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根据GenBank报道的人白细胞介素-2(hIL-2)基因分析设计并合成引物,以本室构建的pPIC9K/IL-2突变体(编码125位半胱氨酸→丙氨酸、18位亮氨酸→蛋氨酸、19位亮氨酸→丝氨酸)为模板,PCR扩增出突变型人白细胞介素-2基因.用EcoR I和BamHI对目的基因进行双酶切后,插入大肠杆菌表达载体pBV220,转化宿主菌JM109,经菌落PCR筛选阳性重组子、酶切坚定,DNA序列分析证实,重组质粒pBV220/IL-2含有突变型人IL-2编码序列及正确的开放阅读框.经42℃热诱导表达,SDS-PAGE电泳显示,诱导表达碎菌后的沉淀中有分子质量大小约为15 kD的外源蛋白产生,经Western印迹证明为rhIL-2.成功建立了突变型人白细胞介素-2(rhIL-2)基因的大肠杆菌表达系统,为rhIL-2的生产及临床应用奠定基础. 相似文献
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[目的]探讨RAD-seq技术在中国杜鹃花复杂类群分类与物种界定方面的优势。[方法]本研究对杜鹃花属85个种进行了RAD-seq测序,评估了数据的基本特征;同时,以马缨杜鹃基因组作为参考,获得高质量SNP位点,并进一步通过ADMIXTURE、PCA、GCTA及FastTree软件对其进行基因分型、聚类与系统树构建。[结果]本研究中85份材料比对至马缨杜鹃的平均比对率87.52%,在参考基因组上的平均覆盖度为5.21%,最终获得了620 371个SNP位点。基于PCA、Structure聚类及系统发育树的分析结果,本研究支持目前在亚属水平(杜鹃亚属、常绿杜鹃亚属、马银花亚属、羊踯躅亚属、映山红亚属和长蕊杜鹃亚属)的形态学分类处理,并突出了鳞片在杜鹃属植物分类中的重要作用。[结论]RAD-seq数据产生的大量SNP位点可区分杜鹃花亚属和组内的大部分物种,说明其在复杂类群分类与物种界定方面具有可行性。 相似文献
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【目的】探明适宜半夏设施栽培的中药渣基质的最佳配比,为其在半夏种源扩繁及设施栽培上应用提供理论依据。【方法】以中药渣为有机基质成分,研究蛭石、椰糠等无机质与中药渣不同配比基质(T1,100%中药渣;T2,75%中药渣+15%椰糠+10%蛭石;T3,50%中药渣+30%椰糠+20%蛭石;T4,25%中药渣+45%椰糠+30%蛭石;T5,100%椰糠)对设施栽培半夏组培苗生长发育及产量的影响。【结果】不同处理半夏最终出苗率达99.60%~100.00%,其中T3、T4和T5的出苗率均达100.00%;各处理半夏6月22日倒苗数为88~238株,倒苗率为35.20%~95.20%,T5和T4在90%以上,T3最低,仅35%左右;不同处理半夏珠芽数为662~812个,产量为149.68~199.00 g/667m2,均以T3... 相似文献
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