中药“化橘红”原料植物化州柚种质资源初步研究

种质资源的研究对中药“化橘红”原料植物橘红(化州柚)Citrus maxima‘Tomentosa'优良品种的选育具有重要作用.通过田间调查植物学性状及室内测定果实总黄酮、柚皮苷、多糖、锌、铁等有效成分,对广东省化州市平定镇化州柚资源进行整理和分析的结果表明,该地的化州柚资源有5个品系,当地群众分别取名为黄龙、正毛、密叶正毛、假西洋和副毛,黄龙和假西洋的有效成分总体上高于正毛、密叶正毛和副毛.     

土壤调理剂对马铃薯降镉效果研究

针对恩施地区表层土壤中硒、镉呈伴生关系,降低农作物对土壤中镉的吸收是解决恩施富硒土壤安全利用的关键。通过采集恩施富硒高镉地区耕地表层土壤开展盆栽试验,研究了9种土壤调理剂对马铃薯中镉含量以及土壤镉钝化效果的影响。结果表明：供试9种土壤调理剂均能提高土壤pH值、降低土壤中被农作物直接利用可交换态镉含量,并且起到了促进马铃薯植株的生长、缓解土壤中镉对马铃薯胁迫的作用;由有机质、生物炭、含磷材料、黏土矿物以及硅钙材料等钝化剂根据不同配比混合而成的9种土壤调理剂能有效降低马铃薯中镉的含量,以T7调理剂效果最佳,可在恩施高镉土壤马铃薯种植区进行相关推广。     

猪瘟病毒感染致外周免疫器官损伤的病理组织学观察

将10头28日龄健康仔猪随机分成2组,其中感染组8头,对照组2头。感染组按1 mL/头颈部肌注猪瘟病毒(CSFV)石门株血毒(104TCID50/mL)进行人工感染,对照组不做任何处理。2 d后感染组仔猪体温升至40~41.5℃,稽留不退,而对照组体温正常。采集体温升高的仔猪扁桃体,运用RT-PCR方法检测,结果CSFV均为阳性,表明人工感染CSFV成功。分别于感染后4,7 d剖杀感染组和对照组仔猪各1头,剖解后观察各器官大体病变并采集脾脏和淋巴结等外周免疫器官制作石蜡切片,观察病理组织学变化;其余感染组仔猪分别于感染后13,16(2头),19,23,31 d自然死亡,死亡后按剖杀猪方法同样处理。组织学观察显示:随着病情的发展,感染组仔猪的脾脏和淋巴结的淋巴滤泡逐渐发生萎缩、甚至消失,脾脏的动脉周围淋巴鞘、淋巴结的副皮质区细胞亦逐渐减少坏死,即造成了T、B淋巴细胞的渐进性减少,而对照组无异常变化。结果表明:CSFV感染仔猪后,可引起脾脏淋巴结的淋巴细胞渐进性变性与坏死,造成免疫损伤。     

牦牛产业化开发对策浅谈

牦牛是我国青藏高原地区的重要资源和优势畜种,是托起川西北牧区农牧民群众生存发展的"雪域之舟".西华大学经济与贸易学院王丽铭副教授曾在<以特色畜牧业产业化牵引民族地区构建和谐社会>中提出:要以特色畜牧业的产业化发展,促进民族地区人与自然的和谐,促进民族地区经济社会的全面发展,促进民族关系的和谐发展,进而推动整个社会主义社会的和谐发展.     

ORF9基因缺失突变PCV2的构建与部分生物学特性

设计1对针对猪圆环病毒2型（PCV2）全基因组的特异性引物,从疑似断乳仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）的病料中经PCR直接扩增出PCV2全基因组,再与载体pMD18-T Simple连接后构建重组质粒pMD18-T Simple-PCV2（命名为P-S-PCV2）。用ORF9特异的限制性内切酶Bpu10Ⅰ对P-S-PCV2进行酶切、补平连接反应,构建了ORF9基因缺失突变的重组质粒（命名为P-S-PCV2-J）。用SacⅡ对基因缺失突变的重组质粒进行酶切,获得的线性化基因突变PCV2基因组在体外进行自身环化,形成了相应缺失基因DNA（命名为PCV2-J）。用PCV2-J缺失突变株进行细胞转染、动物致病性和免疫原性、T淋巴细胞亚群的动态变化等部分生物学特性的研究。结果显示：PCV2-J转染IBRS-2细胞后,电镜观察可见病毒颗粒,PCR-RFLP检测有突变株生长;PCV2-J接种仔猪后无临床典型大体病变,PCR-RFLP检测淋巴结中有PCV2-J突变病毒的感染;PCV2-J免疫仔猪后的抗体水平在第2周开始上升,与对照组相比差异显著,CD3＋下降,与对照组无差异,CD4＋下降,第1周与对照组差异显著,CD8＋与对照组差异不显著。结果表明,ORF9基因缺失突变的PCV2仍具有复制感染能力,但免疫原性减弱。     

生长猪“瑞兰安”田间试验的启示

猪繁殖与呼吸综合征（PRRS,俗称蓝耳病）是影响我国乃至全世界养猪业的重大猪病之一,免疫防控是控制蓝耳病的重要途径,但一直以来是毁誉参半。究其原因,多半与蓝耳病本身的免疫特点及目前蓝耳病疫苗的局限有关。为了进一步了解我国蓝耳病疫苗“瑞兰安”对我国猪群田间使用的安全性和在目前蓝耳病感染现状下的有效性,我们在全国范围内安排了一系列“瑞兰安”免疫后安全性、有效性评估试验。本文将简单介绍12个生长猪群免疫“瑞兰安”后的总体结果,也将分享本次试验给我们带来的一些关于蓝耳病及成功免疫蓝耳病疫苗的一些启示,希望能为养猪同仁提供借鉴。     

水牛KDM4D基因克隆分析及其真核表达载体的构建

旨在克隆水牛组蛋白去甲基化酶KDM4D (lysine K-specific demethylase 4D)基因,对其进行生物信息学分析,并构建KDM4D基因的真核表达载体,为研究KDM4D基因在水牛体细胞核移植(somatic cell nuclear transfer,SCNT)胚胎发育中的作用奠定基础。试验从水牛睾丸组织中提取总RNA,反转录cDNA后, RT-PCR技术克隆KDM4D基因片段,并运用生物信息学软件对序列进行分析;随后将KDM4D基因片段连接至真核表达载体pEGFP-C1,再把重组质粒转染进HEK293T细胞。结果表明,克隆所得的水牛KDM4D基因片段编码区全长1 155 bp,共编码384个氨基酸。水牛KDM4D基因与黄牛、山羊、绵羊、犬、猫、猪、人、小鼠、大鼠的同源性分别为98.4%,96.6%,96.3%,84.9%,84.1%,81.4%,80.4%,77.4%,77.3%。多重比较和进化树分析结果显示,KDM4D基因在不同物种及生物进化中具有较高的保守性。蛋白结构域分析显示,克隆所得的KDM4D蛋白结构特殊,只具有1个JmjN (Jumonji N)和1个JmjC (jumonji C)结构域,与KDM4家族其他成员相比缺少PHD (plant homeodomain)和Tud (tudor)功能域。KDM4D蛋白质三级结构预测结果显示,水牛、黄牛和人3种物种间具有较高的相似性。转染结果显示,构建的重组质粒可以在HEK293T细胞中表达。本试验成功克隆水牛KDM4D基因,对其进行生物信息学分析,构建了真核表达载体pEGFP-C1-KDM4D,并在HEK293T细胞中成功表达。     

PRRSV感染致断奶仔猪肺脏和外周免疫器官的病理损伤

用PRRSV ATCC VR-2332株感染8头28日龄仔猪,同时设立2头健康对照猪.PRRSV单独感染猪分别于感染后7,17,25 d各剖杀2,3,3头,对照组于17,25 d各剖杀1头.剖杀后采集脾脏、肺脏和全身主要淋巴结(颌下淋巴结、肺门淋巴结、腹股沟淋巴结和肠系膜淋巴结)等免疫器官,用甲醛溶液固定,组织石蜡切片以观察显微病理变化.试验组猪的抗体和抗原检测结果均表明,感染后7 d血清PRRSV抗体和免疫器官组织PRRSV抗原部分呈阳性;剖检和石蜡切片结果均显示,试验猪于攻毒后,随着病程的发展,发生了不同程度的间质性肺炎及相应的显微病变,PRRSV单独感染能引起免疫器官以淋巴细胞及巨噬细胞变性坏死为特征的急性炎症变化,造成免疫损伤,进而引起免疫抑制.     

菠萝蜜实时荧光定量PCR分析中内参基因的筛选

为筛选菠萝蜜实时荧光定量PCR研究用的内参基因,以菠萝蜜不同发育阶段的果实、叶和花序为材料,分析GAPDH、18S rRNA、UBQ、ɑ-tubulin和β-tubulin 5个内参基因的表达情况,并对其表达稳定性进行分析。结果表明,在各组织不同发育阶段中,5个内参基因的表达丰度变化存在差异;geNorm、NormFinder和BestKeeper 3种方法得出的结论有所不同,经RefFinder综合评价后,果实中最稳定的3个内参基因是UBQ、GAPDH、18S rRNA;叶片中最稳定的3个内参基因是UBQ、GAPDH、β-tubulin;花序中最稳定的3个内参基因是UBQ、GAPDH、ɑ-tubulin。     

改性粘土矿物对农作物镉吸收的影响

恩施土家族苗族自治州土壤镉元素与硒元素的空间分布具有较大的相关性,为合理开发利用恩施地区富硒土壤资源,降低农作物对土壤中镉的吸收,本文对海泡石和凹凸棒石2种粘土矿物进行改性,并采集恩施富硒高镉区表层耕地土壤开展盆栽试验,研究在添加不同改性粘土矿物情况下,大蒜鳞茎对土壤中镉的吸收情况,并探讨改性粘土矿物对土壤中重金属钝化的机理。结果表明：天然海泡石和凹凸棒石均可作为镉钝化剂对土壤中的镉进行吸附固定,且天然海泡石降镉效果优于凹凸棒石;改性后的粘土矿物均能有效降低大蒜中镉含量的积累;10%浓度胡敏酸溶液有机改性后的海泡石以及5%NaOH溶液碱改性后的凹凸棒石在施用量为400kg·667m^-2时降镉效果最佳,生产出的大蒜镉含量均未超过食品安全国家标准。