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绿化造林离不开苗木培育,苗木的培育和移植决定了苗木的质量和成活率,提高苗木培育和移植造林技术是促进林业发展的核心。通过分析苗木培育和移植造林技术的现状和方法,总结提高营林造林技术的措施,以供参考。 相似文献
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卵母细胞的化学去核是采用干扰染色体分离或纺锤体正常功能的化学试剂,使其所有染色质通过纺锤丝牢固结合,并借助极体排出的惯性将所有染色质全部带出胞外,达到去核目的。目前以化学去核处理的MⅡ期卵母细胞为受体,已获得克隆小鼠。然而,第一次减数分裂期的小鼠卵母细胞经化学去核后,进行核移植还未见报道。与传统的机械去核相比,该方法对卵母细胞无机械损伤,完全是极体的自然排放;同时细胞质及其中核重编程相关因子损失量小;而且高效、省时,程序简单,所得的卵胞质或许更适合于供体细胞核的重编程。剪取超排小鼠的卵巢,以注射器刺破有腔卵泡后获得卵母细胞和卵丘细胞复合体,进行体外成熟培养。成熟培养5 h后去除卵丘细胞,挑选生发泡破裂的细胞顺序移入含脱羰秋水仙碱(DC,0.4μg/mL,2 h)和DC(0.4μg/L) 放线菌酮(CHX,50μg/mL)的M16培养液中继续培养,直到第一极体排出。去核卵胞质与胎儿成纤维细胞用植物凝集素(PHA,200μg/mL)粘合后,转入电击槽;施加1个5 V/mm、3μs交流电脉冲和2个92 V/mm、70μs直流电脉冲进行电融合。3 h后,以SrCl2激活6h,于四孔培养皿中制作的“孔中孔”(well of well)体外培养重构胚。试验重复3次,共计698个卵母细胞,获得的重构胚融合率和激活率分别为84.8%和93.6%;胚胎2-细胞发育率为24.7%,4-细胞率为6.74%;2-细胞期克隆胚移植假孕受体后,没有获得怀孕受体。试验分别以“血清饥饿”胎儿成纤维细胞、新鲜细胞和冷冻保存细胞为供体作核移植,结果表明,冷冻保存细胞的融合率(69.3%)与其余两组(80.6%和84.8%)呈显著差异(P<0.05);激活率、2-细胞和4-细胞发育率,则三组间差异不显著(P>0.05)。本研究将化学去核与无透明带技术相结合,完全丢弃了传统核移植的显微操作及其繁琐程序,属手工克隆,它的成功将会大大简化核移植程序,同时提高了核移植的生产力,最终提高核移植总效率。 相似文献
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摘要:线粒体是哺乳动物细胞中唯一存在有核外遗传物质的细胞器,其功能的正常表达需要核与线粒体的相互作用。线粒体 DNA(mitochondrial DNA, mtDNA)编码电子传递链所需酶中的一些多肽亚基及多种 tRNA 和 rRNA,其余的亚基由核基因编码。异种体细胞核移植可能导致重构胚中 mtDNA 的杂合现象。本实验采用 PCR-限制性片段长度多态性(PCR-restriction fragment length polymorphism, PCR-RFLP)的方法分析以山羊胎儿成纤维细胞为核供体,以去核的绵羊 MⅡ 期卵母细胞为核受体构建的异质克隆胚中线粒体的来源及组成比例。结果表明: 8-cell之前的异质克隆胚中供受体 mtDNA 的比例变化不大,1-cell、2-cell、4-cell、8-cel异质克隆胚中核供体细胞 mtDNA 占受体细胞 mtDNA 的比例分别为2.5±0.8 %;2.8±0.6 %;1.9±0.4 %;1.7±0.6 %, 彼此之间差异不显著(P>0.05);然而,异质克隆囊胚中核供体细胞 mtDNA 的比例下降为0.3±0.1 %,与前四者相比差异显著(P<0.05)。 相似文献
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人兽胚胎研究是胚胎干细胞研究领域的学科前沿。人兽胚胎研究的主要目的是获取干细胞。当今干细胞移植是治疗很多疾病的新希望,如治疗帕金森症、老年痴呆症,以及糖尿病、癌症等。人兽胚胎自从在英国产生,便在全世界范围内掀起一场激烈的伦理争论。支持者认为,人兽胚胎是进行医学研究的一个手段,专家们希望利用它清楚获知某种疾病的发生机理, 相似文献
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