蜂毒肽对农作物生理指标及防御系统酶影响的研究

系统研究了蜂毒肽对玉米、番茄、大豆、大白菜等农作物生长发育过程中生理指标的影响及对玉米防御系统酶的作用。结果表明，蜂毒肽对农作物的影响具有普遍性，对细胞中的叶绿素、可溶性糖、核酸及蛋白质含量，低浓度有一定促进作用，高浓度有抑制作用，但影响都很微弱(t检验P>0.05)。蜂毒肽对植物防御系统酶具有诱导效应，5 mg/L蜂毒肽使其活性快速增加，其中PAL、PPO在喷药后48 h达到峰值，分别比对照提高178%和9.8%；而SOD在6 h即可达到峰值，比对照提高31.5%；只有POD在喷洒50 mg/L蜂毒肽后48 h达到最大值。玉米POD同工酶谱的研究进一步表明蜂毒肽对有的酶谱带（品种1的P11谱带）有很强的诱导作用，有的甚至诱导出1条新带（品种2的P4谱带）；而对有的谱带有抑制作用，而且对不同品种POD酶的作用不尽相同，但喷药后2个品种POD酶总体含量均高于对照，与酶活测定结果相同。     

蜂毒肽获取方法的研究概述

蜂毒肽是蜂毒中的主要活性成分,作为典型的抗菌肽,具有镇痛、抗炎、抗病毒、抗肿瘤等药理活性,有较大的科学研究价值和广泛的医疗应用价值。但蜂毒肽纯品获取的高成本阻碍了其开发和应用。主要从蜂毒中分离纯化和生物工程技术应用两个方面概括和比较了目前获取蜂毒肽的方法,以期为相关研究提供参考。     

杂合抗菌肽Mel-MytB在毕赤酵母中的表达及其抗菌活性测定

为了获得抗菌活性较强的抗菌肽，将蜂毒肽（Melittin）与贻贝素B （Mytilin-B）的核心功能序列杂合，以Melittin （3-14）和Mytilin-B （13-27）的成熟肽段作为模板序列，根据巴斯德毕赤酵母（Pichia pastoris）偏好密码子，采用SOE方法合成杂合抗菌肽Mel-MytB（MEM）基因。改造后的基因克隆到pPICZα-A质粒，构建分泌型重组酵母表达载体pPICZα-A-MEM，而后经Sac Ⅰ酶切线性化后电转入毕赤酵母受体菌X-33。结果表明，在醇氧化酶（AOX）启动子调控下，分子质量约3.0 ku的Mel-MytB杂合抗菌肽获得表达，具有热稳定性和酸稳定性，煮沸40 min、pH 2.0~10.0范围内抑菌活性基本不变。抗菌特性研究结果表明，该表达产物具有广谱抗菌活性，其对大肠杆菌ATCC25922、金黄色葡萄球菌ATCC25923/ATCC6538、肠道沙门氏菌ATCC13076、鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028、副溶血弧菌ATCC17802、创伤弧菌ATCC27562、枯草芽孢杆菌ATCC6633的MIC值分别为5.1、2.2、2.0、4.6、7.6、9.4、13.2和59.4 μg/mL。因此，重组抗菌肽Mel-MytB在疾病防治和动物饲料添加剂等方面具备较好的应用前景。