小麦Glu-3位点基因拷贝数的变异分析

【目的】基因拷贝数变异是一种常见又重要的基因结构变异,往往影响个体表型。低分子量麦谷蛋白（low-molecular-weight glutenin subunit,LMW-GS）是小麦贮藏蛋白的主要组成部分,位于Glu-3位点。小麦作为异源六倍体,其庞大且复杂的基因组结构导致难以利用传统方法检测目的基因的拷贝数,针对小麦基因组,筛选可靠稳定的内参基因和体系,探索适合复杂基因组的拷贝数变异测定技术,测定Glu-3位点LWM-GS基因拷贝数。【方法】以Acc1为内参基因,根据基因序列设计内参引物和探针,通过定性和定量PCR测定内参基因在12个普通小麦品种中的拷贝数,分析该基因拷贝数在不同品种间的稳定性;又以小麦品种篙优2018的5个稀释浓度的基因组DNA为模板,利用qRT-PCR验证Acc1内参系统的重复性和准确性;根据Glu-A3位点LMW-GS基因序列设计特异性引物及探针,利用qRT-PCR和ddPCR 2种方法检测8个小麦品种Glu-A3位点基因拷贝数,比较后选择更优的高通量基因拷贝数检测方法;再根据Glu-B3和Glu-D3位点LMW-GS基因序列设计相应的特异性引物及探针,并利用ddPCR技术检测和分析了231份小麦品种的Glu-A3、Glu-B3和Glu-D3位点上LMW-GS基因拷贝数。【结果】Acc1在12个普通小麦品种间、同一品种5个DNA稀释浓度间的拷贝数测定结果一致,技术重复间的变异系数仅为0.07%—0.77%,所构建的Acc1内参系统稳定;比较qRT-PCR和ddPCR 2种拷贝数检测方法,8个品种所测的Glu-A3位点拷贝数结果一致,分别为3、5、3、4、3、3、3和3;且ddPCR检测重复间的变异系数为0.30%—1.67%,远低于qRT-PCR的3.14%—12.72%,更加可靠;利用ddPCR对231份普通小麦品种的Glu-A3、Glu-B3和Glu-D3位点上LMW-GS基因拷贝检测后分析发现,大多数小麦品种在3个位点上的拷贝数为4,所占频率分别为51.95%、32.03%和28.57%,Glu-3位点总拷贝数变异范围为10—21,变异系数为16.12%。【结论】Acc1内参系统具有良好的稳定性和重复性,可以用作小麦Glu-3位点和其他目的基因拷贝数检测的内参;qRT-PCR和ddPCR均可用于小麦基因拷贝数的检测,但后者更稳定、可靠,且操作简单、检测通量高。     

影响猪精液中原生质滴高的原因分析

猪精液利用率的高低直接影响着顶级公猪的使用率和覆盖面,分析某存栏2 000头公猪站数据显示,导致猪精液利用率低的因素主要有原生质滴高、活力低、密度低、粘连等,而原生质滴高占最主要的因素。文章旨在探讨导致猪精液原生质滴高的原因,从而能针对性采取措施来降低原生质滴,提高精液利用率,提高顶级公猪的利用率,扩大顶级公猪精液的覆盖率。     

花期前后高温对玉米花粉发育及结实率的影响

为明确花期不同梯度高温对玉米开花特性和花粉活力的影响,以热敏感基因型玉米品种‘驻玉309’为试验材料,于花期(吐丝前8d～吐丝后8d)进行不同程度高温(31、34和37℃)处理,测定受精结实率、雄穗性状、开花时间、花粉活力及花粉超显微结构,分析生育期前后的高温对受精结实、开花特性及花粉活力的影响。结果表明,花期高温胁迫显著降低玉米受精结实率,对抽雄吐丝间隔期无显著影响,但盛花期提前;极端高温则导致玉米抽雄期显著提前、开花期和盛花期延后,抽雄吐丝间隔期延长;花期高温使花粉粒形态皱缩、萌发孔内陷,显著降低花粉活力,且温度越高,花粉活力降低幅度越大。因此,花期前后高温通过影响玉米影响雄穗开花特性、延长抽雄吐丝间隔期、影响花粉粒形态、降低花粉活力,从而降低玉米的小花受精率和籽粒结实率。     

氢氧化钠溶液变质了吗?

<正>马上就要进行实验操作考试了,天敏和燕蕾两位同学应邀来到实验室帮助老师整理仪器和药品。就在整理工作快要结束的时候,一瓶敞口放置在讲台上的氢氧化钠溶液引起了她们的注意。天敏对燕蕾说:"这瓶溶液敞口放在这里,是不是早就变质了啊?",燕蕾回应到:"不一定啊,既然咱们就在实验室里,不如亲自探究一下     

菊花新品种的培育

菊花新品种的培育,是通过有性繁殖的途径来完成的.有性繁殖即种子繁殖.种子的获得是通过菊花雄蕊和雌蕊的授粉受精作用产生的.     

西瓜未受精子房离体培养技术

西瓜未受精子房离体培养作为单倍体育种的有效方法,可极大提高育种效率。以西瓜‘早佳’未受精子房为试材,对西瓜未受精子房出胚率的影响因素进行了研究,并鉴定了再生植株倍性。试验结果表明,栽培季节对西瓜未受精子房离体培养有很重要的影响,在相同的培养条件下,秋季栽培出胚率可达21.33%,高出春季栽培约6%;取材当天的日最低、最高气温对西瓜未受精子房离体培养出胚率也有一定的影响,在21～35℃范围内日平均出胚率均可达10%,显著高于过低或过高气温下统计的出胚率;4℃低温预处理并不能提高西瓜胚状体诱导效率。利用染色体计数法与流式细胞仪鉴定36棵再生植株倍性,单倍体率为97%、二倍体率为3%。     

葫芦科植物离体雌核发育研究进展

离体雌核发育诱导单倍体是植物单倍体育种的重要手段之一,笔者对葫芦科植物离体雌核发育影响因素的最新研究进展进行了综述,主要包括基因型、取样时期和取样部位、培养基、预处理、栽培季节等对葫芦科蔬菜离体雌核发育的影响,并对离体雌核发育存在的问题进行了分析和讨论,以期为葫芦科蔬菜离体雌核发育研究工作的开展提供参考。     

猪人工授精失败原因与对策

1猪人工授精失败的原因 猪人工授精失败的原因很多,结合笔者的实践归纳起来主要有以下几个方面: 1.1受胎率低、复配次数增多 (1)部分农户掌握受精时间不准确,导致受胎率低下; (2)精液运送方法不当,没有采取有效的保管措施,没有使用液氮罐等保温设施,导致猪精子被外界不利因素致死,如阳光照射等.     

良种猪繁殖八注意

1．公母比例 采用本交方法1头公猪年可配母猪20～30头，采用人工受精1头公猪年可配母猪150～500头。母猪配种后，经过一个发情周期（21天）没有发情表现，6周后再观察1次，仍无发情表现，可视为妊娠。     

提高棚室草莓品质“五招”

一、选择品种只有在低温条件下花粉多、果实酸味小、畸形果少的品种,才适合栽培。从品质角度考虑,一般宜选择"丰香"和"明宝"等品种。二、增强光照光照不仅直接影响植株的光合作用,还间接影响果实着色。如果在开花前后光照不足,就会影响花粉内淀粉的积累,使花粉萌发时能量不够,导致发芽率降低,进而影响受精,产生畸形果。因此,盖棚