地鳖虫提取物对大鼠运动能力和骨骼肌抗氧化酶活性的影响

【目的】探讨补充地鳖虫提取物对大鼠运动能力、骨骼肌抗氧化酶表达水平及活性的影响,以明确其作为运动补剂的可能性。【方法】对大负荷游泳训练大鼠按各组平均体质量的0.5,1.0和1.5g/kg剂量分别补充地鳖虫提取物,在8周大负荷训练结束后测定大鼠力竭游泳时间、骨骼肌抗氧化酶活性及其原因表达水平。【结果】8周大负荷训练后,与单纯大负荷运动组相比,补充地鳖虫提取物组大鼠运动能力显著提高,其骨骼肌SOD、CAT、GST3种抗氧化酶活性均显著增加,同时3种抗氧化酶编码基因的表达水平也显著上调。【结论】补充地鳖虫提取物能够显著提高大鼠运动能力和骨骼肌抗氧化酶活性,其可能的机理是地鳖虫提取物上调了抗氧化酶编码基因的表达水平。     

双峰驼骨骼肌的组织与超微结构观察

在光镜及电镜下,双峰驼骨骼肌的肌外膜与肌束膜均较厚,其中除有不等的胶原纤维、弹性纤维、网状纤维、成纤维细胞及血管、神经外,还有丰富的脂肪细胞。在肌纤维外有薄层肌纤维膜,后者与肌内膜相连。骨骼肌肌纤维一般较粗,但其粗细差异很大（长约4～55mm,宽约9～125μm）,呈长短不一的圆柱状、A带、I带相间的横纹明显。肌原纤维也较粗大（直径约7～14nm,长约15～2．5μm）。肌原纤维间的肌浆中响大量线粒体及糖原颗粒。线粒体体积大,嵴较长,呈典型的板层状。     

骨骼肌肌浆网在收缩潜伏期内的超微结构形态变化

采用双向红外线探测器－计算机控制的电刺激与超低温快速冷冻固定同步技术对被电刺激后的骨骼肌作快速冷冻固定,采用透射电镜对电刺激后０．８ｍｓ,５．６ｍｓ,８．４ｍｓ及完全舒张时的蟾蜍腓肠肌超微结构变化进行了对比研究。骨骼肌组织在电刺激后０．８ｍｓ,５．６ｍｓ及８．４ｍｓ时发现肌浆网的前端,膜产生两个圆孔,而在骨骼肌处于全舒张时,肌浆网膜并无此形态结构。骨骼肌兴奋－收缩偶联发生时,发现肌浆网近Ｔ－管端的膜产生两个圆孔,而骨骼肌处于全舒张时,肌浆网膜也无此形态结构;骨骼肌收缩时出现的肌浆网膜小孔是否与肌浆网内某种物质（引起钙离子释放的某种未知物质？钙流？）在肌组织收缩时的转运或释放有关？     

RNA甲基化转移酶METTL3对牛骨骼肌卫星细胞增殖与成肌分化的影响

【目的】探究RNA甲基化转移酶样3(methyltransferase-like 3,METTL3)对牛骨骼肌卫星细胞(bovine skeletal muscle satellite cells, BSMSCs)增殖和成肌分化的影响。【方法】利用体外诱导BSMSCs分化模型模拟牛骨骼肌生长发育过程,采用实时荧光定量PCR技术和蛋白质免疫印迹技术(Western blotting)检测METTL3在BSMSCs分化前后mRNA和蛋白表达水平的差异。设计合成METTL3干扰RNA(si-METTL3),且构建METTL3的过表达载体pcDNA3.1-METTL3,分别转染至BSMSCs中,通过实时荧光定量PCR和Western blotting检测转染效果和BSMSCs增殖标志因子盒转录家族成员7(paired box 7,Pax7)的表达情况,EdU检测细胞增殖情况。将转染si-METTL3和pcDNA3.1-METTL3的BSMSCs进行体外诱导分化,通过光学显微镜观察BSMSCs进入分化期的细胞形态,利用实时荧光定量PCR和Western blotting检测BSMSCs分化标志因...     

PSMB5蛋白对牛骨骼肌卫星细胞增殖与成肌分化的影响

【目的】探究蛋白酶体β5亚基（proteasome subunit beta type-5, PSMB5）对牛骨骼肌卫星细胞增殖与成肌分化的影响,为进一步研究蛋白酶体亚基PSMB5在细胞分化和肌肉发育过程中的调控作用提供依据。【方法】利用牛骨骼肌卫星细胞体外诱导成肌分化模型,模拟牛骨骼肌生长发育过程,首先检测牛骨骼肌卫星细胞分化前后PSMB5的表达变化,采用qRT-PCR法检测PSMB5在牛骨骼肌卫星细胞分化前后基因表达水平的差异,采用Western blotting 法检测PSMB5在牛骨骼肌卫星细胞分化前后蛋白表达水平的差异。然后设计合成PSMB5的小干扰RNA si-RNA-PSMB5（si-PSMB5）,构建PSMB5过表达质粒载体pcDNA3.1-PSMB5（pcDNA-PSMB5）,采用（Lipofectamine）3000转染试剂将si-PSMB5和pcDNA-PSMB5转染牛骨骼肌卫星细胞,qRT-PCR法及Western blotting法检测转染效果。最后采用EdU染色的方法检测干扰和过表达PSMB5对牛骨骼肌卫星增殖的影响;进一步对牛骨骼肌卫星细胞进行体外成肌诱导分化,光学显微镜观察牛骨骼肌卫星细胞肌管形成状态,Western blotting检测分化标志因子肌球蛋白重链（MyHC）蛋白水平的表达变化,分析干扰和过表达PSMB5对牛骨骼肌卫星细胞成肌分化的影响,综合分析PSMB5蛋白对牛骨骼肌卫星细胞增殖与成肌分化的影响。【结果】PSMB5在牛骨骼肌卫星细胞分化前后表达水平存在显著差异,牛骨骼肌卫星细胞诱导分化后PSMB5的mRNA和蛋白表达量均显著高于增殖期（P<0.05）。干扰或过表达PSMB5后,牛骨骼肌卫星细胞EdU阳性细胞率与对照组相比,差异均不显著（P>0.05）。干扰PSMB5的表达后,细胞分化形成的肌管数量明显少于对照组,分化标志因子MyHC的蛋白表达水平显著低于对照组（P<0.05）;而过表达PSMB5后,细胞分化形成的肌管数量明显多于对照组,分化标志因子MyHC的蛋白表达水平显著高于对照组（P<0.05）。【结论】PSMB5蛋白对牛骨骼肌卫星细胞的增殖没有明显影响,但对牛骨骼肌卫星细胞的成肌分化过程具有显著的调控作用。干扰PSMB5表达可以抑制牛骨骼肌卫星细胞的成肌分化进程,而过表达PSMB5可以促进牛骨骼肌卫星细胞体外成肌分化进程。探明PSMB5蛋白对牛骨骼肌卫星细胞增殖和成肌分化的具体调控作用,为进一步开展PSMB5在牛成肌分化中的调控机制研究奠定了基础。     

杏鲍菇氨基酸对有氧运动中心肌及骨骼肌抗氧化能力的影响

为研究杏鲍菇氨基酸对有氧运动中心肌和骨骼肌的抗氧化能力,利用小鼠进行跑步有氧运动训练,同时灌胃杏鲍菇氨基酸,分组进行小鼠血液生化指标检测和体外抗氧化性试验。血液指标检测结果显示,杏鲍菇氨基酸能够有效降低血液LD、CK含量,但BUN含量出现升高。小鼠抗氧化试验结果显示,杏鲍菇氨基酸溶液对超氧阴离子自由基有较强的清除作用,浓度与清除率呈量价正比关系。杏鲍菇氨基酸对有氧运动中心肌和骨骼肌的抗氧化能力有一定的提升作用,能有效提升有氧运动肌肉群的耐力和运动时间。     

二甲双胍对牛骨骼肌卫星细胞增殖与分化的影响

为探究二甲双胍对牛骨骼肌卫星细胞增殖和分化的影响，本研究将体外培养的牛骨骼肌卫星细胞分别用0（对照组）、1、2、4 mmol/L二甲双胍进行处理，采用CCK-8法筛选出二甲双胍作用于牛骨骼肌卫星细胞的最适浓度，接着通过EdU染色法检测二甲双胍处理牛骨骼肌卫星细胞后对其增殖的影响，然后对二甲双胍处理的牛骨骼肌卫星细胞进行体外成肌诱导分化，通过显微镜观察牛骨骼肌卫星细胞分化时期的细胞状态，然后利用Western blotting技术检测牛骨骼肌卫星细胞的分化标志因子肌球蛋白重链（MyHC）、肌细胞生成素（MyoG）在分化24、48和72 h的表达情况。结果表明，二甲双胍作用于牛骨骼肌卫星细胞的最适浓度为2 mmol/L。2 mmol/L二甲双胍处理牛骨骼肌卫星细胞后，其细胞增殖率显著降低（P<0.05），说明二甲双胍可以抑制牛骨骼肌卫星细胞的增殖；牛骨骼肌卫星细胞诱导分化后形成的肌管数量和直径均呈现减少趋势，牛骨骼肌卫星细胞成肌分化标志因子MyHC、MyoG在分化24、48和72 h的表达均显著低于0 mmol/L （对照）组（P<0.05），说明2 mmol/L二甲双胍能够抑制牛骨骼肌卫星细胞的成肌分化过程。研究结果表明，二甲双胍可以显著抑制牛骨骼肌卫星细胞的增殖及成肌分化过程。该研究为二甲双胍在肌肉发育调控及肌损伤修复方面的应用提供一定的理论依据。     

实验性奶山羊缺硒病骨骼肌的超微结构研究

实验性缺硒病奶山羊骨骼肌经电子显微镜观察,见有明显的超微病变。肌质膜破裂,肌原纤维溶解断裂;纵管系统(SR)、横管系统(TS)变位,三联体破坏;线粒体肿胀、变形,内部膜溶解,嵴断裂,基质电子密度不均匀,有大块空白区。其中有中等电子密度团块,被单膜包围;肌核膜双层结构不清,局部溶解,染色质外溢。细胞器生物膜损伤。以线粒体损害最为重笃。