猪链球菌Ide通用截短蛋白原核表达及纯化研究

为利用大肠埃希菌表达猪链球菌Ide通用截短蛋白,通过对Gen Bank公布的Ide S蛋白家族基因同源性分析,使用Primer 5.0软件设计一对特异性引物,以猪链球菌2型强毒株JZLQ全基因组为模板,采用PCR方法扩增Ide基因截短片段,经Bam HⅠ和HindⅢ双酶切后将目的片段分别克隆到p ET28a、p ET32a和p ET-sumo表达载体上,分别转化宿主菌E.coli BL21(DE3)。通过优化诱导温度及诱导剂IPTG浓度进行表达并对表达产物进行SDS-PAGE分析。结果显示,PCR扩增片段大小约为1200 bp,经双酶切和测序验证构建正确;三种重组表达载体转化大肠埃希菌后均有目的蛋白表达,但不同表达条件下目的蛋白表达量存在差异,其中p ET28a-Tr Ide重组表达载体用25℃诱导、IPTG终浓度为1 mmol/L时可实现重组蛋白的高效可溶性表达,为IdeSsuis蛋白在猪链球菌通用疫苗研发方面的研究奠定了基础。     

毛白杨埋棵连续育苗

<正> 毛白杨是我国特有的优良速生树种之一。但由于扦插难于生根,繁殖较慢。为提高苗木产量和质量,夏邑县王岳楼苗圃从1980年开始,采用了“埋棵连续育苗法”,效果很好,平均每年亩产3-4米高的优良苗木4,000株左右。现将育苗方法简介于下。一、圃地选择与整地作床圃地应选地势平坦,排灌方便,土壤肥沃,病虫害少的沙壤土或壤土。盐碱地和粘重地不宜选用。于秋末冬初进行整地,耕地深30-40厘米,结合耕地每亩施优质农家肥8,000斤左右,碳酸氢铵50-80斤,并进行土壤处理。翌年3月上、中旬浅耕细耙,以备开沟作垄。3月中下     

我国动物防疫工作存在的主要问题及对策

改革开放以来，我国畜牧业有了巨大的发展。到2003年，我国的肉、蛋、奶产量分别达到6932．9万吨、2606．7万吨和1746．3万吨。肉类和禽蛋的总产量分别于1991年和1985年跃居世界第一，肉类人均占有量已超过世界平均水平，禽蛋人均占有量超过发达国家，长期以来困扰我国的畜产品供不应求问题已基本解决，畜牧业已由自我满足的数量型向质量效益型转变。     

我国面临周边国家和地区口蹄疫的严峻考验

近两年多来,口蹄疫大面积的暴发和流行常常是一波未平,一波又起.当韩国上上下下紧急动员正在对口蹄疫进行严密的封锁、扑杀之时,在亚洲的另一头又传来了蒙古国暴发口蹄疫的声音,继台湾、日本口蹄疫风波之后,在亚洲地区接连发生的几次口蹄疫事件,对我国的口蹄疫防治工作,不能不说是一个不小的考验.     

棉花早衰需综防

棉花早衰是导致棉花产量大幅度下降的重要因素之一,尤其是2004年棉花早衰已达相当严重的程度。在很多地方棉农对早衰的认识不足或不正确,他们片面认为棉花早衰就是后期营养缺乏导致的,只要在棉花生长后期喷几遍叶面肥就能防治。根据笔者的经验和调查,导致棉花早衰有几个原因,只有根据早衰原因采取相应的综合防治措施,才能使棉花青枝绿叶开白花,从而提高品质、增产增收。一、棉花早衰的原因分析:第一,品种不抗早衰。近年来棉花品种繁多,有些品种老化、退化,有些品种本身抗病性和抗早衰性差,这是导致棉花早衰的一个基础因素。第二,土壤营养失…     

"一穴三株"简化栽 中低棉田效益增

近几年示范推广的稀植简化栽培,亩栽1200~1800株,有的低到900株,这种栽培模式仅限于特高水肥力地块,有一定的局限性,而传统的常规整枝栽培费工、费力、效益低。现向广大棉农介绍一种新型高效棉花种植模式——“一穴三株”简化栽培技术,适宜在中低肥力棉田进行免整枝简化栽培,适     

便携式热收缩带固定片快速安装装置的研制

针对现有油气管道热收缩带防腐补口施工中人工火把安装固定片存在的人为因素影响大、质量差异大、效率低等问题,研制了一种便携式热收缩带固定片快速安装装置,其可实现热收缩带固定片的机械化快速安装。试验结果表明:便携式热收缩带固定片快速安装装置结构合理、操作简单、方便易携;安装质量好、效率高、用时短,可满足油气管道机械化防腐补口流水作业要求;可适应-40℃极低温施工环境,有效保证高寒地区油气管道防腐补口的施工质量。(图6,表1,参23)     

犬新孢子虫巨噬细胞转移抑制因子生物学特性鉴定

目的 通过原核系统表达犬新孢子虫巨噬细胞转移抑制因子(NcMIF),并对该蛋白的免疫调节作用进行分析。方法 通过GenBank发表的序列,利用分子生物学软件设计了一对特异性引物,通过RT-PCR方法扩增出NcMIF全基因,经测序分析后,将NcMIF亚克隆到原核表达载体pET28a(+),然后将鉴定为阳性的重组质粒转化到E. coli BL21(DE3)中用IPTG进行诱导表达。利用HPLC对可溶性表达的重组NcMIF蛋白进行纯化,去除内毒素,最后对NcMIF的免疫调节作用进行鉴定。结果 NcMIF没有明显的抗糖皮质激素的免疫抑制作用,也没有上调巨噬细胞TNF-α和NO表达量的作用。结论 实现了NcMIF在大肠杆菌系统中的可溶性表达并对其功能进行了鉴定,为进一步探究NcMIF生物学功能及其MIF在宿主免疫调节中的作用奠定基础。     

玉米耐密品种不同密度栽培试验

通过对适合密植的玉米品种进行试验、研究,筛选出适合我市进行密植通透栽培的玉米品种,提高玉米产量和品质。为改变我市"玉米海"的生产模式,我们实施了本项试验。     

中国畜禽重大疫病防治的数字化监控体系

作者借鉴世界上发达国家多年来采用的动物疫病监控及预警预报方法和经验,通过对中国典型疫病的跟踪调查,设计了畜禽重大疫病防治监控系统。该系统已实现将属性数据与G IS有机结合,可直观了解疫情发生地域分布;通过疫情快报、突发重大疫情统计等专题图制作,为决策部门制定防治措施和应对政策提供依据。