基于网络药理学方法研究阿司匹林丁香酚酯防治犬心血管疾病的作用机制

试验旨在采用网络药理学方法探讨阿司匹林和丁香酚的靶点、基因富集和通路来推测阿司匹林丁香酚酯(AEE)防治犬心血管疾病的作用机制。首先从DrugBank数据库检索阿司匹林、丁香酚获得其作用靶点,进而构建化合物-靶点网络,再将其靶点上传至STRING数据库,物种选择犬,得到作用于犬蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络图,最后将作用于犬的靶点上传至DAVID数据库,物种选择犬,筛选出错误率<0.01的基因富集和KEGG通路,从而构建靶点-通路网络图,用以推测AEE防治犬心血管疾病的作用机制。通过检索分析可知,阿司匹林和丁香酚已知的相应靶点有15个,其中8个靶点可作用于犬,关键靶点涉及TP53基因、NF-κB、雄激素受体、前列腺素G/H合成酶1;基因功能富集(GO)条目4个,其中分子功能2个,涉及甾体结合和转录因子活性、序列特异性DNA结合,生物过程2个,涉及到DNA转录模板和DNA模板转录的正向调节;KEGG通路2条,涉及前列腺癌和癌症信号通路。综上所述,推测AEE可能通过调控TP53基因、NF-κB、雄激素受体、前列腺素G/H合成酶1等靶点,基因功能富集于DNA转录模板、甾体结合、转录因子活性、序列特异性DNA结合、DNA模板转录的正向调控,通过前列腺癌及其他癌症信号通路来治疗犬心血管疾病。     

糖酒醋液对甲基丁香酚引诱桔小实蝇成虫效果的影响

通过室内生测与田间诱捕试验观察了糖酒醋液[糖∶酒∶醋∶水＝76∶ 152∶ 53∶ 760(g/L)]与甲基丁香酚对桔小实蝇成虫的引诱效果.室内生测结果显示:糖酒醋液对桔小实蝇雌虫引诱效果显著(P＜0.05),对雄虫引诱效果不显著(P＞0.05);甲基丁香酚仅对性成熟雄虫显著引诱作用(P＜0.05);当甲基丁香酚挥发物与糖酒醋液气味混合后对性成熟雄虫的引诱效果要显著强于甲基丁香酚(P＜0.05).田间诱捕结果显示:糖酒醋液在石榴园可诱到少量的桔小实蝇雌虫;将糖酒醋液与甲基丁香酚组合时对桔小实蝇雄虫的引诱效果显著强于单独使用甲基丁香酚的效果(P＜0.05).     

丁香酚微囊的制备及质量评价

【目的】研究丁香酚微囊的制备工艺,并对所制备的微囊质量进行评价。【方法】以海藻酸钠为囊材、丁香酚为囊心、吐温-80为乳化剂制备丁香酚微囊,用正交试验优化制备工艺,对微囊的形态、药物包封率及其挥发性进行检测。【结果】丁香酚微囊的最佳制备工艺条件为:海藻酸钠质量浓度为25 g/L,海藻酸钠与丁香酚质量比为1∶1,吐温-80添加量为0.3%。按以上工艺所制备的丁香酚微囊呈圆球形,表面光滑,粒径为35~65μm的丁香酚微囊占76.1%~78.4%,丁香酚含量为820.7~823.5 mg/g,包封率为87.5%~87.8%。100℃加热后10 h,微囊中丁香酚的挥发率为13.4%,而原料药丁香酚的挥发率为42.4%(P<0.01)。【结论】确定了丁香酚微囊的最佳制备工艺条件,所制备的微囊圆整光滑,包封率高,稳定性好。     

丁香酚对罗非鱼麻醉效果的初步研究

为研究丁香酚对罗非鱼的麻醉效果,用体长(27.00±0.05)cm的罗非鱼进行了麻醉试验。结果显示,在水温25~27℃条件下,当丁香酚浓度在20~200 mg/L时,麻醉所需的时间与麻醉剂浓度呈负相关,而复苏时间与麻醉剂浓度呈正相关;在丁香酚浓度为50 mg/L的药液中药浴20 min,罗非鱼复苏所需的时间为3~4 min,在理想的复苏时间范围内;但随着药浴时间的延长,以及在空气中暴露时间的延长,深度麻醉的罗非鱼复苏所需的时间增加,且复苏率降低。试验结果表明,丁香酚是安全、有效的罗非鱼麻醉剂,其浓度在50~100 mg/L时,麻醉效果最佳,罗非鱼1~2 min即进入麻醉状态,麻醉后的罗非鱼3~4min复苏,可满足常规实验操作的需要。     

丁香酚的分离及其杀多子小瓜虫活性研究

利用不同极性大小的溶剂石油醚、乙酸乙酯、氯仿、甲醇回流提取丁香制备粗提物,进行杀灭多子小瓜虫幼虫和包囊的药效活性追踪,确定丁香杀虫的活性部位为石油醚提取部分,进而利用硅胶柱层析和中压制备液相等分离技术结合活性追逐试验追踪分离丁香石油醚提取物(对多子小瓜虫幼虫和包囊的100%致死质量浓度分别为50mg/L和80mg/L),最终分离获得一种杀虫活性物质,经质谱、核磁氢谱、核磁碳谱等多种波谱分析技术确定该活性物质为丁香酚。体外杀虫结果表明,丁香酚对多子小瓜虫具有较强的杀灭作用,其对幼虫15min、1h、2h、3h和4h的半数致死质量浓度分别为6.21(5.85~6.65)mg/L、3.50(3.24~3.84)mg/L、2.90(2.62~3.22)mg/L、2.33(2.10~2.50)mg/L和2.15(1.98~2.32)mg/L,对幼虫4h的100%杀灭的质量浓度为3.5mg/L,对包囊6h的100%杀灭质量浓度为3.5mg/L。结果表明,丁香酚是一种具有较好开发前景的杀多子小瓜虫药物。     

丁香酚在生物质半焦催化下的转化行为

以不同热解温度下制备的生物质半焦作为催化剂,在二段固定床反应器中考察木质素模型化合物(丁香酚)的转化行为,利用气相色谱质谱仪分析液体产物的成分及含量,进而考察催化反应过程中的转化路径;通过对催化反应前后的半焦结构表征,探究其结构变化对催化作用的影响。结果表明,热解温度400℃时制备的半焦(400BC)能够显著促进丁香酚向异丁香酚转化,其相对含量占热解产物的66.7%,而600℃的半焦(600BC)催化效果明显较弱。通过X射线光电子能谱和傅里叶变换红外光谱表征分析发现:400BC表面含氧官能团—OH和—COO含量高于600BC,表明半焦表面含氧官能团对丁香酚异构化反应起重要作用,且—OH的催化效果优于—COO。拉曼光谱分析则表明:生物质半焦中小芳环结构与大芳环结构I(GR+VL+VR)/ID比值从400BC的1.64下降到600BC的1.46,且催化反应后其比值进一步变小,说明半焦炭结构中的小芳环具有一定的催化活性,随着半焦制备温度的升高及催化反应的进行,半焦中小芳环逐级向大芳环转化,石墨化程度增大,从而导致活性降低。此外,笔者构建出生物质半焦对丁香酚的催化机理,即半焦表面含氧官能团与丁香酚中羟基/苯环形成氢键,以及半焦炭结构中小芳环与丁香酚苯环通过π-π堆积效应相互作用。     

丁香微乳的质量控制试验

为了建立丁香微乳的质量控制标准,用薄层色谱法对制剂中丁香进行定性鉴别,采用高效液相色谱法(HLPC)测定丁香酚含量,色谱柱为Welchrom C18(4.6 nm×250 nm, 5μm),流动相为甲醇-水(55∶45),检测波长为282 nm。结果显示,丁香微乳薄层色谱中,在与对照药材或丁香酚对照品相应的位置上,显示相同颜色的荧光斑点,阴性对照无干扰;HPLC测定丁香酚含量的线性方程为y=22 545 602.597 4x+30 256.800 0,丁香酚在0.011 0～0.066 0 mg/mL范围内与峰面积有良好线性关系(r=1.000 0),平均回收率为100.60%,RSD为0.99%。结果表明该方法简便易行,专属性强,重复性好,可用于丁香微乳的质量控制。     

供水及丁香酚对间作小麦蚕豆生长速率及籽粒产量的影响

为了寻求人工调控存在化感物质间作群体的理论依据,通过盆栽试验,探讨不同供水水平下(田间持水量的75%、60%和45%),小麦根系分泌物丁香酚对单作和间作蚕豆、小麦生长速率(Crop Growth Rate,CGR)及籽粒产量的影响。结果表明:在蚕豆苗期-始花期、结荚-成熟期2个生育阶段,丁香酚对蚕豆生长速率整体表现为抑制作用,但结荚-成熟期75%供水水平下的单作、60%供水水平下的间作除外,增加供水缓解了单作蚕豆的抑制作用、加剧了间作蚕豆的抑制作用,间作模式可缓解抑制;自苗期以后,丁香酚对小麦生长速率表现为抑制作用,且增加供水亦不能缓解抑制,但在开花-成熟期间作模式可以缓解抑制。在同等供水水平下,间作籽粒产量与单作籽粒产量的加权平均相比增加了24.92%-52.74%。丁香酚除对45%供水水平下小麦籽粒产量有化感促进作用以外,对两种作物的其他处理均呈现化感抑制作用。间作可弱化丁香酚对小麦、蚕豆籽粒产量的化感作用。     

Acute Toxicity of Aspirin Eugenol Ester on Rats

The acute toxicity study was carried out by intragastric administration in rats to evaluate the toxic characteristics of aspirin eugenol ester (AEE) and target organs and fully analyze the reason of death rats. The experiment was designed in accordance with the method provided by the Kärber arithmetic method. At first, 50 rats (half male and half female)were divided into 5 groups to calculate LD₁₀₀ and LD₀. According to the pre-test results, different doses of AEE (2.62,3.25,4.03,5.00,6.20,7.69 and 9.53 g/kg) and control group of 0.5% CMC-Na were orally administered to 80 rats, half male and half female, divided into 8 groups. After treatment, clinical signs of rats and the change of body weights were observed and recorded. The microscopic pathology of mild damages on organs was conducted. 14 days after adminstration, the death time and total deaths of rats were recorded, and the LD₅₀ and 95% confidence interual of AEE were calculated according to Kärber. Organs were fixed with 10% formaldehyde solution at the end of the experiment. The LD₅₀ of AEE in rats was 5.95 g/kg upon oral administration and its 95% confidence interval calculation was 5.30 to 6.68 g/kg. The death time of rats were centralized at 48 to 96 h after exposing to AEE more than 4.03 g/kg by the analysis of the cumulative mortality-time of AEE in each group. Significant decreases in body weights were noted after treatment of AEE for 3 days, after that body weights gradually grew and recovered at the 5th day. Remarkable damages on livers, kidney and gastrointestinal tract were found at AEE dosage of more than 5.00 g/kg. From the obtained value of LD₅₀>5.00 g/kg, AEE was classified as practically non-toxic compound according to WHO. The target organs of AEE were liver, kidney and gastrointestinal tract.     

一例利用丁香酚水溶性制剂开展的史氏鲟取卵手术

丁香酚是4-烯丙基-2-甲氧基苯酚的通用名称。主要存在于丁香罗勒（Oci-mum gratissimum L）的油内及樟属肉桂叶的油内，是多种芳香油的成分，其中尤以丁香油、桂叶油、罗勒油、月桂油含量最多。研究表明，丁香酚药理作用广泛，具有麻醉、松弛肠和子宫平滑肌、抗炎抗过敏、解热、松弛血管、抗氧化、抗细胞毒、抗基因突变、抗细菌真菌、驱虫、降低体温、抑制血小板凝集、抗氧化、抗缺氧、促进药物透皮吸收等作用。