基于ITS2序列的藏当归及易混植物DNA分子鉴定

笔者所在实验室长期从事藏药基源鉴定与药物开发,为了确保试验药材的质量及临床安全用药,运用ITS2条形码技术对采自西藏的藏当归及相似植物进行分子鉴定.首先,利用试剂盒提取植物叶片的DNA,对ITS2序列进行PCR扩增,双向测序后运用SeqMan组装.而后,基于ITS2 Database中的Annotate注释方法去掉两端的5.8S区和28S区获得ITS2条形码并预测二级结构,用MEGA 5.0软件进行遗传距离计算并构建系统进化树(NJ).分析发现,试验中的4种类似植物ITS2条形码间存在明显差异,结合二级结构、遗传距离、进化树位置及形态对比可知其分为3个物种并确定了其分类地位.试验证明,ITS2条形码可有效快速地鉴别易混中药材的种类,为保证其临床用药安全提供了简单、高效、准确的技术手段.     

当归对血虚大鼠Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶的影响

目的:研究当归对血虚证大鼠Na~+-K~+-ATP酶和Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶的影响。采用化学药物乙酰苯肼和环磷酰胺联合造模的方法,建立大鼠血虚模型,通过血常规、生化指标分析,初步探讨当归不同剂量对大鼠Na~+-K~+-ATP酶和Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶的影响。方法:将SD大鼠随机分为正常对照组、血虚模型组和当归水煎液高、中、低剂量组。灌胃给药并进行血常规等相关指标检测,主要包括外周血红细胞(RBC)、白细胞(WBC)、血红蛋白(HGB)、红细胞膜ATP酶活性。结果:随着给药天数的增加,模型组大鼠行动慢、眼睛无光。正常对照组和给药组大鼠活动大体相当。当归不同剂量组大鼠红细胞、白细胞、血红蛋白与模型组比较显著性升高(p0.05);与正常对照组相比模型组大鼠红细胞Na~+-K~+-ATP酶活力和Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶活力均明显降低(p0.05),当归不同剂量组红细胞膜Na~+-K~+-ATP酶活力和Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶活力均明显高于模型组和正常对照组(p0.05)。结论:当归可以有效改善乙酰苯肼和环磷酰胺联合造成的大鼠血虚证。     

魔芋花叶病毒衣壳蛋白的原核表达和多克隆抗体制备

采用小RNA测序技术对甘肃省榆中县疑似感染病毒病的当归[(Angelica sinensis(Oliv.)Diels]样品进行测序鉴定,发现样品中含有魔芋花叶病毒(Konjac mosaic virus,KoMV),通过反转录PCR(RT-PCR)扩增KoMV衣壳蛋白(capsid protein,CP)的cp基因,克隆的KoMV cp基因连接原核表达载体pET-28a(+),导入E.coli Rosetta^TM(DE3)诱导表达蛋白,在Ni-NTA重力柱层析作用下纯化CP融合蛋白,并以此作为抗原免疫新西兰大耳白兔制备多克隆抗体。序列分析表明:KoMV cp基因片段大小为840 bp,编码280个氨基酸的外壳蛋白;与GenBank已注册同源性较高的KoMV分离物相比,核苷酸序列相似性为85.58%~99.41%,氨基酸序列相似性为89.32%~99.29%;KoMV的病毒种群分布存在明显的区域性和寄主差异。SDS-PAGE显示,不同温度诱导下KoMV CP融合蛋白在E.coli Rosetta^TM(DE3)中均以包涵体的形式大量表达,融合蛋白分子量为36 ku。间接ELISA和Western blot检测结果显示,制备的多克隆抗体效价达到32 000,能够与感染KoMV的当归叶片和纯化蛋白特异性结合,具有良好的特异性。本研究成功制备了当归KoMV CP融合蛋白的多克隆抗体IgG,为开发KoMV的血清学检测技术及CP蛋白的功能研究奠定了基础。     

加味当归补血治疗奶牛虚汗症

《古方新用》称用当归补血汤治人虚汗,屡试屡验。笔者用于治好牛虚汗,方法简便,疗效确切,且无副作用。现介绍如下:1 当归补血汤的组成及治疗机理 当归补血汤,出自《内外伤辨惑论》,其组方为:黄芪30g,当归6g,主治劳倦内伤,血虚发热等     

加味三拗汤治疗喉源性咳嗽28例

喉源性咳嗽是感冒后期以阵发性喉头奇庠干咳为主的病症,常缠绵难愈。笔者自1995年以来运用加味三拗汤治疗28例,取得满意疗效,现报道如下。临床资料 治疗患畜28例(其中马6例、骡5例、驴5例、牛8例、羊4例)。病程7天到1.5年,平均2月。临床表现为阵发性喉头奇痒引发的干咳,咳呈连续性甚至痉挛性,伴有咽痛、声嘶。舌淡红、苔薄白或白腻,脉多弦滑,颌下淋巴结肿大。2 治疗方法用加味三拗汤治疗。药物组成为炙麻黄15g、苦     

卓尼县高海拔地区当归规范化栽培技术

本文就当归的规范化栽培技术进行了综述,包括栽培条件、选地整地、基肥的使用、种植方法、栽种、田间管理、病虫害防治、采收及加工、储藏与养护,为规范化栽培当归提供技术支持。     

当归药材与土壤中无机元素及其指标性成分相关性分析

目的：研究当归与种植土壤中无机元素及其指标性成分间的相关性,为当归微量无机施肥和种植土地选择提供参考。方法：收集40份不同样地当归药材样本及相应土壤样本,应用石墨炉原子吸收分光光度法测定铅、镉含量,采用原子荧光法测定汞、砷含量,采用原子火焰分光光度法测定铜含量,其余元素均采用电感耦合等离子体发射光谱法（ICP-AES）测定,应用HPLC法测定藁本内酯、阿魏酸含量,数据采用SPSS11.5软件进行多元统计分析。结果：当归药材中砷（As）元素与其藁苯内酯、阿魏酸含量显著相关,相关系数分别为0.333、0.246;当归药材中Cu、K、Mn、Pb与土壤中Cu、K、Mn、Pb含量显著相关,相关系数分别为0.596、0.812、-0.720、0.735,表明当归中Cu、K、Pb的含量随栽培土壤中含量的增高而增高,Mn在土壤中不易被当归吸收。结论：当归对Pb、Cu元素可过度吸收,应选择Pb、Cu含量较低的土地栽培当归,否则富含这两种金属的土地可导致生产药材中这两种金属元素含量超标;药材因与土壤中Mn元素含量呈负相关,对于当归生长需要的微量元素Mn,应采用叶面施肥,不宜在根部施用;砷元素与提高当归品质的相关性需田间施肥实验进一步证明。     

基于电子鼻技术的野生当归与栽培当归气味比较

目的：评价甘肃野生当归与栽培当归的品质。方法：通过电子鼻检测不同当归气味在传感器上的响应值,并采用主成分（PCA）、判别因子（DFA）进行分析。结果：野生当归与栽培当归气味差异明显。结论：电子鼻技术对当归气味的判别与传统经验鉴别相一致,可以作为中药质量的快速鉴别手段。     

海拔对当归产量和阿魏酸含量的影响

目的：通过研究甘肃岷县不同海拔当归产量和阿魏酸含量变化,为扩大当归生产适宜区提供理论参考。方法：采用大田小区试验,当归产量以阴干后称重测定,阿魏酸含量采用HPLC法测定。结果：当归产量随海拔升高其变化规律不明显,海拔2 624 m产量最高,与其他海拔间差异显著（P〈0.05）;2 624-2 810 m海拔范围当归平均产量最高。当归中阿魏酸含量在2 294-2 624 m海拔范围内随海拔升高而增加,海拔2 624 m阿魏酸含量最高,与其他海拔间差异显著（P〈0.05）;2 294-2 519 m海拔范围当归平均阿魏酸含量最高。结论：2 624-2 810 m海拔范围有利于当归产量增加,2 294-2 624 m海拔范围有利于当归中阿魏酸含量增加,因此,在2624 m海拔下有利于提高当归产量和阿魏酸含量。     

当归液促绿毛龟生毛

绿毛龟是名贵的观赏兼药用动物，走俏海内外。１只品级较高的商品绿毛龟，国内售价高达１０００元，国外高达２ ０００美元，养殖效益很好。但如何促绿毛龟生毛快，仍是养龟户最棘手的问题。下面介绍一种当归液培毛新法，可使绿毛龟培毛周期由２年缩短到４～６个月，而且商品档