超高效液相色谱-串联质谱法同时测定海藻肥中的甘露醇和甜菜碱

建立了超高效液相色谱-串联质谱法同时检测海藻肥中甘露醇和甜菜碱的新方法。使用Waters BEH C18色谱柱,流动相为乙腈和5 mmol/L乙酸铵溶液,流速为0.3 m L/min,柱温为35℃。采用正负离子同时扫描的方式测定,甘露醇和甜菜碱m/z为89和59.2;母离子的m/z分别为181和118,结果以外标法进行计算。结果表明,甘露醇和甜菜碱在本方法中的线性范围分别为5~50 mg/L和0.05~0.5 mg/L,当S/N为3时检出限分别为0.18 mg/L和0.083 mg/L。2种物质分别在3个水平进行加标回收实验,甜菜碱的平均加标回收率在80.3%~109.44%之间;甘露醇的平均加标回收率在85.52%~106.55%之间,满足实际应用需求。     

拟南芥rd29A启动子在不同胁迫下GUS活性分析

通过特异PCR扩增技术,以拟南芥基因组DNA为模板,克隆了rd29A基因上游1 600 bp的胁迫诱导型启动子序列。将此1 600 bp的调控序列与GUS基因连接构建植物表达载体pBI101-rd29A-GUS,并用农杆菌介导法转基因拟南芥。定量PCR结果显示,干旱胁迫下转基因纯合株系中rd29A显著上调表达。GUS组织化学染色及GUS定量分析结果表明,在ABA、甘露醇和NaCl等胁迫处理下,GUS活性增强,尤其是ABA胁迫处理。说明rd29A启动子可以增强逆境下GUS基因的表达,可作为一种诱导型启动子应用于提高作物抗逆性的基因工程研究中。     

模拟干旱胁迫对马铃薯组培苗发育及试管薯形成的影响

本研究以马铃薯品种(品系)‘克新一号’、‘夏坡蒂’、‘K1’和‘K2’组培苗为试验材料,以不同浓度的甘露醇和山梨醇模拟干旱胁迫,研究干旱胁迫对马铃薯组培苗生育进程及试管薯产量的影响。结果表明:在遭受干旱胁迫下,不同马铃薯品种的叶片数、株高均会随干旱胁迫而降低;不同马铃薯品种叶和茎干物质量的变化随着干旱胁迫程度的加重而出现不同程度的降低趋势;不同品种马铃薯的试管薯结薯总数与大中薯率随着干旱胁迫程度的增加出现降低趋势,低浓度(0.1 mol/L)的甘露醇和山梨醇会诱导结薯提前,推测可能是马铃薯面临干旱胁迫的一种应对机制。本研究结果可为马铃薯节水抗旱技术研究及抗旱品种筛选提供一定的理论依据。     

表油菜素内酯对香石竹切花活性氧代谢的影响

[目的]探讨表油菜素内酯对香石竹切花活性氧代谢的影响，为香石竹切花保鲜提供参考。[方法]用表油菜素内酯和活性氧清除剂甘露醇处理切花，以清水为对照，比较其对香石竹切花活性氧代谢的影响。[结果]与甘露醇相比，表油菜素内酯能有效地增大花径，提高超氧化物酶、过氧化氢酶活性，延缓O2·产生速率，H2O2含量、MDA含量和膜相对透性上升的幅度。[结论]表油菜素内酯能有效缓解切花活性氧的产生与积累，提高活性氧清除能力，从而延长瓶插寿命。，     

蛹虫草中游离糖醇、小分子糖类成分研究

建立高效阴离子色谱-脉冲安培法同时测定赤藓糖醇、阿糖醇、海藻糖、甘露醇和葡萄糖的方法 ,方法学考察结果表明该方法精密度(1.4%~4.4%)、稳定性(2.1%~4.9%)、重复性(0.6%~4.5%)和回收率(95.2%~105.7%)良好。用该方法对13个蛹虫草(Cordyceps militaris)子实体和4个菌丝体样品中游离糖醇、小分子糖类成分进行分析,结果表明蛹虫草子实体中含海藻糖(1.04%~19.17%)、甘露醇(0.96%~3.93%)和葡萄糖(1.46%~14.93%),其中海藻糖和葡萄糖含量呈显著负相关;菌丝体中含甘露醇(3.66%~6.70%)和葡萄糖(0.42%~1.06%)以及少量阿糖醇(0.02%~0.12%)。     

甘露醇对马铃薯试管苗生长和有效保存期的影响

为给马铃薯试管苗生长和有效保存提供试验依据,以费乌瑞它脱毒试管苗为试验材料,添加不同甘露醇浓度(1％～5％)的继代培养基对其进行增殖培养,比较不同甘露醇浓度对试管苗生长和有效保存期的影响.结果表明:所试甘露醇浓度均对马铃薯试管苗的生长有不同程度的抑制作用,同时还延长了试管苗的保存时间,其中以继代培养基中添加1％～2％的甘露醇的保存效果最为理想,可使试管苗保存7个月以上,成活率达50％,且不影响试管苗继代.     

罗伯茨虫草及其无性型活性成分分析

以10株野生罗伯茨虫草及其无性型罗伯茨被毛孢液体发酵菌丝体为研究对象,采用比色法和高效液相色谱法（HPLC）分别测定其多糖、甘露醇、尿嘧啶、尿苷、鸟苷、腺嘌呤、腺苷及虫草素等活性成分含量,并与西藏那曲野生冬虫夏草作比较。结果表明,罗伯茨虫草尿嘧啶含量高于冬虫夏草,尿苷、鸟苷、腺嘌呤、腺苷含量与冬虫夏草接近,而多糖和虫草素含量与冬虫夏草差距较大。在10株罗伯茨被毛孢中,菌株HRT06的多糖、尿苷、鸟苷及腺苷含量最高,与其余菌株有显著性差异（p〈0.05）,且菌株HRT06的腺苷含量为0.140 mg·g-1,达到中国药典冬虫夏草腺苷含量不得少于0.100 mg·g-1的规定,可以筛选作为优良菌株加以利用。本研究测定罗伯茨虫草及其无性型罗伯茨被毛孢活性成分含量,为综合评价罗伯茨虫草应用价值及其开发利用提供科学依据。     

海岛棉转录因子基因GbMYB60的克隆、表达及其抗逆性分析

MYB转录因子是在真核生物细胞内广泛存在的一类转录因子蛋白,在植物的生长发育、代谢调节、抗病抗逆、以及激素介导的信号路径等方面都发挥着重要的作用。本研究从海岛棉品种海7124中克隆得到一个MYB转录因子基因,根据序列同源性和进化分析,将其命名为GbMYB60。该基因序列长990 bp,编码一个36.9 k D的R2R3类MYB转录因子蛋白。GbMYB60蛋白被特异地定位于植物细胞核。GbMYB60基因的表达水平较低,在真叶中优势表达,根系中表达量最低。该基因受甘露醇、Na Cl、低温、高温等非生物逆境,以及脱落酸、乙烯利、茉莉酸甲酯和水杨酸等植物激素的诱导上调表达。利用病毒诱导的基因沉默技术在海岛棉中干涉GbMYB60发现,降低GbMYB60基因的表达水平,使棉花幼苗对高盐胁迫的耐受性降低;但GbMYB60干涉的植株在甘露醇溶液的处理下与对照植株并无显著的抗性差异。     

60Co-γ诱变白三叶瑞文德抗旱突变体的离体筛选与鉴定

干旱是植物生长和发育的限制因素之一,因此抗旱基因克隆和功能研究具有应用价值。本试验以甘露醇为选择剂,对~(60)Co-γ诱变白三叶瑞文德品种(Trifolium repens‘Rivendel’)4个辐照剂量下的植株进行抗旱突变体的离体筛选,确定4份植株对甘露醇的适宜浓度、半致死浓度和致死浓度,通过测定株高、根长、生物量、叶绿素、丙二醛(MDA)、脯氨酸(Pro)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD),比较诱变植株与未诱变植株耐旱性的差异,采用标准差赋予权重法对4份植株的耐旱性进行综合评价。结果表明:诱变植株20Gy和80Gy对甘露醇具有比未诱变植株0Gy更高的半致死浓度和致死浓度。通过4份植株的耐旱性综合评价得出:4份植株的耐旱性由强到弱依次为:20Gy90Gy80Gy0Gy,诱变植株的耐旱性均强于未诱变植株。该研究为抗旱基因克隆及功能分析奠定基础,对揭示植物抗旱的分子机理具有重要的理论意义。