马铃薯卷叶病毒外壳蛋白基因克隆转化 及其转基因后代的表达

根据GenBank中的马铃薯卷叶病外壳蛋白基因(PLRV-CP)全序列，设计一对特异性引物，以马铃薯卷叶病毒RNA为模板，克隆了马铃薯卷叶病外壳蛋白基因，在pBI121的基础上构建了植物表达载体。利用PLO(Poly-L-Ornithine)将PLRV-CP基因导入到马铃薯加工型品种大西洋的原生质体中，获得了转基因后代。在5株转化后代中扩增出长度为610bp的目标DNA片断，说明导入的外源PLRV-CP基因已经整合到马铃薯基因组中。Southern blot分析结果进一步证明了PCR结果的正确性。RT-PCR结果表明，在3株转化后代叶片中具有阳性表达。马铃薯卷叶病毒接种实验结果表明，转基因植株比对照有明显的马铃薯卷叶病抗性     

几个易感晚疫病马铃薯品种在黑龙江省的高产栽培技术

黑龙江省是全国的种薯基地，过去每年向省外调出种薯在30～50万t左右，但近年来出现外调种薯滞销现象，调出量已减少到10万t以下。其原因是：（1）易感晚疫病品种的费乌瑞它、大西洋等品种栽培技术不合理；（2）农业机械不配套；（3）防病措施不当，导致发生晚疫病灾害。农民经济收入严重受损，面积逐年下降。恰恰市场需求量大的种薯均为不抗晚疫病的品种。针对这一事实，经过多年的实践与探索，总结出一套较完善的易感晚疫病品种（大西洋、夏坡地、布尔斑克、费乌瑞它）的高产栽培技术措施。目前已在生产上取得了较好成效。     

马铃薯早疫病及综合防治研究进展

马铃薯早疫病是由茄链格孢菌（Alternaria solani）侵染引起的土传、气传多循环流行性病害,在世界各马铃薯种植区域广泛分布,导致马铃薯鲜薯产量和品质下降,严重制约马铃薯产业发展,在世界范围内每年可造成1 000亿美元的经济损失。马铃薯早疫病在我国很多省（自治区）都有不同程度的发生,并有逐年扩大和加重的趋势。本文作者对马铃薯早疫病症状、发病规律、病原菌特征、防治措施进行了归纳总结并对今后研究重点进行展望,以期为马铃薯早疫病的深入研究和防治提供理论依据。     

诱变育种技术在大豆育种与基因挖掘中的应用现状及展望

植物诱变育种能够创造许多优异变异资源,诱变获得的突变体可以作为种质材料,为大豆新品种培育提供丰富的资源;构建的突变体库也有助于大豆功能基因组研究的开展,可为特定性状的研究提供遗传材料。本文介绍诱变育种技术在大豆生长特性、品质和抗性改良育种中的应用,分析利用诱变突变体库进行大豆生长特性、品质性状改良和抗性相关基因挖掘的研究进展,介绍诱变技术与其他生物技术相结合发掘目的基因的应用现状,并展望今后大豆诱变育种技术在基因挖掘方面的应用前景,以期能更好地运用诱变育种技术推动大豆遗传研究和品种选育。     

无选择标记转高赖氨酸蛋白基因水稻植株的培育

利用农杆菌介导遗传转化方法,将带有分别由Ubi组成型启动子和GluB-4水稻种子特异型启动子调控的GsHLP2/GsHLP8基因、选择标记基因为Bar基因的双T-DNA植物表达载体pTTBUG2、pTTBUG8、pTTBGG2、pTTBGG8转入水稻。共获得转化苗124株,PCR结果表明,高赖氨酸蛋白基因GsHLP2/GsHLP8及Bar基因已经共转化到水稻基因组上,共转化率为61.1%。通过Bialaphos抗性试验对转基因后代进行抗性检测,结果表明T1种子对Bialaphos的抗性出现分离。进而对T1代植株进行PCR检测,获得只含有目的基因而不含有选择标记基因的植株,为培育无选择标记转高赖氨酸蛋白基因水稻提供材料。     

马铃薯黑痣病立枯丝核菌及其综合防控研究进展

马铃薯黑痣病在世界各马铃薯种植区域广泛分布,给马铃薯产业带来巨大的经济损失。近年来,马铃薯黑痣病在我国很多省(市、区)都有不同程度的发生,并有逐年扩大和加重的趋势,已成为制约我国马铃薯生产的主要病害。对马铃薯黑痣病病原菌侵染幼芽、茎基部及块茎产生的症状,湿度、连作与病害发生程度的关系,温湿度、酸碱度及不同碳氮源对菌丝生长的影响,病原菌的鉴定方法、致病机制以及分布情况及各地区优势菌种进行归纳,并对农艺措施、选育抗性品种、化学药剂与生物防治等不同措施的优缺点进行分析和总结,以期为马铃薯黑痣病的深入研究和防治提供理论基础。     

基于phy基因的双边界植物表达载体构建

采用同源克隆方法从泡盛曲霉中克隆了1 515 bp 的植酸酶基因,与黑曲霉(A. niger963)phyA2 的核苷酸同源性为95%.以植物表达载体pTTBUG8为基础,构建了由35S启动子调控、具有磷高效利用功能基因(phy)的双边界植物表达载体 pBSP.解决了bar基因及其产物 PAT蛋白的安全性及产权等问题,并为植物养分高效利用基因工程研究奠定了重要基础.     

猪戊型肝炎结构基因ORF2的克隆及其植物表达载体的构建

通过RT-PCR技术从一份猪粪中扩增并克隆了戊型肝炎病毒主要结构基因ORF2部分片段,大小为681 bp,将其克隆于pMD18-T载体。序列分析表明,与GenBank公布的序列一致。然后,将该基因亚克隆到植物表达载体p35S-2300-two-T-DNA-4×Ta1上,并将载体p2300上的CaMV35S启动子替换为E12启动子,构建成植物表达载体p2300-ORF2-E12。通过冻融法将重组质粒导入根癌农杆菌LBA4404中,获得了携带ORF2基因的根癌农杆菌菌株,为转基因植物工作奠定了基础。     

马铃薯镰刀菌枯萎病研究进展及防控手段

为促进马铃薯枯萎病有效防控,推进我国马铃薯产业发展,本文对马铃薯枯萎病症状、传播途径,病原菌分类、生物学特征及致病机制进行归纳,并对各种防治措施的优缺点进行总结.在生产中应充分考虑致病病原菌种类、栽培品种与土壤环境之间的关系,在病害发生的不同时期采取综合的防治措施,以达到理想的防治效果.