湘云鲫无公害养殖技术

湘云鲫是淡水养殖鲫鱼的优良品种，现将其无公害养殖技术介绍如下： 池塘准备 环境条件：必须符合GB／18407．4农产品安全质量无公害产地环境要求，周围2千米以内无城市、工矿企业等污染源，水质始终符合无公害水产品的生产标准。     

稀有放线菌小单孢菌噬菌体ΦHAU8溶源菌的分离与验证

用小单孢菌40027菌株作为指示菌,分离得到噬菌体ΦHAU8的抗性菌株,通过高压脉冲电泳(PFGE)和Southern杂交试验表明:ΦHAU8 DNA已整合到小单孢菌40027菌株染色体的500 kb的AseⅠ片段中;该抗性菌株为噬菌体ΦHAU8的溶源菌,命名为LXH8.     

蚓激酶基因乳腺表达载体构建及在牛乳腺中的瞬时表达

在稀有密码子的改造基础上,人工合成了849 bp的蚓激酶F-Ⅲ-1全长cDNA序列,并以其为目的基因,构建了以山羊β-酪蛋白启动子为上游调控序列的乳腺组织特异性表达载体pBLK和pLN-bCP-LK。2种质粒分别以200,500,1 000,2 000μg的剂量梯度注入泌乳期黑白花奶牛乳腺,以纤维蛋白平板溶圈法(FAPA)检测该基因表达后奶样的纤溶活性。结果表明:注射后3~78 h,奶样有明显纤溶活性,其中6~16 h活性最高。500μg pBLK质粒与其他3个剂量溶圈直径之间差异显著(P<0.05),而其他3个剂量之间差异不显著;pLN-bCP-LK质粒的各剂量溶圈直径之间差异均不显著,且2种质粒的同剂量溶圈直径之间差异也不显著。以上结果表明,改造后的蚓激酶基因可以在泌乳期黑白花奶牛乳腺中实现瞬时表达,以500μg的注射剂量表达效果最佳。     

镉对鲫非特异性免疫力的影响

采用毒性实验方法研究了镉对鲫非特异性免疫力的影响,确定镉诱导免疫毒性效应及其毒性参数。在试验剂量和时间范围内的结果显示,镉对鲫白细胞数量(WBC)、中性粒细胞的吞噬率(PR)和补体50%溶血活性(CH50)均有剂量-效应关系、时间-效应关系和Hormesis现象,1.25mg·kg-1注射染Cd2+胁迫时对WBC、PR和CH50有激活作用,2.5和3.75mg·kg-1注射染Cd2+胁迫时对WBC、PR和CH50有抑制作用;WBC顶点所对应的时间为染Cd2+后4d,PR顶点所对应的时间为染Cd2+后2d,CH50顶点所对应的时间为染Cd2+后1d。所以Cd2+对鲫具有明显的免疫毒性。     

稀有果树良种快繁技术

对新育成的或是新引进的稀有良种,在极度缺乏接穗的情况下,如何加快繁殖种条,迅速投入果苗生产,是果树生产者迫切需要解决的问题.下面介绍两种新方法:     

远缘杂交鲫及其亲本的肌肉营养成分比较

远缘杂交鲫的肌肉营养成分如下:蛋白质含量17.98%,脂肪2.44%,水分77.50%,灰分1.06%,无氮浸出物为0.94%。其氨基酸组成有18种,总含量为17.46g/100g。将远缘杂交鲫肌肉的主要营养成分与其双亲进行了比较和评价。     

拟无枝酸菌宿主构建及次级代谢基因簇异源表达

为将生长快、发酵时间短、遗传操作便捷的稀有放线菌拟无枝酸菌TNS106开发成异源表达宿主,通过同源重组将内源的瑞斯托霉素生物合成关键基因rpsA替换为ΦC31和ΦBT1噬菌体细菌附着位点attB,清除代谢背景并引入整合位点,得到菌株HXR1;将含有来自天蓝色链霉菌的放线紫红素基因簇或来自刺糖多孢菌的多杀菌素基因簇的质粒转到HXR1进行异源表达,检测发酵产物。结果显示,HXR1成功表达放线紫红素和多杀菌素;与红色糖多孢菌宿主LJ161相比,放线紫红素的产生提前1 d,产量提高1.3倍。拟无枝酸菌异源表达宿主HXR1可为从链霉菌和稀有放线菌中发现新的次级代谢产物提供有用的平台。     

基于线粒体COI基因和D-loop区联合序列的杂交鲫与野生鲫群体遗传特征研究

【目的】分析杂交起源的合方鲫品系和新型同源二倍体类鲫(NCRC)品系、实验红鲫品系及野生鲫群体的遗传特征,揭示杂交鲫群体与野生鲫群体的种质资源现状,为开展鲫育种工作提供科学依据。【方法】以2个杂交品系(合方鲫和NCRC)、1个实验室养殖品系(实验红鲫)和3个野生鲫群体(分别采自湖南省长沙市望城区、长沙市长沙县和常德市)为研究对象,采用PCR扩增6个鲫群体的线粒体COI基因和D-loop区序列,使用DnaSP 6.12分析群体遗传多样性,利用MEGA 7.0.26计算群体内和群体间的遗传距离,运用TCS Network算法绘制单倍型网络,再以Structure 2.3.4推测群体遗传结构;利用Arlequin 3.5.2.2计算群体间的遗传分化系数(F_ST),并以邻接法(NJ)、最大似然法(ML)和贝叶斯推断法(BI)分别构建系统发育进化树;通过Tajima’s D和Fu’s Fs中性检验结合核苷酸错配分布分析评估群体历史动态。【结果】基于线粒体COI基因和D-loop区联合序列,从6个鲫群体中共鉴定出25个单倍型(Hap1~Hap25);且3个野生鲫群体的单倍型多样性(h,0.582~0.877)和核苷酸多样性(π,0.00227~0.00532)明显高于2个杂交品系和实验红鲫品系。构建的单倍型网络结构图和系统发育进化树均显示,合方鲫品系可形成独立分支,且与日本白鲫聚在一起。同时,合方鲫品系与其他群体间的遗传距离(0.0539~0.0628)和遗传分化系数(F_ST,0.95147~0.98331)均较大,其次为NCRC品系和实验红鲫品系,说明养殖群体与野生鲫群体间已产生明显的遗传分化。在Structure聚类分析的基础上进行AMOVA分析,结果表明可将6个鲫群体划分为合方鲫品系、NCRC品系、实验红鲫品系和野生鲫群体共4组,且组间遗传变异占绝大部分(90.14%)。从群体历史动态检验结果来看,6个鲫群体在近期历史上保持相对稳定,未曾经历过明显的群体扩张。【结论】合方鲫品系、NCRC品系及实验红鲫品系3个养殖群体与3个野生鲫群体间已产生明显的遗传分化,且存在一定程度的遗传多样性降低等问题。因此,在后续的鲫育种工作中应适当扩大繁育亲本数量,避免近亲繁殖和瓶颈效应,注重保护养殖群体种质资源的遗传多样性。     

非洲和亚洲萝藦科新植物

本文记述了非洲和亚洲产的萝科１个新种加蓬鲫鱼藤（Ｓｅｃａｍｏｎｅｇａｂｏｎｅｎｓｉｓ），２个新名称大花牛奶菜（Ｍａｒｓｄｅｎｉａｍａｇｒｉｆｌｏｒａ）和小花娃儿藤（Ｔｙｌｏｐｈｏｒａｇｕｉｌｌａｕｍｉｎｉｉ），２个新组合心叶镰药藤（Ｂｅｌｏｓｔｅｍ－ｍａｃｏｒｄｉｆｏｌｉｕｍ）和越南小花藤（Ｍｉｃｒｅｃｈｉｔｅｓｍｉｎｕｔｉｆｌｏｒａ）。     

尼罗非鲫和奥利亚非鲫线粒体DNA遗传差异的研究

以酶切MitochondrialDNA（mtDNA）技术检测了尼罗非鲫和奥利亚非鲫的mtDNA。测得两种鱼线粒体基因组的大小都约为16．83kb。在使用的6种酶中，只有PvuⅡ在所检测的15尾尼罗非鲫mtDNA上产生了多态片段，3尾鱼的mtDNA产生了4个片段，12尾鱼的mtDNA产生3个片段。而6种酶在所有15尾奥利亚非鲫中均未检到多态片段。比较两种鱼的mtDNA酶切片段，仅PvuⅡ的酶切结果有所不同，尼罗非鲫mtDNA上有3个或4个PvuⅡ位点，但奥利亚非鲫mtDNA上有5个位点，因此，PvuⅡ的酶切位点可作为鉴别它们的分子遗传标记。