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PCR是近年来发展起来的一项分子生物学新技术 ,具有灵敏、特异、快速、简便和适用面广等优点 ,因而在分子生物学检测与研究中具有广阔的应用前景。目前 ,PCR被广泛应用于众多领域 ,其在支原体检测中的应用与发展已经取得了可喜的成绩。文章简要介绍 PCR在动物支原体检测中的应用 ,包括应用通用 PCR引物与特异性引物检测支原体 ,以及 PCR在禽类、牛和猪支原体检测中的应用现状。表明在实验室和临床中应用 PCR检测支原体是一种有效的方法。 相似文献
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通过静态、动态吸附和解吸实验,研究了3种大孔吸附树脂对草莓多酚的纯化效果,并分析了纯化的草莓多酚在体外的抗氧化活性。结果表明:在3种大孔吸附树脂中, HPD400树脂对草莓多酚的吸附和解吸率最高。得出的HPD400大孔树脂纯化草莓多酚的最优工艺参数如下:质量浓度为3 mg/mL、pH值为2.0的草莓多酚提取液以1 mL/min的流速进行上样,并用80 mL体积分数为50%的乙醇以1 mL/min的流速进行洗脱。经HPD400大孔树脂分离纯化后的草莓多酚纯度约是纯化前的2.71倍,其总抗氧化能力也提高了2.88倍。纯化草莓多酚清除DPPH·自由基、羟基(·OH)自由基和超氧阴离子(O_2~(·-))自由基的能力显著高于同浓度粗多酚的。 相似文献
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茄子SmMsrA基因VIGS表达载体的构建及表达分析 总被引:1,自引:0,他引:1
利用RT-PCR从茄子单性结实品系D-10中获得甲硫氨酸亚砜还原酶A基因(Sm Msr A)的编码区。通过Gateway同源重组技术,构建了3个分别含Sm Msr A基因不同片段的烟草脆裂病毒(Tobacco rattle virus,TRV)介导的基因沉默(VIGS)表达载体p TRV2-Sm Msr Ai。表达载体转入农杆菌GV3101后,用注射压迫法侵染茄子叶片。采用表型观察、TRV病毒分子检测和q RT-PCR技术,评价构建的VIGS体系对Sm Msr A基因的沉默效果。结果表明,报告基因PDS沉默后叶片呈现明显的光漂白现象,Sm Msr A基因沉默后叶片呈花叶状,果实变小,叶片和果实中的Sm Msr A基因的表达量明显降低,表明Sm Msr A基因是正向调控茄子果实发育的相关基因。 相似文献
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以圆顶茄子和尖顶茄子为亲本构建6世代群体(P_1、P_2、F_1、BC_1P_1、BC_1P_2、F_2),在春露地和秋大棚两个茬口分别种植6世代群体,利用目测法和Tomato Analyzer软件分析法采集茄子果顶形状数据,应用植物数量性状主基因+多基因混合遗传模型多世代联合分析方法,对茄子果顶形状进行遗传分析。结果表明:目测法和软件法都可以用来描述茄子果顶形状,Tomato Analyzer软件分析法获取的果顶数据计算出的AIC值完整性好、适应性检测中的统计量差异显著个数少,对茄子果顶形状的数据测量更为准确,更加适用于茄子果顶形状的采集。茄子果顶形状表现为数量性状,受2对加性-显性-上位性主基因控制,同时也受环境条件的影响。在分离群体中F_2群体主基因遗传率高、稳定性好,主基因遗传率达到72%以上,育种过程中适合在F_2群体进行果顶形状的选择。 相似文献
87.
本研究以茄子单性结实品系D-10和非单性结实品系03-2所构建的抑制差减文库(SSH)中差异表达的EST片段fan11为依据,利用RACE技术克隆得到一条与AGL9基因一致性达97.93%的cDNA序列,命名为SmA GL9。生物信息学分析表明,该基因有一个全长726 bp的开放阅读框,编码241个氨基酸,预测蛋白分子量为27.546 2 kD,理论等电点为9.00。保守结构域分析发现该蛋白含有MADS-MEF2-like和K-box两个保守结构域,属MADS-box转录因子。同源进化分析结果显示SmAGL9基因的蛋白质序列与辣椒AGL9基因同源关系相近。RT-qPCR分析表明,低温条件下SmAGL9基因在单性结实和非单性结实的子房和果实发育过程中均有表达,果实发育初期单性结实品系中的表达量显著高于非单性结实品系,推测SmAGL9基因在茄子单性结实子房和果实发育初期具有重要的调控作用。结果可为进一步研究茄子单性结实果实形成的分子机理提供参考。 相似文献
88.
本实验利用磷酸钙吸附法从猪胰脏、鸡胰脏中分别得到了鸡胰多肽(APP)、猪胰多肽(PPP)粗提液,用sphadex G-50柱层析脱盐后制备出了APP、PPP粗品;并用Folin-酚试剂法测得自制APP、PPP粗品的肽含量;用SDS-PAGE电泳法对自制APP、PPP粗品进行了鉴定。结果表明:用Folin-酚试剂法测得自制APP粗品的肽含量为:24.52 mg.g-1;PPP粗品的肽含量为:8.15 mg.g-1。从电泳图像可见,经Sephadex G-50层析后的APP、PPP纯度较高,APP和PPP的分子量在4.2KD范围内,与Kimmel等报道的结果以及市售APP纯品的分子量是一致的。 相似文献
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猪肺炎支原体168株是由江苏省农科院畜牧兽医研究所对国内分离强毒株(Js株)传代致弱而育成的一个无细胞培养弱毒株,其形成的分子机理并不清楚,本试验旨在揭示其遗传变异的规律。研究选择Mhp国际标准株J株、国内鉴定强毒株-济南株、Js株以及168弱毒株的5个不同培养代次进行扩增片段长度多态性(Amplified Fragment Length Polymorphism,AFLP)分析。从35对AFLP引物组合中共筛选出6对具有良好多态检出率的引物组合,扩增产物上变性聚丙烯酰胺电泳,银染显色,UPGMA聚类分析,J株、济南株、Js株和168弱毒株不同培养代次聚为三个不同的类群,而168弱毒株不同培养代次之间又可细分为两个亚类群,即高代次的和低代次的两个亚类群。实验从分子水平初步证明Mhp168弱毒株在遗传上已经形成了一个稳定的毒株。 相似文献
90.