中华绒螯蟹线粒体DNA l2S rRNA基因片段的序列研究

首次进行了中华绒螯蟹（ Ｅｒｉｏｃｈｅｉｒ ｓｉｎｅｎｓｉｓ）线粒体 ＤＮＡ １２ＳｒＲＮＡ的序列分析。参考果蝇、蚤状溞序列对中华绒螯蟹线粒体ＤＮＡ １２ＳｒＲＮＡ基因片段做了引物设计、ＰＣＲ扩增及序列测定，结果得到 ４５７ ｂｐ的碱基序列，其Ａ、Ｔ、Ｇ、Ｃ含量分别为 １５９ｂｐ（３４．７９％）、１７７ｂｐ（３８．７３％）、５１ｂｐ（１１．１６％）、７０ｂｐ（ １５． ３２％），与果蝇、蚤状溞的相同基因片段的序列含量基本相似。     

解淀粉芽胞杆菌HRH317对串珠镰孢菌菌丝形态和超微结构的影响

为明确新型生防菌解淀粉芽胞杆菌Bacillus amyloliquefaciens HRH317菌株对病原菌串珠镰孢菌Fusarium moniliforme的抑制作用,采用牛津杯法对HRH317菌株抑菌活性进行测定,并采用扫描电子显微镜、透射电子显微镜和荧光显微镜对经HRH317菌株发酵上清液处理后的串珠镰孢菌菌丝形态及超微结构进行观察。结果显示,HRH317菌株发酵上清液对串珠镰孢菌有很好的抑菌活性,抑菌圈平均直径可达33.31 mm。扫描电镜结果显示,HRH317菌株发酵上清液处理24 h时,串珠镰孢菌菌丝体出现断裂现象;处理72 h时,串珠镰孢菌菌丝体断裂较严重,多处裂解;处理96 h时,串珠镰孢菌菌丝体彻底瓦解,且无完整菌丝体。透射电镜结果显示,HRH317菌株发酵上清液处理72 h时,串珠镰孢菌菌丝体细胞形态扭曲变形,细胞内结构紊乱,遭破坏。荧光显微镜结果显示,经PI染料染色处理12 h时,串珠镰孢菌细胞有少数细胞被染成红色,细胞膜通透性受一定程度破坏;处理16 h时,串珠镰孢菌细胞大面积被染红;处理20 h时,串珠镰孢菌细胞被染色面积增大;处理24 h时,串珠镰孢菌细胞膜受破坏程度增加,细胞内大面积被染色。表明解淀粉芽胞杆菌HRH317菌株对串珠镰孢菌菌丝形态和超微结构有破坏作用,能抑制病原菌串珠镰孢菌菌丝体生长。     

从扁藻超微结构变化研究CuZnSeCd离子毒性效应

使用透射电镜研究了在半抑制效应的Ｃｕ、Ｚｎ、Ｓｅ、Ｃｄ无机离子的毒性作用下，扁藻细胞超微结构的变化。证明不同离子及不同离子浓度对扁藻的毒性效应不同。从细胞器的变化来看，扁藻的叶绿体和细胞核对上述４种离子都较为敏感。其中Ｃｄ离子对叶绿体和细胞核的毒性效应表现最为明显：而Ｃｕ离子对上述两种细胞器的毒性作用相对较弱；Ｓｅ离子对叶绿体，Ｚｎ离子对细胞核的破坏作用相对较小，Ｓｅ离子对细胞核，Ｚｎ离子对叶绿体     

不同断奶日龄羔羊瘤胃组织显微及超微结构比较

试验通过比较不同断奶日龄的湖羊羔羊瘤胃组织结构的差异，特别是瘤胃乳头超微结构变化，旨在为羔羊适宜断奶日龄的确定提供瘤胃生长发育的依据。选择新生湖羊羔羊24只（初生重：2.80 kg±0.08 kg），随机分为3组，每组8只，分别为30日龄早期断奶组（EEW-30）、45日龄早期断奶组（EW-45）和60日龄常规断奶组（NW-60）。在各断奶日龄及75日龄时每组分别屠宰4只羔羊，测定体重及瘤胃空重，计算瘤胃相对重量；采集瘤胃组织进行显微及超微形态学测定。结果显示：①EEW-30组羔羊断奶体重极显著低于NW-60组（P<0.01），而EW-45组与NW-60组断奶体重无显著差异（P>0.05）；75日龄时3组羔羊的体重无显著差异（P>0.05）。各组羔羊瘤胃相对重量与其体重变化规律相同。②光镜下可见：断奶时，EEW-30组瘤胃壁厚度极显著低于NW-60组（P<0.01），EW-45组与NW-60组无显著差异（P>0.05）；75日龄时，EW-45组羔羊瘤胃壁厚度显著高于NW-60组（P<0.05）。断奶时EEW-30组瘤胃乳头较短小，极显著短于NW-60组（P<0.01），EW-45组也显著短于NW-60组（P<0.05）。断奶时瘤胃乳头宽度和面积在3组间差异均不显著，在75日龄时也无显著组间差异（P>0.05）。③扫描电镜观测结果显示：EEW-30组断奶时单位面积瘤胃微乳头（ruminal micro-papillae）数量极显著低于NW-60组（P<0.01），而EW-45与NW-60组间无显著差异（P>0.05）；75日龄时，3组羔羊单位面积瘤胃微乳头数量无显著差异（P>0.05）。上述试验结果显示，断奶时羔羊瘤胃形态结构在EEW-30与NW-60组间差异明显，而EW-45与NW-60组较为接近，瘤胃微乳头状结构也呈相同变化趋势。提示45日龄时断奶较为适宜。     

空气放电对尖孢镰刀菌的活力及其超微结构的影响

采用空气放电技术对尖孢镰刀菌进行体外抑菌试验。试验结果表明,空气放电对菌丝生长和孢子萌发有显著的抑制作用(P0.05),且抑制效果与处理时间呈正相关;通过扫描电镜和透射电镜观察,发现空气放电处理后的菌丝体干瘪褶皱且表面粗糙,外层结构不完整;菌丝细胞和孢子细胞形态不规则,细胞壁内陷或者突起,厚薄不均匀,其中孢子细胞内出现大量液泡且液泡体积较大,细胞质失去紧致结构;利用AO/EB荧光染料标记孢子细胞,结果显示空气放电处理显著促进孢子凋亡(P0.05)。     

采前套袋对黄肉桃货架期果皮超微结构的影响

【目的】探讨黄肉桃采后果皮衰老期间细胞器的变化规律和细胞水平的衰老特征及其与果实耐贮性的相关性,为鲜食黄桃品种的改良和贮运技术的研究提供一定的科学依据和实践指导。【方法】以耐贮性较强的‘沪454’和耐贮性略差‘锦绣’黄桃为试材,利用透射电镜观察货架期间2个黄桃品种果皮细胞壁、有色体、嗜饿颗粒和线粒体的超微结构及其变化规律。【结果】随着贮藏时间的延长和果实的衰老,黄桃果实果皮细胞壁变形,部分降解,结构松散,细胞间隙增大;果皮有色体中嗜饿颗粒数目增多,后期嗜饿颗粒数目减少但体积增大,有色体中片层类囊体膜结构瓦解、变形;嗜饿颗粒数目的增多和个体的增大与果实的耐贮性有密切相关;果皮线粒体结构变得模糊,线粒体变形、拉长,内基数目减少,结构解体出现空洞;果皮中线粒体的衰老进程迟于有色体;‘沪454’黄桃果皮有色体和线粒体较‘锦绣’黄桃稳定。【结论】2个品种黄桃果皮中细胞超微结构及其稳定性与果实耐贮性密切相关。果皮组织细胞的超微结构变化可导致组织细胞功能衰弱和丧失,加速果实的衰老。     

百宜黑鸡mtDNA D-loop区遗传变异分析

为了研究百宜黑鸡线粒体DNA(mtDNA)D-loop区遗传变异情况,试验采用PCR和直接测序法测定了百宜黑鸡、兴义矮脚鸡、长顺绿壳蛋鸡共33个个体线粒体DNA控制区部分序列,长度约为570 bp,分析了百宜黑鸡与兴义矮脚鸡、长顺绿壳蛋鸡之间的遗传变异。结果表明:腺嘌呤(A)、鸟嘌呤(G)、胞嘧啶(C)、胸腺嘧啶(T)4种核苷酸的平均比例分别为26.44%、13.54%、30.75%、29.27%;其中C含量最高,表现出碱基组成的偏倚性。在系统发生树中,百宜黑鸡、兴义矮脚鸡和长顺绿壳蛋鸡各自聚成1支,说明百宜黑鸡与兴义矮脚鸡、长顺绿壳蛋鸡是不同品种。     

中日野桑蚕杂交后代线粒体的遗传初探

为了研究线粒体在中国野桑蚕和日本野桑蚕的杂交后代中的遗传规律,将经D IG-RFLP检测线粒体多态性不同的中国野桑蚕和日本野桑蚕进行杂交,用Southern杂交检测母本、父本、F1、BF1的线粒体多态性。结果表明,F1和BF1的线粒体多态性与母本相同,没有出现父本线粒体的信号。揭示了实验采用的中国野桑蚕和日本野桑蚕的线粒体遗传遵循母性遗传的规律。     

家蚕地方品种线粒体基因组A+T丰富区的序列及分子进化分析

为了研究家蚕线粒体基因组A+T丰富区的结构和家蚕品种的进化,用PCR方法扩增了12个家蚕(Bombyxmori)地方品种线粒体基因组A+T丰富区及其侧翼序列,分离纯化后克隆到pMD18-T载体进行测序。序列分析表明,克隆片段长度约1.1 kb,基因排列顺序与C108线粒体相同,依次为12S rRNA基因3′端、A+T丰富区、tRNAMet、tRNAIle、tRNAGln和ND2基因5′端,在tRNAGln和ND2基因之间有47 bp的非编码区。以日本野桑蚕(Bombyxmandarina)为外群,用Phylip软件包构建了基于12个家蚕品种线粒体基因组A+T丰富区序列的NJ进化树。结果显示,甘肃种单独聚为一群,其进化早于其它11个品种聚成的类群,说明甘肃种是供试家蚕品种中进化最早的品种。这一结果在分子水平上为黄河流域是家蚕品种的发祥地之一提供了证据,也进一步支持了家蚕品种的中国起源说。对A+T丰富区及其侧翼基因的结构分析表明,家蚕线粒体12S rRNA和ND2基因都十分保守,14个品种统计只分别发生1个和2个碱基转换;A+T丰富区中(A+T)比例高达94.9%以上,第27 nt开始有1个T-串结构,长度为16~19 bp不等;同时还根据3个tRNA基因的核苷酸序列推定了其二级结构。