己烯雌酚人工抗原的合成及其抗体制备

以己烯雌酚(DES)、琥珀酸酐和牛血清白蛋白(BSA)等为主要原料,采用混合酸酐反应(氯甲酸异丁酯法)将半抗原己烯雌酚与载体蛋白BSA联接制备成人工免疫原。用此免疫原免疫家兔,并以间接ELISA法测定抗体效价。结果表明,人工合成的抗原具有很强的免疫原性,被免疫兔血清中的抗DES抗体效价高达28。本试验为下一步制备抗DES单克隆抗体及研制快速检测DES残留的免疫试剂盒奠定了基础。     

Pituitary tumor model induced by diethylstilbestrol in rats

AIM:To establish a stable pituitary tumor model by diethylstilbestrol(DES) induction in Wistar rats. METHODS:Wistar-Furth rats were randomly divided into DES treatment group, arachis oil treatment group and control group. The behavior changes and body weight of the rats were recorded. Ten rats in DES group and 5 in each of the other 2 groups were sacrificed after 4, 8 and 12 weeks, respectively. The weight and the histological and morphological changes of the pituitary gland, serum prolactin(PRL) level, and expression of CD31 were detected. RESULTS:Trichomadesis and behavior changes such as slowdown and anorexia were observed in a majority of rats in DES group 2 weeks after treatment. The increase in body weight of the rats in DES group was significantly slower than that in the other 2 groups. Tumor formation was detected in DES group, and abnormal cells were found after HE staining in despite of the sexes. CD31 expression in DES group was significantly higher than that in the other 2 groups. Serum PRL and the weight of pituitary gland were higher in DES group. CONCLUSION:Pituitary tumor model induced by DES in Wistar-Furth rats is a stable and convenient pituitary tumor model.     

己烯雌酚多克隆抗体的制备研究

合成了具有己烯雌酚基本分子结构特性并带有一个羧基活性基团的半抗原CP-DES,用混合酸酐法将其与BSA偶联后免疫6只BALB/c雌性小鼠,获得了特异性的己烯雌酚多克隆抗体。以所得抗体建立间接竞争性酶联免疫吸附分析法(cELISA)用于己烯雌酚的检测,最低检测限为0.04 ng.mL-1。交叉反应表明,己烯雌酚的特异性抗体与其结构类似物无明显交叉反应。     

己烯雌酚在UV-Vis/Fe(Ⅲ)/H2O2体系中的光降解

以250W高压汞灯为光源研究了水中己烯雌酚(DES)在UV-Vis/Fe(Ⅲ)/H2O2体系中的光降解和矿化情况,考查了初始pH值、H2O2初始浓度、DES初始浓度对DES光降解的影响。结果表明,UV-Vis/Fe(Ⅲ)/H2O2体系能有效光降解和矿化DES。在pH3.0～7.0范围内,pH初始值越小,DES降解率越大;在1000～4000"mol·L-1范围内,H2O2初始浓度越大,DES降解率越大;DES初始浓度越低,其降解率越高。当Fe(Ⅲ)浓度为10.0"mol·L-1,H2O2浓度为1000"mol·L-1,pH3.0条件下,光照80min时,10.0mg·L-1的DES的降解率可达100%,光照120min时,10.0mg·L-1的DES的矿化率可达95.0%。     

酶联免疫法检测中华鳖肌肉中己烯雌酚

根据酶标免疫法原理，用含有针对兔IgG（已烯雌酚抗体）的羊抗体与待测中华鳖肌肉中的已烯雌酚发生特异性的结合反应。洗涤后，加入的酶标底物连接未结合的已烯雌酚抗体，在酶基质的作用下与无色发色剂生成有色产物。反应后于450nm处理量吸光度，吸光强度与样品中的已烯雌酚浓度成反比。该检测方法平均最低检测下限为0.0125μg/kg，平均回收率74.8%，变异系数为1.763-3.084%。表明本方法快速、灵敏、可靠，适合对已烯雌酚残留限量检测的要求。     

GC-MS法测定生鲜乳中雌激素类药物残留量

本研究建立了测定生鲜乳中己烯雌酚（diethylstilbestrol）、雌二醇（estradiol）、炔雌醇（ethi-nylestradiol）、戊酸雌二醇（estradiol valerate）残留量的GC- MS法，为控制食源性动物食品的质量安全提供依据。本试验的样品经乙腈和乙酸乙酯提取，HLB固相萃取小柱净化，70℃衍生后在EI源SIM模式下进样分析。试验结果显示，己烯雌酚、雌二醇、炔雌醇含量在2.0~100.0μg/kg内、戊酸雌二醇含量在4.0~200.0μg/kg内线性关系良好，己烯雌酚、雌二醇、炔雌醇、戊酸雌二醇相关系数分别为0.9991、0.9987、0.9978、0.9983，平均回收率（n=6）为74.2%~85.8%（RSD为1.9%~9.2%）。该方法能够为测定生鲜乳中这4种雌激素类药物残留量提供可靠依据。     

己烯雌酚对成年仓鼠睾丸生精的影响

 探讨环境内分泌干扰物己烯雌酚(DES)对成年动物睾丸生精的影响。将DES皮下注射给成年仓鼠(剂量为1 mg·kg-1·d-1)，用光镜和电镜观察睾丸和生精细胞形态结构的变化，并用甲基绿-哌咯宁和脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记法（TUNEL）检测生精细胞的凋亡。结果表明，DES处理后睾丸萎缩，曲精小管变细。曲精小管内的细胞排列紊乱，大量的精母细胞和精子细胞凋亡，少见长形精子细胞。电镜下，这些退化的精母和精子细胞的胞浆内有大量髓样或空泡状结构。DES诱发生精细胞凋亡是造成成年动物睾丸生精障碍的重要原因。     

免疫法和色谱法在动物源食品己烯雌酚残留检测中的应用

己烯雌酚是一种人工合成的雌激素，因其能促进蛋白合成，加快增重和骨骼钙化，并减少饲料消耗，被作为动物促生长剂应用于畜禽生产和水产养殖等方面。但许多科学试验证实了己烯雌酚是一种致癌物质，对人和动物的健康危害较大，现已被许多国家禁止使用。各国对己烯雌酚在动物性食品中的残留高度重视。本文着重介绍了免疫法和色谱法在动物源食品己烯雌酚残留检测中的应用。     

高效液相色谱法测定水产品中己烯雌酚的残留量

[目的]建立用高效液相色谱法测定水产品中己烯雌酚的分析方法.[方法]样品经甲醇提取,以保留时间定性,外标法定量.[结果]己烯雌酚峰面积与其质量分数有着良好的线性关系（r =0.999）,最低检测限为0.05 mg/kg,加标回收率为89.0％ ～ 98.5％,RSD为1.1％ ～4.1％.[结论]该试验建立的方法能快速、准确地检测出水产品中的己烯雌酚残留量,适用于水产品质量检测工作.     

酶联免疫法检测中华鳖肌肉中己烯雌酚

根据酶标免疫法原理，用含有针对兔IgG（已烯雌酚抗体）的羊抗体与待测中华鳖肌肉中的已烯雌酚发生特异性的结合反应。洗涤后，加入的酶标底物连接未结合的已烯雌酚抗体，在酶基质的作用下与无色发色剂生成有色产物。反应后于450nm处理量吸光度，吸光强度与样品中的已烯雌酚浓度成反比。该检测方法平均最低检测下限为0.0125μg/kg，平均回收率74.8%，变异系数为1.763-3.084%。表明本方法快速、灵敏、可靠，适合对已烯雌酚残留限量检测的要求。