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91.
梨小食心虫(Grapholitha molesta)为我国常见蛀果性害虫,与其他梨果害虫的组织形态非常相似,仅凭形态学特征难以区分,需建立实时荧光PCR检测方法在基因水平上进行鉴定。通过样品核酸提取与质控,设计并验证荧光探针特异性,进一步通过优化反应条件和反应体系,结合特异性分析、灵敏性比对和盲样测试开发了梨小食心虫实时荧光定量PCR检测方法。结果表明:方法特异性强,重复性好(重复间变异系数为0.055~0.359),可靠性高(标准曲线中的R2值为0.991),检出限低(最低检出限3 pg/μL),盲样测试结果与形态学鉴定结果一致,能满足日常检验检疫需求。该操作方法简单易行,检测时限短(约3 h),通量高,特别适合于大批量的抽样检查,可应用于梨小食心虫的检疫工作。 相似文献
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