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为探究肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)对牛骨骼肌生长发育的作用机制,本研究前期利用定量蛋白质组学与磷酸化蛋白质组学分析野生型蒙古牛(MG.WT)和MSTN+/-蒙古牛(MG.MSTN+/-)腿臀肌肌肉组织中蛋白质水平和磷酸化修饰水平的差异变化,使用已建立的牛骨骼肌卫星细胞体外诱导成肌分化模型,检测设计合成的MSTN siRNA (si-MSTN)干扰效果;采用实时荧光定量PCR和Western blotting方法检测转染si-MSTN的增殖期(GM)和分化第3天(DM3)牛骨骼肌卫星细胞中肌动蛋白细胞骨架调节通路相关基因的mRNA和蛋白水平的表达变化,研究敲低MSTN表达对肌动蛋白细胞骨架调节通路的影响。结果显示,在MSTN+/-蒙古牛肌肉组织中共鉴定到16个肌动蛋白细胞骨架调节通路相关基因表达丰度上调;转染si-MSTN细胞中的MSTN表达水平极显著降低(P<0.01);在转染si-MSTN的GM期牛骨骼肌卫星细胞中,肌动蛋白细胞骨架调节通路相关基因ENAH、ACTN4和Cdc42的mRNA水平均显著升高(P<0.05),PFN1、RhoA和ACTN4的蛋白水平均显著或极显著升高(P<0.05;P<0.01);在转染si-MSTN的DM3牛骨骼肌卫星细胞中,ENAH、CFL1、SCIN和Cdc42基因mRNA水平均显著升高(P<0.05),RhoA基因mRNA水平极显著升高(P<0.01),PFN1和ACTN4的蛋白水平均显著升高(P<0.05)。结果表明,干扰MSTN可以促进肌动蛋白细胞骨架调节通路相关基因的表达,探明了MSTN可能通过介导肌动蛋白细胞骨架调节通路影响牛骨骼肌卫星细胞增殖和成肌分化的分子机制,为进一步研究MSTN对牛成肌分化的调控机制提供参考。 相似文献
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为探究肌生长抑制素(myostatin,MSTN)基因对牛肌肉发育的具体调控机制,本研究选取同一牛场健康鲁西黄牛10头,其中通过转基因技术得到的基因编辑牛MSTN-/-和同种非转基因野生型牛各5头。分别采集两组牛腿臀肌肉样品,利用IIlumina HiSeq高通量测序技术进行转录组测序分析,通过生物信息学方法比较两组样本间的差异表达基因,并进行GO和KEGG富集分析,最后利用实时荧光定量PCR验证转录组测序数据。结果显示,基因编辑型牛和野生型牛之间共检测到18 071个基因。在log2|FoldChange|≥ 1.48条件下,筛选出406个差异表达基因,其中347个显著上调,59个显著下调。GO功能富集分析显示,MSTN基因编辑后显著影响915个功能类别(P<0.05),差异基因主要参与结合、生物系统调节、免疫系统等相关功能。KEGG通路富集分析结果共涉及211个通路,差异基因主要富集在细胞黏附分子、趋化因子信号通路、细胞因子互作等信号通路上,进一步从中筛选出可能参与细胞生长、肌肉发育的差异基因(CD14、KIT、CSF1R、FBP1、DUSP4、ULBP21、PRKCB、SPN、CHAD、SRC)。实时荧光定量PCR检测结果显示,所选差异基因表达水平与转录组表达水平一致,证明测序结果的可靠性。本研究结果表明,MSTN基因发挥作用后可以介导多个下游基因表达,从而影响相关信号通路及生物学过程;同时,所筛选出的差异表达基因可作为进一步研究骨骼肌调控机制的候选靶标。 相似文献
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目的:探讨低钾型周期性麻痹患者血清肌酶学的改变及其与低血钾的关系,以及与多发性肌炎鉴别特点。方法:回顾性分析20例CK水平升高、低钾型周期性瘫痪患者的临床和辅助检查资料,观察其血清CK水平与低血钾的关系,怎样与多发性肌炎鉴别。结果:20例低钾患者的CK水平均有不同程度的升高,因其表现有肌无力、肌肉疼痛、肌酶升高、补钾血清钾恢复正常后肌酶未达正常值,部分病例容易误诊为多发性肌炎。结论:部分低钾型周期性瘫痪患者因其与多发性肌炎具有相似临床表现如肌无力、肌肉疼痛、肌酶升高,临床容易误诊。 相似文献
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犬骨盆骨折的内固定治疗 总被引:1,自引:0,他引:1
由于犬车祸的发生率的增高,骨盆骨折成为常见的损伤之一,仅次于四肢和脊柱骨折,并发症较多,有较高的伤残率和病死率。低能损伤引起的骨盆骨折,多为稳定骨折,临床处理比较容易。而高能损伤的骨盆骨折常较严重,均有不同程度的失血性休克及合并伤。骨盆的畸形愈合及前后环的不稳定会遗留髂痛跛行、下肢短 相似文献
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前段时间本地禽病疫情在发病时间上具有一定的特点,即雏鸡在7日龄左右首免新支二联疫苗后,出现精神不佳、采食下降及轻度腹泻,连续几天后尾羽开始拉长,同时身形也开始变长,有零星死亡。解剖后,主要病变在腺胃和肌胃,腺胃体积增大,黏膜软化易破损,刮开乳头流出类似浓汁样液体;肌胃体积无变化,个别角质层有开裂、溃烂,揭开后,在角质层有病变部位的肌肉层有的出现发 相似文献
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1发病特点以肉鸡采食量普遍不达标,生长缓慢,发病日龄早,瘫痪、出栏大幅推迟为特征的一种疾病。多群发;鸡群的整齐度普遍很差;疾病频发;混合感染严重,尤其是消化系统发病最为严重;发病率很高,个别鸡群达到60%以上。 相似文献
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旨在对山羊脂肪酸转运蛋白2(fatty acid transport protein 2,FATP2)基因进行克隆及生物信息学分析,检测FATP2基因在山羊不同组织中的表达差异,并进一步揭示干扰FATP2基因对山羊肌内前体脂肪细胞脂质代谢的影响。本试验以10月龄健康简州大耳羊(n=12)为试验动物。采用RT-PCR法扩增并克隆山羊FATP2基因,进行序列对比、系统发育树构建及生物信息学分析;利用实时荧光定量PCR检测FATP2基因在山羊不同组织中及在山羊肌内前体脂肪细胞不同分化时期的相对表达水平,合成SI-RNA干扰序列并转染至山羊肌内前体脂肪细胞;使用RT-qPCR检测FATP2干扰效率及脂质代谢相关基因的表达情况;通过Bodipy染色法观察干扰FATP2对脂滴形成的影响,利用GPO-Trinder酶学反应检测甘油三酯含量。结果显示,获得山羊FATP2基因序列全长2 335 bp, CDS区1 863 bp, 5′UTR 188 bp, 3′UTR 284 bp;共编码621个氨基酸,山羊FATP2基因在肝脏表达量最高;RT-qPCR检测结果显示,FATP2表达在细胞中被显著干扰;B... 相似文献