过表达NR4A1促进山羊皮下脂肪细胞分化

旨在克隆山羊NR4A1基因的CDS区序列,明确其组织和细胞表达模式,以及探究过表达NR4A1基因对山羊皮下脂肪细胞分化的影响。本试验利用双酶切法构建山羊过表达载体pcDNA3.1-NR4A1。以1周岁简州大耳羊（n=5）为试验动物。利用RT-PCR方法和实时荧光定量PCR（real-time quantitative PCR, qPCR）技术克隆NR4A1基因编码区序列并明确其时空表达特性,再将山羊pcDNA3.1-NR4A1载体转染皮下脂肪细胞使NR4A1过表达,利用形态学方法检测过表达后脂滴聚集的变化,同时采用qPCR方法检测脂肪分化标志基因相对表达水平的变化。结果获得山羊NR4A1基因的编码区序列是1 797 bp,编码598个氨基酸;NR4A1在山羊各组织中广泛表达,且在山羊背最长肌中的相对表达水平最高（P<0.01）,在山羊皮下脂肪细胞分化60 h表达量最高（P<0.01）;过表达NR4A1基因显著促进山羊皮下脂肪细胞的脂滴积累,并且显著提高C/EBPα、C/EBPβ、PPARγ、LPL、SREBP1和AP2的相对表达水平（P<0.05）。NR4A1基因可能是山羊皮下脂肪细胞分化的正调控因子,且可能是协同脂肪分化标志基因的表达量来实现的。     

简州大耳羊肌内脂肪细胞成脂分化差异表达基因的筛选与鉴定

旨在通过转录组测序技术获得简州大耳羊肌内前体脂肪细胞成脂分化前后的差异表达基因,并经生物信息学分析获得相关信号通路及可能发挥作用的关键功能候选基因。本研究以7日龄的健康简州大耳羊公羊为试验动物（n=3）,采用胶原酶消化法分离获得其肌内前体脂肪细胞;利用Illumina平台对肌内前体脂肪细胞和诱导分化5 d的肌内脂肪细胞cDNA样品（n=3）进行高通量测序;以|log₂fold change|>0和P<0.05为阈值筛选获得差异表达基因,并利用clusterProfiler R包对其进行GO功能和KEGG通路富集;最后利用实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR,qRT-PCR）技术检测功能候选基因在细胞分化前后的表达量变化。结果显示,共获得差异表达基因7 916个,其中4 143个为表达上调基因,主要富集到氧化磷酸化、核糖体合成和三羧酸循环通路等305条通路;3 773个为表达下调基因,且主要富集到甲状腺激素信号通路等303条通路;差异基因GO功能注释中52.8%为生物过程、13.4%是细胞组成和33.8%是分子功能。qRT-PCR结果表明,UCP3、ACACB、ACOT11、ACOX3、APOA1和WISP2在分化前后的山羊肌内脂肪细胞中的表达趋势与RNA-seq结果一致,提示这些基因适合作为下一步研究的功能候选基因。本研究筛选得到简州大耳羊肌内脂肪细胞成脂分化的差异基因,并确认了6个基因可作为功能候选基因。研究结果为阐明肉用山羊肌内脂肪细胞成脂分化的分子调控网络提供基础数据和系统资料。     

地黄品种遗传多样性RAPD分析

用CTAB法提取10个地黄品种幼叶的基因组DNA，用紫外分析法和琼脂糖凝胶电泳方法检测基因组DNA的纯度、大小和浓度。结果表明，从80条RAPD引物中分别筛选出适合于地黄RAPD标记分析的引物17条。17条RAPD引物对10个地黄品种（系）扩增出177条带，多态条带比率（PPB）为61．58％，平均多样性指数（I）为0．3135，遗传相似系数（GS）在0．63～0．93，平均GS为0．7545。RAPD标记的聚类分析结果，将10个地黄品种分为2类：第1类含有6个品种，包括组培85—5、大田85—5、组培9302、金白地黄、金状元和大田9302；第2类含有4个品种，包括北京1号、大红袍、地黄9104和野生地黄。     

山羊FAM134B基因克隆、序列分析及其mRNA表达与肌内脂肪含量的相关性

FAM134B基因对肌内脂肪沉积有重要的调控作用,为了进一步了解FAM134B基因的结构与功能及其对山羊(Capra hirus)肉质的影响,本研究以川中黑山羊为实验动物,采用RT-PCR技术克隆了山羊FAM134B基因,并对核苷酸序列和氨基酸序列进行生物信息学分析,运用实时荧光定量PCR技术检测了FAM134B mRNA的表达情况,对肌肉组织中FAM134B mRNA表达与肌内脂肪(intramuscular fat,IMF)含量进行了关联分析。结果表明,山羊FAM134B基因(GenBank登录号:KF684947.1)cDNA全长1 071 bp,编码356个氨基酸,预测蛋白序列含有4个N-连接的糖基化修饰位点,20多个磷酸化位点;系统进化树分析显示,山羊FAM134B核苷酸序列与牛(Bos taurus)的相似性最高;荧光定量PCR分析表明,FAM134B在山羊的心、肝、脾、肺、肾、背最长肌和腿肌中均有表达,其中在肝脏的表达量最高,脾的表达量最低;相关分析显示:山羊背最长肌、腿肌中FAM134B mRNA表达与肌内脂肪含量呈显著正相关。研究结果显示,FAM134B基因可能对山羊肌内脂肪沉积起着重要的调控作用。本研究为进一步了解FAM134B基因的功能及其在反刍动物IMF代谢中的作用和营养调控机制提供一定基础资料。     

奶牛附红细胞体病感染途径(消化系统接种)的研究

12条健康幼犬．经血液学检查确认无附红细胞体感染后．随机分为对照组和消化道接种组，将奶牛附红细胞体阴性菌血和阳性菌血分别经呼吸道接种对照组和消化道接种组各犬，逐日采血，测定其红细胞感染率，并在红细胞感染率最高的时候，测定其生理指标、血液常规指标及血液生化指标。试验结果表明，消化系统接种组接种前后各犬体温、脉搏、呼吸、血红蛋白和一分钟胆红素无明显差异（P〉0．05）；红细胞感染率、红细胞总数、白细胞总数和总胆红素差异显著（P〈0．05），红细胞感染率最高可达30％。对照组没有明显变化。结果证明，消化道可以感染该病，为该病的预防和控制提供了重要的理论依据。     

提高大棚桃坐果率的有效措施

近年来,大棚桃已成为一项新的种植产业,在棚菜区蓬勃发展起来。经过几年的栽培管理认为,要想达到大棚桃丰产丰收的目的,应从以下几个方面入手来提高其坐果率。1选用坐果率高的品种如蜜桃中可选用早美、早露蟠桃、早凤王等;油桃可选用早红霞、曙光、瑞光5号、早红珠等。2花期喷硼砂、植物生长调节剂盛花期喷洒0.2%~0.3%的硼砂 0.3%的尿素 0.1%的蔗糖溶液。花后5~7d喷40~80mg/L赤霉素或800~1000倍的醋酸水溶液均可提高坐果率。3疏花疏果一般不疏花只疏果。若要疏花,只疏除坐果率低的晚花、弱花;疏果时要疏去并生果、畸形果,一般保留发育好的…     

四川牦牛业可持续发展的有利条件、制约因素及对策

1我国牦牛业的发展情况 牦牛是在高寒、缺氧。枯草期和冰封期长达半年左右的严峻自然条件下。经过长期自然选择和自身适应而形成的一种特殊牛种。它具有十分顽强的抗逆能力．在青藏高原地区，牦牛在当地牧民经济生活中的地位难以用其它家畜替代。     

山羊剖腹产手术一例

在现代畜牧生产中，特别是随着胚胎移植技术在羊养殖业中的应用．难产时有发生。轻微的难产病例．可进行人工助产，无需手术就能解决，对母畜和胎儿的危害较轻。对重症的难产病例，如果强行进行人工助产．会损伤母畜的生殖器官，降低母畜的生产性能．甚至使母畜丧失繁殖能力，严重者会造成母畜和胎儿的死亡。难产在某种程度上制约着畜牧业的发展．而剖腹产术是解决这一问题的有效方法之一。剖腹产手术主要用于胎儿过大、胎位异常且矫正比较困难及子宫颈口开张不良和产道狭窄等引起的难产病例。     

夏季饲料贮存应采取的技术措施

饲料在高温高湿的夏秋时节，若保管不善极易腐烂变质，其原因在于：饲料未晒干；高温多雨，空气湿度大或贮存室漏雨潮湿，适宜霉菌生长繁殖；保存时间过长等。畜禽吃了发霉的饲料就会发生急性或慢性中毒，重者导致畜禽患病中毒死亡，轻者影响畜禽生长发育，给养殖户造成重大经济损失．所以夏季饲料贮存应采取得当的技术措施。