牛肌源性干细胞的培养和鉴定

探讨牛肌源性干细胞(MDSCs)的体外分离、培养、鉴定方法,旨在为牛体细胞核移植研究提供优质的供核细胞。使用胶原酶消化牛骨骼肌,然后采用差速贴壁分离技术纯化获得MDSCs。在倒置显微镜下观察细胞形态,测定生长曲线,分析MDSCs的增殖能力,采用结蛋白(Desmin)、CD34和CD45免疫细胞化学染色对细胞进行鉴定。结果显示,已成功地从牛骨骼肌中分离培养出具有干细胞特征的细胞,该细胞呈Desmin和CD34阳性、CD45阴性。因此,可通过体外原代培养获得高纯度肌源性干细胞。     

辽宁中东部一次区域性暴雨天气过程分析

利用常规天气图、数值预报产品、各种物理量场和卫星云图等资料,对2010年8月27~29日影响辽宁中东部地区的暴雨天气过程进行了综合分析。结果表明：该过程是由高空槽、副热带高压边缘的暖湿气流及南部海面上低压云系共同作用产生的。     

我和“耳思”的点点滴滴

有个故事是这样说的：“混沌初开,上帝创造了人类,上帝见人是如此的单薄,于是就给了他头犬……”古往今来,犬一直都是人类亲密的朋友。犬也是我最喜爱的动物。可我从未想过,也不敢去想,把自己的安全托付给一头犬——这可能吗？犬毕竟只是一种动物,它的确能为人们带来无数的快乐,但像为盲人带路,甚至是引领着过马路这样与盲人生命安全息息相关的“高风险”任务,它们也能担当吗……     

谷物干燥机的研究与发展

论述了国内外谷物机干燥机的研究与发展过程、发展现状与新技术的应用;分析了干燥机械的需求及应用前景。谷物干燥是谷物收获后的一个重要环节,干燥设备是农业机械化的重要组成部分。传统的场院晾粮食干燥方法,受气候影响大、易造成发芽霉变。据农业部门统计,全国每年由于干燥不及时造成霉变损失的谷物达数十亿千克,约占全国粮食总产量的１．５％～３％,在霉雨季节较长的南主省份,秕年粮食霉烂损失高达１０％左右,可见谷物干     

重组猪干扰素α的原核表达及抗病毒活性

为了探究重组猪干扰素(PoIFN-α)在体内外的抗病毒活性，利用pET-32a载体系统，构建了PoIFN-α的原核表达体系。在体外，MTT法在猪肾细胞(PK-15)和猪睾丸细胞(ST)上测定了其细胞毒性，并利用细胞病变抑制法测定其抗水泡性口炎病毒(VSV)、猪脑心肌炎病毒(EMCV)和猪伪狂犬病病毒(PRV)的活性，同时测定了重组蛋白作用PK-15细胞后干扰素刺激基因(ISGs)的转录水平；之后通过小鼠攻毒保护试验，测定了rPoIFN-α治疗后各组织器官的病毒载量，ELISA测定了小鼠血清中细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-10和IL-6的动态变化，并对整个试验期间小鼠出现的临床症状进行打分。结果显示，成功获得了原核表达的特异性重组蛋白rPoIFN-α,在细胞上抗病毒比活性达到1.67×10⁶ IU,对细胞没有损害作用，且显著上调了Mx1、OAS等因子的转录水平；在小鼠体内能明显拮抗EMCV和PRV的增殖，减少促炎因子的产生，延缓临床症状的出现。结果表明，原核表达重组蛋白rPoIFN-α在体内外均具有抗病毒活性，为进一步推进蛋白药物在临床上的应用奠定了基础。     

基于主成分分析法评价薄膜结合ε-聚赖氨酸对采后上海青保鲜效果的影响

以上海青为试验材料，通过分析包装袋内气体成分及组织内叶绿素 a、叶绿素 b、总叶绿素、类胡萝卜素、叶黄素、V_C、可滴定酸、可溶性蛋白、可溶性糖和亚硝酸盐等指标的变化，评价了带孔食品袋（CK₀）、食品袋（CK₁）、P₀薄膜包装及 P₀薄膜包装结合ε- 聚赖氨酸（P₁）处理对 20±1 ℃贮藏上海青保鲜效果的影响。结果表明，原始数据可划分为 2 个主成分因子。第 1 和第 2 主成分因子的贡献率分别为 77.256% 和 12.745%，累计贡献率达 90.001%。叶绿素 a、叶绿素 b、总叶绿素、类胡萝卜素、叶黄素、V_C、可滴定酸、可溶性蛋白和可溶性糖等与上海青的保鲜效果呈正相关，亚硝酸盐与上海青的保鲜效果呈负相关。综合评价得分显示，4 个处理对上海青的保鲜效果依次为：P₁>P₀>CK₁>CK₀。由此可见，薄膜包装尤其是其与ε- ...     

寡氧单胞菌、水稻秸秆和蚯蚓协同修复Cr(Ⅵ)污染土壤

为探究水稻秸秆和蚯蚓联合抗Cr细菌对Cr污染土壤的修复效果和机制,本研究通过室内模拟试验探讨细菌(寡氧单胞菌,Stenotrophomonas sp.,F)、水稻秸秆(S)、细菌+水稻秸秆(SF)、水稻秸秆+蚯蚓(赤子爱胜蚓,Eisenia foetida,SE)和细菌+水稻秸秆+蚯蚓(SFE)对50、300 mg·kg^-1 Cr(Ⅵ)污染土壤的修复效果,生物有效态Cr的变化及总Cr和Cr(Ⅵ)在各粒径团聚体中的分布。结果表明:在试验早、中、后期各处理的总Cr和Cr(Ⅵ)去除率逐渐增加,在50、300 mg·kg^-1 Cr(Ⅵ)暴露后期SFE处理的总Cr和Cr(Ⅵ)去除率最高,其总Cr去除率分别为35.68%、35.29%,Cr(Ⅵ)去除率分别为99.28%、75.33%。SFE处理显著降低了土壤氧化还原电位,增加了土壤pH和有机质含量,并促进了微团聚体凝聚胶结为大团聚体。在0、50、300 mg·kg^-1 Cr(Ⅵ)暴露下SE处理大团聚体的占比最高,与CK相比分别增加了14.57、9.51、9.85个百分点,与SFE相比分别增加了3.73、4.09、3.28个百分点。各处理对Cr化学形态的影响为SFE>SF>SE>S>F,在整个试验过程中除F处理外,其余处理中各化学形态的占比都随试验时间的延长而稳定变化。与CK相比,在50、300 mg·kg^-1 Cr(Ⅵ)暴露后期SFE处理中可交换态的占比分别降低了35.55、21.02个百分点,残渣态的占比分别增加了22.45、12.51个百分点。总Cr主要分布在大团聚体中,Cr(Ⅵ)主要分布在微团聚体中,所有处理各粒径团聚体中的总Cr和Cr(Ⅵ)含量都随试验时间的延长而降低,SFE处理显著降低了大团聚体中总Cr和微团聚体中Cr(Ⅵ)的含量。研究表明,在50、300 mg·kg^-1 Cr(Ⅵ)暴露下水稻秸秆、蚯蚓和寡氧单胞菌协同处理显著增加了土壤总Cr和Cr(Ⅵ)的去除率,降低了生物有效态Cr的占比并改善了Cr在团聚体中的分布。     

稳定表达GM-CSF的重组塞内卡病毒A的构建与鉴定

塞内卡病毒A(Senecavirus A,SVA)是近年来新发现的一种能够引起猪水疱性相关疾病的病毒，该病毒在我国流行范围越来越广，对养猪业造成了巨大经济损失。为提高灭活疫苗的免疫效果，本研究以SVA感染性克隆为基础，将猪源GM-CSF-T2A基因通过融合PCR方法插入到SVA的2A和2B之间，成功构建了重组质粒SVA-GM-CSF,将其转染BHK-21细胞进行病毒拯救及传代。结果显示，重组病毒感染BHK-21细胞可以引起明显的细胞病变；经RT-PCR扩增与基因测序结果表明目的基因正确插入；间接免疫荧光鉴定表明外源基因GM-CSF在该病毒中成功获得了表达。生物学特性分析表明，重组病毒与亲本病毒在BHK-21细胞中具有相似的生长特性，并且该重组病毒在传代过程中具有良好的遗传稳定性。本研究已成功构建了稳定表达GM-CSF的重组SVA,该重组病毒的构建为进一步明确SVA致病机制和研制新型疫苗提供了理论支持与技术指导。     

羊干扰素α和γ融合表达及抗病毒活性分析

为进一步探究羊干扰素α和γ的抗病毒活性效果，根据GenBank羊IFN-α和IFN-γ基因序列，使用Linker连接合成目的序列，成功构建了3种重组表达质粒pET28a-OviIFN-γ、pET28a-OviIFN-α、pET28a-OviIFN-γ/α并进行原核表达。用细胞病变抑制法和RT-qPCR测定重组蛋白rOviIFN-α、rOviIFN-γ和rOviIFN-α/γ的抗病毒活性。结果表明，rOviIFN-α、rOviIFN-γ和rOviIFN-α/γ在牛肾细胞(MDBK)以及非洲绿猴肾细胞(Vero)细胞中有抗病毒活性，且rOviIFN-α/γ的抗病毒效果最优；rOviIFN-α、rOviIFN-γ和rOviIFN-α/γ能够显著上调MDBK以及Vero细胞中4种干扰素刺激基因(IFN stimulated genes, ISGs)的mRNA转录水平，且rOviIFN-α/γ对干扰素刺激基因的上调水平最显著。综上所述，本试验表达的重组蛋白都具有抗病毒作用，其中串联表达的重组蛋白抗病毒活性以及干扰素刺激基因转录水平较高。     

渔业资源自然死亡估算方法研究进展

自然死亡系数是许多渔业资源评估模型的重要参数,但现有的估算方法十分有限,且每种方法都有其适用范围。文章综述了估算自然死亡系数的常见方法,分析了当前普遍使用的直接方法和间接方法所存在的弊端,认为自然死亡系数估算的时间范围不应局限于资源群体完全开发阶段,应包含资源成为补充群体前的阶段;通过引入性别系数,避免使用间接方法估算自然死亡系数时产生不具生物学意义的资源群体性别结构特征;进行自然死亡研究时,还应考虑不确定性的影响。