排序方式: 共有138条查询结果,搜索用时 973 毫秒
81.
82.
本研究以小鼠组织的总RNA为模板,通过RT-PCR扩增得到小鼠信号转导子和转录激活子1(STAT1)基因完整开放阅读框的碱基序列,然后将其克隆到真核表达载体p DsRed-N1中,构建p DsRed-N1-STAT1重组质粒。测序成功的真核质粒转染至BHK-21细胞,通过α干扰素(IFN-α)分子刺激,检测细胞中STAT1分子的活化状态与定位,最终通过坦布苏病毒刺激,荧光显微镜检测STAT1分子的细胞内定位。结果表明,小鼠的STAT1基因开放阅读框为2 250 bp,编码749个氨基酸。同源性比对结果表明,小鼠STAT1与人、大鼠、猪、马等哺乳动物STAT1氨基酸序列的一致性分别为92%、97%、91%、91%。转染结果表明,构建的p DsRed-N1-STAT1真核表达质粒在BHK-21细胞中成功表达,无IFN-α刺激时,红色荧光只在BHK-21细胞的细胞质中出现,而加入IFN-α后,红色荧光则大多分布于细胞核内。用坦布苏病毒感染细胞后,红色荧光多分布于细胞质中。说明,构建的真核质粒p DsRed-N1-STAT1在哺乳动物细胞中能够正确表达融合蛋白质Red-STAT1,而且在IFN-α刺激下,Red-STAT1可由细胞质向细胞核转运,同时发现,坦布苏病毒感染能够有效抑制STAT1分子的核转运。 相似文献
83.
坦布苏病毒是我国新发易引起家禽出现严重产蛋下降和中枢神经系统异常的重要传染病病原.通过特异性的化学阻断剂预处理DF-1细胞,噬斑计数法检测其对病毒滴度的影响,相对荧光定量RT-PCR检测其对病毒核酸表达的影响,并对影响显著的结果进行吸附和内吞试验.结果显示,网格蛋白抑制剂氯丙嗪和动力蛋白抑制剂dynasore可显著降低病毒滴度和病毒核酸表达,且主要作用于内吞过程,对病毒吸附无影响.胆固醇抽提剂甲基-β-环糊精、小窝蛋白抑制剂genistein及胞吞抑制剂EIPA对病毒滴度无明显影响.结果表明,坦布苏病毒入侵DF-1细胞依赖于网格蛋白和动力蛋白,而不依赖于胆固醇、小窝蛋白和胞吞作用. 相似文献
84.
通过原核表达的方法得到血清4型禽腺病毒的主要结构蛋白六邻体蛋白;根据GenBank中血清4型禽腺病毒六邻体蛋白的基因序列,设计一对特异性引物,利用普通PCR方法扩增得到hexon基因的全长序列。将PCR扩增得到的血清4型禽腺病毒六邻体基因片段,在其两端插入酶切位点后克隆至载体pMD18T中,经PCR鉴定和测序分析正确后,与原核表达载体pET-32 a进行连接,构建pET-32 a-hexon原核表达载体,并对其进行双酶切和测序鉴定。将构建成功的表达载体转化至BL21(DE3)中,用1 mmol/L的IPTG进行诱导表达,对得到的重组蛋白进行SDS-PAGE分析和Western Blot鉴定;经双酶切鉴定和测序鉴定,pET-32a-hexon原核表达载体构建成功,插入的六邻体蛋白基因片段大小为2 814 bp,在1 mmol/L浓度IPTG诱导3 h时重组蛋白表达量最高,且重组蛋白主要以包涵体形式存在于沉淀中。SDS-PAGE分析结果显示,融合蛋白分子量为118 ku。免疫印迹分析结果显示,融合蛋白可被抗FAdV-4的血清和HIS标签抗体特异性识别;成功表达了血清4型禽腺病毒的主要结构蛋白六邻体蛋白,且得到的重组蛋白具有良好的反应原性,可用于血清4型禽腺病毒的进一步研究中,为血清4型禽腺病毒病的预防和治疗奠定了良好的基础。 相似文献
85.
为了促进平川区城郊周边造林绿化工程的持续发展,总结指出工程实施过程中存在的3个突出问题,即造林成本高、造林后续经营管护难度大、绿化林地无经济产出;分析认为问题根本原因在于生态文明意识朦胧不清;进而提出4项对策,分别是大力倡导生态文明意识、适地适树、大力推广节水造林技术、创新经营模式。 相似文献
86.
87.
运用偏离份额分析法对景谷县2005—2011年森林资源结构与资源竞争力进行了定量分析,结果表明:从普洱市森林资源发展情况看,结构偏离分量和竞争力偏离分量无论正负,其值都不大,说明景谷县森林资源结构与资源竞争力整体较好,只在局部上须作一定的调整。 相似文献
88.
网络的发展改变了高校图书馆生存的环境,本文通过比较传统与现代服务模式的特点,进而探讨服务模式的创新与改变。 相似文献
89.
[目的]研究5种植物提取物对绣线菊蚜生物活性的影响。[方法]采用浸渍法,以95%乙醇为溶剂,对竹柏、小花八角、单瓣狗牙花、灯台树、辣蓼5种植物进行提取。将5种植物提取物分别稀释成1、5、10倍液,在室内用叶片残留法对绣线菊蚜进行触杀测定。[结果]5种植物的触杀效果为灯台树〉小花八角〉辣蓼〉竹柏〉单瓣狗牙花。不同浓度的5种植物提取物对绣线菊蚜的校正死亡率均无显著差异,竹柏、小花八角和辣蓼3种提取物的不同触杀时间的校正死亡率差异显著,单瓣狗牙花提取物不同触杀时间的校正死亡率差异极显著,灯台树提取物在不同触杀时间的校正死亡率无显著差异。[结论]5种植物提取物对绣线菊蚜的触杀效果相当。 相似文献
90.