生物刺激剂复酶糖苷对4种作物种子发芽的影响

以提高种子发芽率为目的，探究生物刺激剂复酶糖苷的最佳施用浓度。通过设置不同复酶糖苷浓度梯度，对小麦、玉米、花生、黄瓜4种作物种子进行浸种后测定发芽率。结果表明，在1～20 mg/L浓度范围内，随着浓度的升高，复酶糖苷对4种作物种子发芽率的提升作用逐渐增强，其中10 mg/L复酶糖苷对种子发芽率具有显著促进作用，可在农业生产中应用。     

芽孢杆菌糖基水解酶GH489的表达及生物活性研究

为了探究芽孢杆菌(Bacillus sp.)糖基水解酶GH489的生物活性，通过设计特异性引物扩增得到目的基因gh489，采用大肠杆菌原核表达系统对重组GH489蛋白进行表达，利用组氨酸标签对目的蛋白进行分离纯化，并检测芽孢杆菌糖基水解酶GH489对二斑叶螨的杀螨活性。结果表明，由大肠杆菌BL21(DE3)表达的重组GH489蛋白为可溶性蛋白质，其蛋白质分子质量约为57 kDa。纯化后的GH489重组蛋白显示出良好的杀螨活性，处理24 h后，二斑叶螨的半致死浓度(LC₅₀)为30.296μg/mL，处理48 h后，二斑叶螨的半致死浓度(LC₅₀)为21.212μg/mL。     

甘油酯水解酶和大豆溶血磷脂对白羽肉鸡脂肪代谢的影响

研究甘油酯水解酶(Glycerol hydrolase,GH)和大豆溶血磷脂(Soybean lysophospholipid,SL)对肉鸡生长性能、肠道消化酶活性和脂肪代谢关键酶基因表达的影响，选取1日龄Ross-308白羽肉鸡288羽，随机分为四组。对照组饲喂基础日粮，试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别在基础日粮上添加200 mg·kg^-1SL、200 mg·kg^-1GH和200 mg·kg^-1SL+200 mg·kg^-1GH，开展为期42 d试验。结果表明，(1)与对照组比，各试验组料重比均显著降低(P<0.05)；(2)与对照组比，各试验组血清中甘油三酯含量均显著降低(P<0.05)，试验Ⅰ、Ⅲ组低密度脂蛋白胆固醇含量显著降低(P<0.05)，试验Ⅲ组肝脏载脂蛋白A和载脂蛋白B含量显著升高(P<0.05)，各试验组肝脏游离脂肪酸含量显著升高(P<0.05)；(3)与对照组比，试验Ⅰ、Ⅲ组十二指肠淀粉酶活性显著升高(P<0.05)，各试验组肝脏中脂肪酸合成酶、苹果酸酶、硬...     

茶树新梢中香叶醇樱草糖苷含量的全基因组关联分析

香叶醇是茶树中含有的一种重要的挥发性单萜醇,在茶树与环境互作中起重要作用,也是茶叶中关键呈香成分之一,茶树新梢中的香叶醇主要以香叶醇樱草糖苷形式存在。发掘香叶醇樱草糖苷含量性状显著关联的SNP位点与候选基因,对香叶醇樱草糖苷含量的遗传调控机制研究与茶树遗传改良具有重要意义。以169个茶树种质为研究对象,连续3年对其新梢香叶醇樱草糖苷含量进行鉴定,基于SLAF简化基因组测序技术开发SNP标记,然后利用一般线性模型(GLM)对茶树新梢香叶醇樱草糖苷含量性状进行GWAS分析,发掘该性状显著关联的SNP位点与候选基因,最后对极端含量材料间的候选基因编码区碱基差异及其上游顺式作用元件进行分析。结果表明,参试群体在3个环境下香叶醇樱草糖苷含量变异系数范围为77.6%～81.8%,广义遗传力为62.6%。香叶醇樱草糖苷含量性状在基因型、环境间均呈现显著差异,变异受遗传影响为主。3个环境下共检测到340个SNP与香叶醇樱草糖苷含量显著相关,其中2个环境下重复检测到65个SNP。基于参考基因组与连锁不平衡衰减距离,获得重复检测到的SNP两侧各100 kb范围内的基因共88个,包含信号蛋白、激酶、磷酸酶、...     

胆盐水解酶筛选及酶法提制鸡胆汁酸的研究

试验旨在从常见双歧杆菌筛选获得高活性胆盐水解酶的菌株并用于鸡胆汁酸的提制。从5种常见双歧杆菌菌株(两歧双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、青春双歧杆菌、乳双歧杆菌、长双歧杆菌)中，通过平板Ca²⁺沉淀法及茚三酮法对活性双歧杆菌进行酶活评价，将高活性菌株的粗酶用于鸡胆汁酸的提制，使用薄层色谱法和高效液相法对所制胆汁酸进行定性和定量检测。结果显示：4种双歧杆菌(两歧双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、青春双歧杆菌和乳双歧杆菌)对甘氨型和牛磺型鹅去氧胆酸均具有水解活性，婴儿双歧杆菌对甘氨鹅去氧胆酸和牛磺鹅去氧胆酸比酶活均显著高于其他3种双歧杆菌(P<0.05)，比酶活分别为0.48 U/mg和0.27 U/mg。酶法工艺提制鸡胆汁酸的得率为5.34%，提取物中鹅去氧胆酸(CDCA)含量为70.7%。结果表明：婴儿双歧杆菌具有高活性胆盐水解酶，酶法工艺提制鸡胆汁酸反应条件温和，提取物纯度较高，较为节能环保。     

一种新型糖苷水解酶的异源表达及酶学性质研究

为得到MtGH6最优的表达宿主，构建了质粒pET21a–MtGH6、pBES–MtGH6、pPICZαA–MtGH6，以大肠埃希菌BL21、枯草芽孢杆菌RIK1285及毕赤酵母GS115为工程菌，对MtGH6进行异源表达及分离纯化，并对表达MtGH6的3个宿主菌的生长状况、产酶量、纯化回收率、酶活力等参数进行比较分析。结果表明：大肠埃希菌BL21及枯草芽孢杆菌RIK1285在生长稳定后，OD值维持在1.5，而毕赤酵母GS115生长稳定后，OD值维持在2.0；毕赤酵母GS115生产的MtGH6为77 mg/L，纯化回收率为15.40%，产酶量和纯化回收率均高于大肠埃希菌BL21、枯草芽孢杆菌RIK1285生产的MtGH6；由毕赤酵母GS115表达的MtGH6的酶活力为15.60 U/mg，由大肠埃希菌BL21及枯草芽孢杆菌RIK1285表达的MtGH6分别为7.45、10.06 U/mg，说明毕赤酵母GS115是MtGH6的最优表达宿主；对其分泌的MtGH6的酶学性质展开研究，结果表明在降解微晶纤维素的反应中，该酶最适pH为8.0，最适温度为60 ℃， 添加0.5 mmol/L Mn2+可使其活性提高，表明MtGH6在生物燃料生产中可能具有良好的应用前景。     

桃PpILR1基因调控分枝角度的功能解析

【目的】明确桃生长素酰胺水解酶PpILR1基因功能，探讨生长素响应因子PpARF4和PpARF8A,通过结合并抑制PpILR1启动子活性调控分枝角度的分子机制，为桃树型遗传改良提供理论依据。【方法】构建PpILR1基因过表达载体稳定转化micro-Tom番茄；克隆PpILR1基因启动子序列及PpARF4、PpARF8A基因编码序列，通过酵母单杂交试验和烟草瞬时试验解析他们之间的调控关系。【结果】与野生型番茄相比，2个PpILR1转基因番茄株系均呈现分枝角度显著减少的表型；酵母单杂交结果表明，转录因子PpARF4和PpARF8A均能结合PpILR1启动子；烟草瞬时结果显示，PpARF4和PpARF8A为转录抑制子，能显著降低PpILR1启动子活性。【结论】PpILR1基因过表达导致分枝角度显著变小，表明PpILR1基因参与调控植物分枝角度形成。     

亚麻生氰糖苷合成关键酶CYP79基因家族的鉴定及表达分析

CYP79蛋白是生氰糖苷合成关键酶,但关于亚麻CYP79基因的研究鲜有报道。本研究对包括亚麻在内的9种作物的CYP79基因家族进行了鉴定,并分析了亚麻CYP79基因的序列特征、复制事件、共线性关系、系统进化、顺式作用元件及表达模式。结果表明,在亚麻、白亚麻、毛果杨、木薯、芝麻、高粱、大豆、葡萄及水稻中分别鉴定到9、9、3、2、5、7、6、16和4个CYP79家族成员;系统进化分析显示, CYP79基因的进化具有物种特异性; LuCYP79不均匀分布在4条染色体上,具有1～3个外显子,其启动子区含大量激素与逆境响应相关元件;共克隆到8个亚麻CYP79基因的全长DNA序列及5个成员的全长cDNA序列;LuCYP79蛋白序列长度为282～565aa,等电点为5.84～9.14,分子量为31.56～62.86kD,均为亲水性蛋白,定位于内质网;共有5对基因发生复制事件,占全部基因的77.8%,全部经历了强烈的纯化选择,其中LuCYP79-1和LuCYP79-9在拟南芥和木薯中均具有同源基因。表达分析表明, LuCYP79家族成员具有组织特异性,且各成员在不同遗传背景下表达模式不同,其中LuCY...     

淀粉水解酶及其水解产物的研究进展

综述了淀粉水解酶的种类和特点,以及不同淀粉酶的酶解产物,并重点介绍了这些产品的主要功能和特性。