意大利蜜蜂幼虫肠道在球囊菌侵染前期的 差异表达microRNA及其调控网络

【目的】 微小RNA（microRNA,miRNA）是一类重要的基因表达调控因子,可影响宿主与病原间的互作过程。蜜蜂球囊菌（Ascosphaera apis）是一种特异性侵染蜜蜂幼虫的致死性真菌病原。本研究旨在对意大利蜜蜂（Apis mellifera ligustica,简称意蜂）幼虫肠道在球囊菌胁迫前期的差异表达miRNA（differentially expressed miRNA,DEmiRNA）及其靶基因进行深入分析,在miRNA组学水平探究意蜂幼虫在球囊菌侵染前期的胁迫应答,并通过构建显著DEmiRNA的调控网络筛选出与宿主应答相关的关键miRNA。【方法】 利用small RNA-seq（sRNA-seq）技术对正常及球囊菌侵染的意蜂4日龄幼虫肠道（AmCK和AmT）进行高通量测序,首先对原始数据进行质控和评估,随后将过滤后的数据与西方蜜蜂（Apis mellifera）参考基因组进行比对;将比对上的序列标签（tags）注释到miRBase数据库,得出已知miRNA的表达量;通过TPM（tags per million）算法对各样本中miRNA的表达量进行归一化处理,以|log₂ fold change|≥1且P≤0.05作为标准筛选得到显著DEmiRNA;利用TargetFinder 软件预测显著DEmiRNA的靶基因,并对其进行GO和KEGG代谢通路（pathway）富集分析。利用Cytoscape软件对miRNA-mRNA调控网络进行可视化。最后,利用茎环反转录PCR（Stem-loop RT-PCR）和荧光定量PCR（qPCR）验证测序数据的可靠性。【结果】 AmCK和AmT样品的测序分别得到13 553 302和10 777 534条原始读段（raw reads）,经严格过滤后得到的有效读段（clean reads）数分别为13 186 921和10 480 913条。各样品的生物学重复间的Pearson相关性系数分别在0.9822和0.9508以上。共有10个显著DEmiRNA,包括4个上调miRNA和6个下调miRNA。显著DEmiRNA在AmT的整体表达水平低于AmCK。10个显著DEmiRNA可靶向结合3 788个靶基因,其中上调miRNA的1 240个靶基因可注释到GO数据库中的39个GO条目,主要富集在结合、细胞进程、代谢进程和应激反应等;下调miRNA的749个靶基因可注释到34个GO条目,主要富集在细胞进程、结合、代谢进程和应激反应等。KEGG数据库注释结果显示,上调miRNA和下调miRNA的靶基因分别注释到95和66条代谢通路,富集基因数最多的分别是Wnt信号通路、Hippo信号通路、光传导以及内吞作用、磷脂酰肌醇信号系统、嘌呤代谢。对于上调和下调miRNA,分别有31和52个靶基因注释到内吞作用,15和7个靶基因注释到泛素介导的蛋白水解,11和5个靶基因注释到Jak-STAT信号通路,1和3个靶基因注释到MAPK信号通路。显著DEmiRNA与靶mRNA之间形成复杂的调控网络,7个显著DEmiRNA靶向结合96个与Wnt信号通路相关的mRNA,8个显著DEmiRNA靶向结合55个与内吞作用相关的mRNA。Stem-loop RT-PCR和qPCR结果验证了测序数据的可靠性。【结论】 对意蜂幼虫肠道在球囊菌侵染前期的DEmiRNA及其靶基因进行预测和分析,并构建和分析了DEmiRNA-mRNA调控网络,研究结果提供了宿主miRNA的表达谱和差异表达信息,揭示了DEmiRNA通过调控细胞生命活动、新陈代谢以及部分细胞和体液免疫等生物学过程参与宿主的胁迫应答。miR-4331-y、miR-4968-y、miR-8440-y、novel-m0023-5p和novel-m0025-3p共同参与了宿主的Wnt信号通路和内吞作用的调控,可作为白垩病治疗的潜在分子靶标。     

毛泽东的社会主义经济建设思想

我国社会主义改造完成后,毛泽东关于在中国怎样建设、发展社会主义进行了大量的理论探索和实践创新,在经济方面提出了一系列有价值的思想,主要包括对我国社会主义发展阶段的分析和认识,把社会主义分为两个阶段、以苏为鉴,走自己的工业道路、利用商品生产发展社会主义、社会主义经济建设要依靠群众,以自力更生为主等观点。这些观点不仅在当时有重要的指导意义,在现阶段对我们社会主义现代化建设仍有积极的借鉴价值。     

新型氟苯尼考药丸的制备及其在大黄鱼体内的药代动力学分析

大黄鱼养殖业中存在因过量用药而造成环境污染严重及大黄鱼发病率和死亡率高等问题,以淀粉、壳聚糖和明胶三元复合物作为载体,以渔业中应用较多的广谱抗生素氟苯尼考为药物模型,制备了一种可生物降解并可定量给药的抗生素药丸。采用扫描电子显微镜、高效液相色谱法等手段对该药丸的物理特性、吸水性能、抑菌性能及药物残留量进行了检测。结果表明:所制备的载体和药丸具有一致的内部微观结构,多孔结构分布均匀,孔与孔之间具有良好的连通性,有利于药物的流通和释放。体外抑菌试验结果显示,其抑菌能力与氟苯尼考的含量成正相关。经口服药丸后,氟苯尼考在大黄鱼血液、肝脏和肌肉中的药代动力学符合一级吸收二室开放模型的特征,并可在血液、肝脏和肌肉中缓慢消解。     

水稻抗稻瘟病基因的研究进展

稻瘟病是一类由真菌引起的水稻病害,危害极大。水稻中具有抑制稻瘟病菌的功能基因,因此,对此基因进行深入研究具有重要的意义。文中综述了水稻中抗稻瘟病基因的研究概况,阐述了以分子标记定位基因在基因研究以及利用中的作用,详细介绍了近年来被定位甚至克隆的抗稻瘟病基因,总结了这些抗性基因及其产物的相似点和不同之处。     

阿维菌素对南美白对虾的急性毒性试验

通过48h的急性毒性试验验证在水体中施用不同浓度的阿维菌素导致南美白对虾的中毒和死亡情况,试验结果表明：在水温25.0～26.5℃、pH值7.50～7.82、溶解氧含量为7.82～7.99mg/L、氨氮0.020～0.359mg/L、盐度7.93～8.08的水体环境中,使用阿维菌素后的48h内对体长10.1～11.9cm、体重9.7～11.8g的南美白对虾最低致死浓度为3.00×10-4～6.00×10……-4mg/L,南美白对虾的致死时间随着阿维菌素浓度的增加而缩短,南美白对虾对阿维菌素中毒症状表现为麻痹、昏迷、死亡。     

利用稻米垩白度分析软件测量叶片相对病斑面积

【目的】提出一种利用稻米垩白度分析软件Chalkiness 1.0测量衡量植物叶片病害综合指标之一叶 片相对病斑面积（RLA）的方法。【方法】通过扫描或拍照获得病害叶片的数字图像;然后利用图像处理软件（如Photoshop）对图像进行处理,最重要的是用肉眼识别病斑并用“画笔工具”涂黑,使叶片中的病斑明晰 化;最后利用Chalkiness 1.0计算出图像中的RLA。【结果】用本方法对稻瘟病叶上病斑的相对面积进行测量。比较5次重复测量的结果,发现该方法重复性好,误差小。【结论】该方法简单、快速、准确,具有广阔的应用前景。     

不同类型水稻亲本的抽穗期遗传关系研究

选用5个籼稻、2个粳稻和1个爪畦稻共8个亲本按半双列杂交配制28个组合．研究分析了亲本及组合抽穗期的特性及遗传关系,发现抽穗期的主要表现可归纳为三种类型：明显的显性早熟、部分迟熟显性和超显性迟熟,这些遗传表现可能分别是显性早熟基因、迟熟基因和不等位的抽穗期迟熟基因或感光基因互作而引起的。在杂交稻育种上,通过选择适宜亲本不仅可以培育早熟杂交稻组合,而且可以避免杂交稻组合抽穗期超亲问题,特别是籼粳亚种间组合抽穗期超亲问题。     

感染意大利蜜蜂工蜂的东方蜜蜂微孢子虫及其纯化孢子的高表达基因分析

为探究东方蜜蜂微孢子虫(Nosema ceranae)在侵染意大利蜜蜂(Aips mellifera ligustica)过程的基因表达谱及高表基因(highly expressed gene,HEG)的功能,本研究利用RNA-seq技术对N.ceranae感染的意蜂工蜂7和10 d工蜂中肠(NcT1和NcT2)及其纯化孢子(NcCK)进行高通量测序。根据FPKM值≧15的标准筛选出各组的HEG并进行Venn分析,进而通过GO分类和KEGG代谢通路富集分析对各组的共有HEG进行功能注释。测序得到的原始读段经严格质控后分别得到5 816 465、28 501 225和210 824 312条高质量的有效读段,分别从NcT1、NcT2和NcCK中筛选出1 263、1 233和1 511个HEG,其中有1 079个基因在各组均高量表达,分别有15和7个基因仅在NcT1和NcT2中高量表达。GO分类结果显示,共有HEG涉及9个生物学进程相关条目,10个细胞组分相关条目,以及5个分子功能相关条目。KEGG代谢通路富集分析结果表明,共有HEG富集在218条代谢通路,富集基因数最多的是核糖体、Epstein-Barr病毒感染、细胞周期、内质网蛋白加工和真菌核糖体生物合成。深入分析结果显示分别有5和5个共有HEG富集在MAPK和cAMP信号通路,表明此2条信号通路及富集的HEG可能在N.ceranae的环境应激和侵染过程中发挥重要作用。研究结果提供了N.ceranae感染意蜂工蜂过程中的基因表达谱,揭示了HEG的作用,为深入解析N.ceranae的侵染机制打下了初步基础。     

滨湖旅游区生态旅游循环经济发展模式探析——基于云南省抚仙湖禄充景区的个案研究

指出生态旅游循环经济应该采取＂分类指导、逐步推进＂的战略来研究各类景区的生态旅游循环经济发展模式。以云南省抚仙湖禄充景区为例,在对澄江旅游度假区禄充景区进行个案研究的基础上,总结了滨湖景区生态旅游循环经济发展的一般模式,强调滨湖景区生态旅游循环经济发展模式的构建应该坚持生态学的基本原理,以及再思考、减量化、再利用、再循环、再修复的＂5R＂原理,根据滨湖景区自身的特点和所处区域产业结构的实际,以污水处理和湖滨环境保护为中心,以绿色景区和绿色旅游社区建设为载体,考虑清洁生产、绿色消费、废弃物处理、生态补偿、产业耦合等相关要素,构建生态旅游循环经济模式,并采取切实措施,使之从理论走向实践,将是保证滨湖景区可持续发展的唯一选择     

鸡蛋期现货市场溢出效应与动态关联研究

为研究鸡蛋期现货市场关系,利用2013年11月-2017年6月国内鸡蛋期现货市场日度价格数据,通过BEKK-GARCH模型和DCC-MGARCH模型深入剖析了我国鸡蛋期现货市场间溢出效应和动态关联性。结果表明,从鸡蛋期现货市场间溢出效应来看,2市场间存在显著的均值溢出效应,相互之间存在较为显著的价格引导关系,且期货市场对现货市场的价格引导关系更为显著,说明当前我国鸡蛋期货市场对现货市场具有较好的价格发现功能;除此之外,鸡蛋期现货市场间还存在显著的双向波动溢出效应;从鸡蛋期现货市场的动态关联性来看,2市场间的相关关系具有明显的时变特征,且整体表现为正相关。