木薯蛋白激酶MeSnRK2.12与转录因子MebHLH1的互作鉴定及其表达分析

蛋白激酶SnRK2s (Sucrose Non-fermenting Related Protein Kinase 2)是植物抗逆境机制中的关键组分。木薯是全球重要的食品和工业作物,具有高淀粉累积和耐逆境的特点。迄今对木薯MeSnRK2家族成员参与逆境下淀粉合成调控的内在机制尚不清楚。本文围绕SnRK2家族受ABA微弱诱导的成员MeSnRK2.12展开研究,先对其进行生物信息学分析后发现其启动子区分布逆境响应元件:干旱胁迫MBS和ABA应答ABRE等顺式作用元件,且其氨基酸序列与AtSnRK2.8和OsSAPK1/2高度同源。ABA和PEG6000处理木薯SC8植株后发现, MeSnRK2.12可以在2 h内快速响应ABA和PEG6000处理,其转录活性在根中被抑制;在茎中被诱导上调,最高值分别为对照的15.0倍和8.0倍;在叶中也呈现上调趋势,但程度低于茎中。亚细胞定位试验结果显示MeSnRK2.12分布于细胞质和细胞核,利用酵母双杂交和双分子荧光互补(BiFC)试验均验证了MeSnRK2.12和转录因子MebHLH1间存在互作,且前期研究发现MebHLH1可以上调木薯蔗糖合酶基因M...     

狮头鹅MAP2K1基因SNP位点筛查及生物信息学分析

MAP2K1基因属于GnRH信号通路且与哺乳动物的卵泡发育紧密相关。为研究MAP2K1基因在狮头鹅上的基因多态性，以200羽狮头鹅为试验对象，利用DNA池结合PCR产物直接测序法，筛选出SNP位点并进行生物信息学分析。检测结果表明，在狮头鹅群体中发现1个SNP位点，为E3-63 A>G,存在3种基因型。生物信息学预测显示，MAP2K1基因突变前后编码氨基酸并未发生改变，属于不稳定不跨膜酸性亲水性蛋白，存在卷曲螺旋结构，无信号肽存在。亚细胞定位于细胞核、细胞质、细胞支架的概率分别为60.9%、30.4%、8.7%,主要在细胞核发挥生物学作用；有34个磷酸化位点，有1个N-糖基化位点，1个保守结构S＿TKc,蛋白二级结构主要由α螺旋和无规则卷曲组成。MAP2K1基因突变前后mRNA的最小自由能，质心发生二级结构，含有假结的mRNA二级结构、折叠结构、MaxExpect结果、点-括号结果、最小自由能、mRNA结构的热力学集合、质心结构所形成的山地图发生改变，且自由能上升，结构稳定性变弱。从狮头鹅MAP2K1基因的11个外显子上检测出1个SNP位点，MAP2K1基因突变前后改变mRNA二...     

饲用五环三萜提取物的致突变试验北大核心

试验旨在通过鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验(Ames试验)、小鼠骨髓细胞微核和精子畸变试验,评价五环三萜提取物作为饲料添加剂是否具有潜在的致突变性。Ames试验中受试物剂量组为0.008、0.040、0.200、1.000、5.000 mg/皿,另设阴性对照(灭菌水、DMSO)及阳性对照组,每个处理分别设有代谢活化系统(+S9)和无代谢活化系统(-S9)两个系列,测定试验菌的回变菌落数。小鼠骨髓细胞微核试验中受试物剂量组采用1.25、2.50、5.00 g/kg灌胃给药,并设阳性对照(环磷酰胺)及阴性对照(1%羧甲基纤维素液),共给药2次,每次间隔24 h,测定小鼠骨髓细胞微核率。精子畸变试验中受试物剂量组采用1.25、2.50、5.00 g/kg灌胃给药,设阳性对照(环磷酰胺)及阴性对照(1%羧甲基纤维素液),共给药5次每次间隔24 h,于第1次给药5周后处死小鼠,统计精子畸形率和畸形种类。结果显示:不同剂量组与对照组相比,Ame试验中平均回变菌落数均在溶剂组2倍以内,无剂量-反应关系;骨髓细胞微核率和精子畸变率均无显著影响(P>0.05);致突变试验结果均为阴性。研究表明,受试物五环三萜提取物不具有致突变作用。     

江苏省大豆上一种新粉虱传病毒的分子鉴定及系统进化分析

2019年在对江苏大豆上病毒病进行调查时，发现徐州和淮安大豆田间出现一种表现叶片黄化、花叶症状的病毒病，为明确其伴随病毒种类，对田间采集的70份疑似病样进行分子检测和鉴定，结果在利用香石竹潜隐病毒属(Carlavirus)通用引物检测时发现，70份疑似病样中有15份样品扩增到800 bp左右的目的片段，序列测定后BLAST分析结果显示，其与一种粉虱传病毒——豇豆轻斑驳病毒CpMMV(cowpea mild mottle virus, CpMMV)的同源性最高，暗示了其可能是CpMMV的一个分离物。针对CpMMV编码的CP基因设计特异性引物，检测结果显示15份阳性样品均扩增到目的片段，对获得的CP基因片段进行克隆测序，发现其序列全长867 bp,编码分子量约为32ku的蛋白；序列聚类分析结果显示，其与已报道的CpMMV分离物有较高的同源性，并聚类到同一个大的分支，其中与安徽、海南等地分离物相对近缘，聚在同一个小分支。这些结果表明江苏大豆存在豇豆轻斑驳病毒的侵染危害，生产上需要密切关注。     

绿豆种子组织培养的几种灭菌方法

组织培养的关键是对外植体灭菌，目前效果最佳的灭菌剂氯化汞属于剧毒试剂，对环境及人体均有危害。为探究更加安全有效的灭菌方式，本研究以绿豆为试验材料，以75%乙醇+30%次氯酸钠联合灭菌、4%过碳酸钠、氯气3种灭菌处理方式搭配灭菌时间共8组处理，统计其萌发及污染情况，并在7 d时统计长势相关数据。另外，每组在接种3 d时制备外植体转接至分化培养基，观察统计污染及丛生芽状况，根据数据分析结果选出最优灭菌剂及灭菌时间。结果表明，75%乙醇30 s+30%次氯酸钠30 min处理下其污染率为4%,丛生芽分化率为82%,生长速率与生长状况良好。因此，该方法最适合于绿豆组织培养的种子灭菌，有利于愈伤组织的诱导。     

营养配施对木薯生长及养分吸收的影响

为了探讨氮钾钙铁锌5种营养元素及其交互作用对木薯产量、养分含量及5种营养元素吸收转运相关基因表达量的影响，以氢氰酸含量较低的食用型木薯品种SC9为试验材料，在盆栽与田间2种栽培条件下，设计N、K、Ca、Fe、Zn五因素两水平施肥配比的正交试验。通过比较各处理间木薯产量、叶绿素含量、大中微量元素累积量的差异及5种元素吸收转运相关基因表达量的变化，筛选出木薯N、K、Ca、Fe、Zn的最佳配施范围。结果显示：综合盆栽与大田下T5(N₁K₁Ca₂Zn₁Fe₂)处理均能获得较高木薯产量。其中在盆栽条件下高氮能够促进叶绿素的合成，但施用高水平的大量元素会显著降低木薯产量，施用高水平的中微量元素则能提升木薯产量。在田间条件下高水平氮素既利于叶绿素的合成又能提高产量。块根养分累积量方面，盆栽下低氮、低钾处理的块根6种元素(N、P、K、Ca、Fe、Mg)平均累积量显著高于高氮、高钾处理；高钙处理的块根3种元素(P、K、Zn)平均累积量显著高于低钙处理；高锌处理的块根4种元素(N、K、Ca、Zn)...