生理生化响应研究

木薯是热带和亚热带地区重要的粮食和经济作物。木薯种茎是目前唯一的繁殖方式,然而采收后木薯种茎如何应对脱水胁迫及糖代谢基因的表达尚不清楚。本研究通过检测对照组和保水处理组的木薯种茎在采后不同时间点水分和糖分的含量变化来探究离体条件下木薯种茎内糖类发挥的作用。通过检测糖类代谢相关基因的表达来解析不同糖分间的代谢关系及离体种茎的活性状态。结果表明,在保水处理组中随着采后时间的延长,种茎中的果糖、葡萄糖和蔗糖的含量先降低后升高,而海藻糖含量变化正好相反。同时,保水处理组的果糖、葡萄糖和蔗糖的含量显著高于对照组,而海藻糖含量显著低于对照组。qPCR分析发现,严重的脱水胁迫显著地提高了糖酵解基因的表达。这些结论表明,脱水胁迫显著影响木薯茎中糖类的相互转化。推测脱水胁迫前20 d通过合成海藻糖来响应脱水胁迫,在20~30 d则通过分解海藻糖为木薯种茎提供必要的能量物质。同时本研究通过甘油处理提高了木薯种茎的贮藏时间,为木薯种茎的贮藏提供新的方法。     

日粮高胆碱水平对宫内发育迟缓猪背最长肌糖酵解的影响

[目的]研究添加高胆碱日粮对宫内发育迟缓(IUGR)猪肌肉糖酵解的作用。[方法]从正常分娩的12头母猪中选择正常初生体质量(normal birth weight,NBW)和IUGR新生仔猪各12头,所有仔猪于23日龄断奶。试验采用2×2因子设计,NBW仔猪和IUGR仔猪各分别饲喂基础日粮(正常胆碱水平,NC)与添加胆碱的试验日粮(高胆碱水平,HC),即NBW+NC、NBW+HC、IUGR+NC与IUGR+HC共4组,每组6头猪,饲养至200日龄结束,称体质量后随机选择4头屠宰。[结果]IUGR猪肌糖原含量显著低于正常初生体质量仔猪,其乳酸含量及糖酵解潜值显著升高(P<0.05),乳酸脱氢酶活性有提高的趋势(P=0.057),糖原合酶(GS)的表达量显著降低(P<0.05),葡萄糖转运载体(GLUT4)mRNA表达量有下降趋势(P=0.074),M2-型丙酮酸激酶(PKM2)mRNA及M-型6磷酸果糖激酶(PFKM)mRNA的表达量显著增加(P<0.05)。高水平胆碱有使IUGR猪肌糖原含量升高(P=0.051)、乳酸含量(P=0.091)和糖酵解潜值(P=0.074)降低的趋势;高水平胆碱促使IUGR猪肌酸激酶活性显著升高(P<0.05),GS和GLUT4 mRNA的表达量显著升高(P<0.05),而PFKM mRNA表达量有下降的趋势(P=0.087)。[结论]IUGR猪的肌肉糖酵解关键酶表达量显著升高,糖原合成能力下降,乳酸含量显著升高,添加高水平胆碱可缓解IUGR猪肌糖原的大量分解,表现为糖酵解关键酶增加,乳酸含量下降,可见胆碱对提高肉品质有积极作用。     

猪PFKL基因克隆及生物信息学分析

试验旨在探究猪精液6-磷酸果糖激酶（6-phosphofructokinase,PFKL）基因的理化性质和结构特点,以期阐明糖酵解在精子发生过程中的生理作用及调控机制。通过RT-PCR技术扩增PFKL基因,将获得的基因片段插入到pUC57载体上进行克隆测序,并结合生物信息学方法预测和分析其氨基酸序列、跨膜结构、修饰位点、二级结构、三级结构、抗原位点、功能注释等。结果表明,PFKL基因全长2 349 bp,编码782个氨基酸,蛋白质分子质量为83.819 ku,等电点为6.96,为酸性蛋白质,分子式为C₃₆₇₄H₅₈₉₇N₁₀₅₁O₁₁₀₉S₄₀。猪源PFKL基因与鼠、鸭、羊、牛、猩猩、人的参考序列同源性均高达80.0%以上。该蛋白不存在跨膜结构和信号肽区域,含有2个N-糖基化修饰位点、14个O-糖基化位点、35个磷酸化位点。PFKL蛋白三维建模结构主要由无规则卷曲和α-螺旋构成,与肌肉型磷酸果糖激酶和血小板型磷酸果糖激酶的同源性分别为68.24%和70.84%。PFKL基因含有的27个抗原位点强弱不同,柔韧性分布较均匀,有较高的表面可塑性,且存在PKC、PKA特异性蛋白激酶的结合位点,为具有较多潜在B细胞抗原表位的亲水性蛋白。GO功能注释分析结果表明,PFKL基因具有碳水化合物激酶活性、磷酸果糖激酶活性,能够参与己糖代谢和单糖代谢。本研究结果为改善精子品质和提高精卵结合发生率奠定了分子生物学基础。     

热应激影响鸡肉品质的研究进展

热应激是家禽业最主要的环境应激源之一。急性或慢性热应激均可引起肉鸡生长速度降低、饲料转化效率下降、免疫系统受损、肠道菌群紊乱及肉质下降。影响肉质方面,主要涉及3种机制:(1)屠宰应激和屠宰后,糖原转化导致乳酸积累增加,特别是在肌肉温度较高时,pH值迅速下降,引起肌浆蛋白变性,导致肌肉持水能力降低;(2)热应激加速肉鸡呼吸以散热,引起血液中二氧化碳浓度增加和pH值下降,进而引发骨骼肌代谢性酸中毒。呼吸频率增加与高浓度皮质类固醇激素释放有关;3)热应激诱导活性氧产生,加速肉鸡机体氧化应激,从而破坏调节肌肉肌浆钙水平酶活和功能。本综述介绍了热应激介导酸碱状态、氧化反应和皮质酮激素分泌变化方面影响鸡肉品质的研究进展。     

不同糖源饲料对卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)生长、体组成、血糖水平和肝脏糖酵解酶活力的影响

分别以葡萄糖、蔗糖、糊精、玉米淀粉和糊化玉米淀粉为糖源配制成5种等氮等脂饲料，对初始体重为(31.24±0.58) g 的卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)进行为期56 d 的饲养实验，比较不同糖源饲料对卵形鲳鲹生长、体组成、血液指标和糖酵解酶活力的影响，筛选出最有利于生长的糖种类。结果显示，不同糖源对卵形鲳鲹增重率(WG)和特定生长率(SGR)均有显著影响(P<0.05)，且随糖分子量增大有增大的趋势，其中，糊化玉米淀粉的 WG 和 SGR 最高分别为335.35%和2.62%/d；不同糖源组的脏体比(VSI)、肝体比(HSI)、肝糖原和肌糖原含量以及血糖、血浆总胆固醇和甘油三酯也有显著性差异(P<0.05)，且均为葡萄糖组最高；除己糖激酶(HK)活力外，各糖源组的其他糖酵解酶活力均有显著性差异(P<0.05)，亦是葡萄糖组最高。在本实验条件下，卵形鲳鲹对淀粉类大分子糖的利用效果优于葡萄糖等小分子糖类，糊化玉米淀粉组的生长效果最好；不同糖源饲料对卵形鲳鲹糖代谢过程中糖原合成、糖脂转化、糖酵解等途径的相关指标有一定影响。