苹果轮纹病菌对吡唑醚菌酯的敏感性及Cytb基因序列分析

为了明确苹果轮纹病菌Botryosphaeria dothidea对吡唑醚菌酯的敏感性和吡唑醚菌酯的靶标基因序列, 采用菌丝生长速率法测定了水杨肟酸对B. dothidea 菌丝生长的作用, 探讨了添加或不添加水杨肟酸的情况下病原菌对吡唑醚菌酯敏感性的变化; 并测定了不同产区的80株B. dothidea 对吡唑醚菌酯的敏感性以及440株B. dothidea 对吡唑醚菌酯的抗性; 然后, 扩增并分析了具有不同敏感性的菌株的细胞色素b基因 (Cytb) 序列?结果表明:不同浓度水杨肟酸对菌丝生长的抑制作用不同?添加40 μg/mL水杨肟酸不影响吡唑醚菌酯的EC50?菌株的敏感性频率符合近似正态分布, 各产区菌株对吡唑醚菌酯的敏感性没有显著差异, 吡唑醚菌酯平均EC50为(2.95±2.11) μg/mL, 没有检测到抗性菌株?靶标基因序列分析表明, Cytb基因在F129?G137和G143位密码子上没有产生点突变, 首次发现在143位密码子后有内含子插入?     

十年来苹果轮纹病菌对戊唑醇的敏感性变化

摘S要：为明确2009年和2018年采集的苹果轮纹病菌(Botryosphaeria dothidea)对戊唑醇的敏感性变化,采用菌丝生长速率法分别测定了每个年份采集的50株苹果轮纹病菌对戊唑醇的敏感性。结果表明,2009年采集的50株菌株EC₅₀平均值为 (0.6813±0.5549)mg/L,2018年采集的50株菌株EC₅₀平均值为(1.2864±0.9466)mg/L。随着时间的变化苹果轮纹病菌对戊唑醇的敏感性开始降低,部分菌株产生了2~5倍的低水平抗药性。     

苹果幼树死亡诱因、诊断与防控

对矮砧苹果新植苗木和2~5年生幼树死亡的原因进行研究,表明苗木失水与轮纹病菌协同危害是主要原因;冻害、根部与主干病害、肥害及苗木质量差是重要原因。生产上及时发现问题,根据不同症状,进行准确的病因诊断,有针对性地采用不同的防控措施:培育不潜带轮纹病菌的苗木;苗木贮运、栽植和管理过程防止失水;栽植前用杀菌剂铲除部分病菌;防止冻害;2~5年生幼树合理肥水管理;防止贪绿徒长;有效地预防根部和枝干病虫害发生。     

云南苹果干腐病的侵染规律与化学防治研究

苹果干腐病是云南一些苹果园内为害严重的病害之一,国内尚无系统研究的报道。笔者经过两年多的研究,查明昆明地区该病害的病原菌是以菌丝体、分生孢子器、假囊壳在病斑中越冬;次年春末夏初,越冬菌丝体产生的分生孢子或病部越冬的分生孢子、子囊孢子进行初侵染。经分离、接种、鉴定,确定病原是葡萄座腔菌 Botryosphaeria dothidea(Moung.)Ces et de Not.。小型防治试验及大面积防治示范的结果表明:加强果园管理,增强树势,清除初侵染源,彻底刮除病斑并及时用药等综合防治措施有良好的防治和增产效果,特别是用铁锈明矶液保护刮除病部,效果明显,可大面积推广。     

云南蓝莓枝干溃疡病病原菌鉴定及rDNA-ITS序列分析

 自2010年云南省昆明市周边及丽江市蓝莓商业化种植区发生了一种蓝莓新病害,典型症状为茎干和枝条枯萎死亡,发病早期部分枝条和叶片枯萎但不脱落,韧皮或木质部横切面呈轻棕黄色或灰黑色变色。采用温室接种致病性测定、形态及分子鉴定等方法对蓝莓枝干溃疡病病原进行研究。结果表明：从各种植区采集病样 15 份,分离获得来自蓝莓病株茎干、枝等器官的15个生长较一致的真菌分离物;致病性试验证实,均为蓝莓枝干溃疡病病原菌;经形态学鉴定为Botryosphaeria dothidea,利用ITSI-5.8S-ITS4进行PCR扩增,并将测序结果在GenBank中进行同源性比对分析显示,其序列分析结果与B.dothidea的同源性为 99%~100%,分子鉴定与形态学鉴定结果一致。该病原菌在蓝莓果树上的危害在云南省内尚属首次报道。     

灰枣红点软腐病菌拮抗菌株CN124的发酵培养基优化

为了降低灰枣红点软腐病对河南省灰枣的危害,减轻农药残留,探索灰枣红点软腐病的生物防治的途径。本研究以龟裂链霉菌菌株CN124为试材,灰枣红点软腐病菌Btryosphaeria dothidea作为目标防治菌株,采用单因子与均匀试验相结合的方法,通过均匀设计回归分析,筛选出菌株CN124对灰枣红点软腐病菌拮抗作用最佳的发酵培养基配方。结果表明,其最佳配方为:淀粉11.67%,玉米粉2.69%,(NH4)2SO40.22%,CaCO30%,NaCl 0.03%。     

轮纹病菌侵染对不同抗性苹果品种膜透性及防御酶的影响

对轮纹病菌Botryosphaeria berengriana f.sp.piricola侵染3个不同抗性苹果品种枝条后的细胞膜透性及防御酶系的变化进行了测定,以分析其与抗性的关系。结果表明,接种后38天内,3个品种电解质渗出率均有先升后降的趋势,鸡冠、国光和富士电解质渗出率变化的峰值分别为8.1%、12.2%和18.4%,抗病品种鸡冠的变化明显低于感病品种富士和国光。接种后35天内,苯丙氨酸解氨酶、超氧化物歧化酶、过氧化物酶和多酚氧化酶也表现为先升后降的趋势,且抗病品种的峰值出现较晚。抗病品种鸡冠的苯丙氨酸解氨酶、超氧化物歧化酶和过氧化物酶活性变化峰值分别为234、50.88U·g-1FW·h-1和14.22U·g-1FW·min-1,高于国光和富士,而多酚氧化酶活性变化的峰值为37.78U·g-1FW·min-1,低于感病品种国光和富士。     

苹果种质资源枝干轮纹病抗性评价

将田间自然发病抗性鉴定法与利用苹果轮纹病菌ZZ26人工接种枝条鉴定法相结合,对189份栽培种苹果种质资源进行了苹果轮纹病综合抗性鉴定,并根据抗病性鉴定结果对其进行抗病类型分类和评价。结果表明:不同苹果种质资源抗病性表现存在差异,但参试种质中未发现免疫种质。通过人工接种,189份苹果种质资源的抗病类型可分为:高抗(16个);中抗(75个);中感(81个);高感(17个)。通过田间调查,2012年得到抗病类型3种,即高抗(144个);中抗(44个);中感(1个)。2013年同样是3个抗病类型:高抗(14个);中抗(162个);中感(13个)。两年调查均无高感品种。2017年再次调查,结果显示田间调查与人工接种鉴定结果有随种植年限增加一致率逐渐提高的趋势,2012年为13.23%,2013年为38.62%,2017年则超过一半,达到57.14%。经过综合抗性筛选,最终得到表现一致性较好的高抗种质2份:北之幸和秦冠。     

葡萄VvSUC12基因启动子的克隆及上游调控因子鉴定

枝干病害葡萄溃疡病近年来严重限制了葡萄产业发展。研究表明葡萄蔗糖转运蛋白参与寄主植物和病原菌的互作过程。为解析蔗糖转运蛋白VvSUC12在葡萄免疫反应过程中的功能,本研究克隆了VvSUC12基因翻译起始位点上游1 500 bp的启动子区,通过生物信息学分析发现该区域包含4个Dof转录因子结合序列(A/TAAAG)及多种激素调节与防御相关的顺式元件。实时荧光定量分析显示,接种可可毛色二孢菌显著诱导VvSUC12和VvDof19基因的表达。通过酵母单杂交实验筛选得到与VvSUC12启动子互作的转录因子VvDof19。酵母双杂交实验证实VvDof19具有自激活活性;进一步通过烟草瞬时表达发现Dof19-GFP的相对GUS活性约为对照GFP的9倍,表明转录因子VvDof19能够激活VvSUC12基因的表达。研究结果为深入研究蔗糖转运蛋白在葡萄免疫反应中的功能奠定基础。