环形泰勒虫裂殖体表面蛋白基因高免疫原性区片段的克隆及其表达

根据环形泰勒虫TaA1272-1株裂殖体表面抗原(TaSP)基因的序列设计了1对引物，用PCR扩增出该基因长为393bp的高免疫原性区片段(SBxp)。将扩增产物连接到pGEM-T Easy载体上，转化入大肠埃希氏菌JM109中进行克隆。随后将重组质粒pGEM-SBxp和表达载体pGEX-4T-1分别以BamHⅠ、XhoⅠ酶切后，将酶切的目的片段SBxp亚克隆到原核表达载体中构建了重组表达载体pGEX-4T-1-SBxp，并将其转化到BL21宿主菌中。提取重组质粒经BamHⅠ、XhoⅠ酶切、PCR鉴定和测序确证后，阳性克隆用IPTG诱导表达。收集不同时间的菌液进行SDS-PAGE电泳和Western blotting检测。结果，SBxp基因在大肠埃希氏菌中成功表达，其表达产物为分子质量43ku的融合蛋白，该产物能被牛环形泰勒虫阳性血清所识别。     

ST融合蛋白的酵母表面展示及其对大鼠小肠黏膜结构的影响

本试验旨在获得能够将大肠杆菌ST融合蛋白展示在酿酒酵母表面的重组酿酒酵母基因工程菌并探究其对大鼠小肠黏膜结构的影响。将estA和estB基因克隆至pYD1质粒中,构建重组质粒pYD1-estA-estB,应用酵母表面展示技术获得EBY-100/pYD1-estA-estB重组酵母基因工程菌。选取36只SPF级SD大鼠,随机分为空白对照组、工程菌组、酵母菌组,分别灌胃生理盐水、工程菌菌液、酿酒酵母菌菌液,持续灌胃21d后连续3d灌胃大肠杆菌H10407菌液,取各组大鼠的十二指肠、空肠、回肠制作切片,观察各段小肠绒毛的长度、宽度、隐窝深度及绒毛长度/隐窝深度(V/C)进行统计分析。利用ELISA、real-time PCR技术观察肠道黏膜中的SIgA、IL-2、IL-4和IFN-γ含量变化。结果显示,通过免疫荧光试验证明大肠杆菌ST融合蛋白成功在酿酒酵母表面展示;灌胃21d时,与空白对照组相比,工程菌组及酵母菌组的十二指肠绒毛长度、V/C值显著升高(P0.01),工程菌组绒毛宽度显著升高(P0.05);空肠绒毛长度、V/C值显著升高(P0.01),隐窝深度显著下降(P0.05);工程菌组和酵母菌组的回肠绒毛长度及V/C值显著升高(P0.01)。灌胃大肠杆菌后,各组与灌胃前相比,空白对照组及酵母菌组的十二指肠与空肠绒毛长度、V/C值显著下降(P0.01),空肠隐窝深度显著升高(P0.01),回肠V/C值显著下降(P0.01);工程菌组无明显变化。灌胃21d,工程菌组与酵母菌组的SIgA、IL-2、IL-4和IFN-γ含量均显著高于空白对照组(P0.01);攻毒大肠杆菌后,空白对照组及酵母菌组的SIgA、IL-2和IL-4含量均显著下降(P0.01),各组的IFN-γ含量显著升高(P0.01)。结果表明,EBY-100/pYD1-estA-estB重组酵母基因工程菌不仅具有酵母菌的益生作用,能促进小肠黏膜发育,而且对产肠毒素大肠杆菌引起的肠道黏膜损伤有一定的保护作用。本试验为新型微生态制剂的研发提供依据。     

增施CO_2对大棚不同辣椒品种农艺性状及产量的影响

对大棚栽培的4个辣椒品种开展增施CO_2试验,结果表明,增施CO_2对不同辣椒品种的茎粗、开展指数、叶片指数及果实性状影响不明显,但株高、叶柄长和产量增加明显,4个辣椒品种增产幅度为10.62%~16.12%。     

脂肪营养及其在猪生产中的应用

猪日粮中添加脂肪在国内外已有二十几年的历史,各国专家都进行了较多的研究,在妊娠后期日粮和泌乳期日粮中添加脂肪会提高乳量、初乳和常乳的乳脂率以及仔猪从出生到断奶的生存率。国内专家们在这方面也得出了相同的结果。脂肪是体组织的主要成分,而且脂肪由于其生物学价值和能量价值高在猪的营养中起着重要作用,是猪饲粮中的重要组成成分。脂肪在动     

浅析“营改增”对快递企业的影响

"营改增"是我国现阶段财税部门进行试点的一个重要项目,这项工作的开展是我国税制改革的一次重大改革举措,促进了我国税收体制的完善健全。快递行业也是营改增的一个对象,这几年我国电子商务发展迅速,与之相关的快递行业也相应的迅速发展。营改增对快递企业既有有利的方面也有不利的影响本文,结合"营改增"的政策和快递企业的特点分析"营改增"对快递企业的影响。     

服务业实施“营改增”税务风险分析与防范

随着我国经济的发展以及社会分工的不断细化,营业税重复征税等问题的严重性日益突出。"营改增"在消除重复征税、促进产业结构调整、利于行业间公平竞争等方面发挥着重要作用。文章阐述了实施"营改增"对服务业的积极影响,分析了存在的税务风险,并提出了一些防范建议。     

盆栽花卉各阶段施肥法

盆栽花卉花盆内的泥土较少，肥料有限，不能满足植物生长的营养需求，因此在花木生长不同阶段，要合理掌握增施不同的肥料。     

新法加工冬笋罐头

<正>1.原料选择。以毛竹(也称楠竹)为原料最好。一般要求冬笋重125～1000克,横径在12厘米以下,表面平整,笋肉厚,无粗纤维,节间短,对春笋无严格规定。原料选取     

蟹种微孔管道增氧培育技术

为提高蟹种培育成活率,增加经济效益,2008—2010年,洪泽县在高良涧镇、西顺河镇、岔河镇等渔业重点镇开展了蟹种微孔管道增氧培育技术示范推广。从实施效果看,产量和效益都有明显提高,池底环境明显改善。     

纳米Fe3O4负载酸改性炭对水体中Pb2+、Cd2+的吸附

为探讨纳米Fe₃O₄负载联合硝酸改性椰壳炭对Pb²⁺、Cd²⁺单一及复合溶液的吸附特性，通过静态吸附实验，针对吸附剂的表面特性、投加量、溶液初始pH、吸附时间、重金属初始浓度等影响因素进行了探讨，应用等温吸附模型及吸附动力学模型对吸附特性进行了研究。结果表明，纳米Fe₃O₄负载酸改性炭比表面积较未改性椰壳炭增加了221.03 m²·g^-1，表面含氧官能团如O-H、C=O、C-O-C增加，芳香性增强，等电点提高至5.68。从经济效率角度考虑5 g·L^-1为合理吸附剂用量，pH为5.0时，吸附效果最好，吸附在4 h达到平衡。准二级动力学模型对吸附的拟合度更高，吸附主要是化学吸附，吸附由快速外扩散和颗粒内扩散共同作用，Pb²⁺、Cd²⁺的吸附分别更符合Langmuir和Freundlich等温吸附模型。纳米Fe₃O₄负载酸改性椰壳炭对Pb²⁺、Cd²⁺的最大吸附量（Q_m）分别达42.54 mg·g^-1和25.79 mg·g^-1，为未改性椰壳炭的1.87倍和2.23倍，复合溶液中Pb²⁺、Cd²⁺的Q_m分别为单一溶液的65.16%和54.21%，这揭示了离子共存条件下的吸附竞争现象。研究表明，纳米Fe₃O₄负载联合硝酸改性提高了椰壳炭对Pb²⁺、Cd²⁺的吸附能力，且Pb²⁺的吸附性能及吸附竞争性优于Cd²⁺。