高产红曲色素低产桔霉素紫色红曲霉转化子筛选与代谢产物分析

以红曲米中筛选到的紫色红曲霉Mp-41菌株为出发菌株,利用农杆菌介导T-DNA插入转化技术,构建了含有983株红曲霉转化子的T-DNA插入转化子库。用紫外-可见光扫描方法等从转化子库中筛选出10株红曲色素色价稳定高于原始Mp-41菌株的转化子,薄层层析结合高效液相色谱(HPLC)技术分析了10株转化子发酵液中桔霉素的含量;其中,转化子62的红曲色素色价较高,为95.4 U/m L,是原始Mp-41菌株(色素色价50.7 U/m L)的1.88倍,桔霉素含量稳定低于原始Mp-41菌株。以原始Mp-41菌株和转化子62为试验材料,进行5 L发酵罐发酵并定时取样,HPLC等方法分析生长量和发酵液中各种代谢产物的含量。结果显示,转化子62生长速度稍快于原始Mp-41菌株,红曲色素色价和莫纳可林K的含量分别为120.76 U/m L,63.72 mg/L,是原始Mp-41菌株的1.5倍和1.21倍;而桔霉素含量为1.172 4 mg/L,是原始Mp-41菌株的35.08%。因此,利用T-DNA插入的方法对红曲霉进行育种,能产生稳定的遗传变化,在红曲霉资源的利用上有一定潜力。     

鞍山、大连地区兽用抗生素生产经营使用情况的调研

抗生素滥用已成为目前世界性难题,今年世界卫生日的主题为抵御耐药性:今天不采取行动,明天就无药可用。抗生素在畜牧养殖业的使用引起了社会的广泛关注,中国社科院农村发展研究所的一项调查报告披露,50%的养殖户存在抗生素滥用的情况。据北京大学临床药理研究所调查推算,     

菌丝霉素分泌型丁酸梭菌防治罗非鱼链球菌病的应用研究

为解决罗非鱼链球菌感染难题,本研究在抗菌肽菌丝霉素分泌型丁酸梭菌制剂的基础上,对其进行了抑菌活性、稳定性和罗非鱼养殖应用研究。结果发现:表达产物菌丝霉素对常见致病菌如大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌和猪链球菌均有较好的抑菌活性。选用米糠作为菌丝霉素分泌型丁酸梭菌的保护剂载体,此制剂可在常温保存一年。通过上述的应用基础试验,初步建立一套菌丝霉素分泌型丁酸梭菌制剂养殖应用方案,此方案可显著降低罗非鱼链球菌病发病率58.6%以上。本研究为丁酸梭菌制剂在防治罗非鱼链球菌病应用方面提供了参考,此制剂有望替代抗生素,促进罗非鱼养殖业的持续健康发展。     

大观霉素间接竞争ELISA的建立

本研究的目的是建立大观霉素的间接竞争性ELISA(icELISA),用于动物源性食品的检测。在优化的条件下,建立了大观霉素icELISA的标准曲线,半抑制浓度IC50=1.78ng/mL。多克隆抗体对大观霉素的特异性较强,与其他氨基糖苷类化合物有微小的交叉。分别对20份空白的牛奶、猪肉、鸡肉进行检测,确定这些样本中大观霉素的检测限分别是4.8、9.3、10.0μg/kg。在样本中添加不同浓度的大观霉素,添加回收率的范围为77.1%~116.0%,变异系数为4.6%~9.7%;ELISA和GC/MS两种方法分析结果无显著性差异(P0.05)。结果表明,本研究成功建立了大观霉素的icELISA,用于检测牛奶、猪肉、鸡肉中大观霉素,准确度和精密度均满足兽药残留检测的要求。     

规模化养鸡场A型产气荚膜梭菌的分离鉴定及其对海南霉素敏感性的测定

为探究海南霉素对产气荚膜梭菌的敏感性,在某大型养鸡场采集了209份鸡肠道样本,采用选择性培养基和MALDI-TOF质谱仪微生物鉴定仪鉴定,并对鉴定的菌株进行分型。采用琼脂稀释法测定了海南霉素、恩拉霉素、盐霉素、丁酸甘油酯对临床分离的产气荚膜梭菌的抗菌活性,以期为当前限抗禁抗后养殖场选择合适的药物控制产气荚膜梭菌提供理论依据。试验结果表明：共分离出61株产气荚膜梭菌,分离率为29.2%;通过多重PCR对所分离的产气荚膜梭菌进行分型,结果分离株均为A型产气荚膜梭菌;4种药物均有不同程度的抑菌效果,其中海南霉素与恩拉霉素对鸡源产气荚膜梭菌的抑菌效果最好,且MIC值范围均为0.004～0.06μg/mL。海南霉素具有很好的抗梭菌效果。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定猪牛组织中甲基盐霉素残留量

建立超高效液相色谱-串联质谱法测定猪牛组织中甲基盐霉素残留量。猪、牛组织中残留的甲基盐霉素,经乙腈溶液提取,硅胶固相萃取柱净化,超高效液相色谱-串联质谱法测定,外标法定量。甲基盐霉素在5 ng/mL～250 ng/mL的浓度范围内呈现良好的线性关系,甲基盐霉素在猪、牛肌肉、肝脏、肾脏、脂肪中的检测限均为2.5μg/kg,定量限均为5.0μg/kg,猪牛肌肉、肝脏、肾脏、脂肪中5.0 ng/g～100 ng/g添加浓度范围内的回收率均值为71.9%～88.4%,批内批间RSD值均<15%。     

大环内酯类药物对木糖葡萄球菌敏感菌株及其耐药菌株生物被膜形成的影响

为了探究大环内酯类药物泰乐菌素和阿奇霉素对木糖葡萄球菌敏感菌株及其耐药菌株生物被膜形成的影响,试验首先通过倍比稀释法测定两种药物对木糖葡萄球菌敏感菌株及其耐药菌株的最小抑菌浓度(MIC),然后利用结晶紫染色法考察木糖葡萄球菌敏感菌株及其耐药菌株生物被膜的形成能力,并测定细菌生长情况,最后考察两种药物浓度及药物孵育时间对生物被膜形成的影响。结果表明：木糖葡萄球菌耐药菌株生物被膜的形成能力弱于敏感菌株,木糖葡萄球菌敏感菌株与其耐药菌株的生长存在差异。0.312 5μg/mL的泰乐菌素和阿奇霉素对木糖葡萄球菌敏感菌株生物被膜的形成具有极显著抑制作用(P<0.01),对耐药菌株生物被膜形成的抑制作用不显著(P>0.05);25μg/mL的泰乐菌素和阿奇霉素对耐药菌株生物被膜的形成具有显著或极显著抑制作用(P<0.05或P<0.01)。随着药物孵育时间的延长,对生物被膜形成的抑制效果逐渐增强。说明大环内酯类药物泰乐菌素和阿奇霉素在一定程度上能抑制木糖葡萄球菌敏感菌株及其耐药菌株生物被膜的形成且具有时间依赖性。     

吸水链霉菌井冈霉素发酵中氮源及碳氮比的优选

井冈霉素与日本报道的有效霉素 (ｖａｌｉ ｄａｍｙｃｉｎｓ)相似 ,属氨基环醇类抗生素 ,是一种抗水稻纹枯病菌 (Ｐｅｌｌｉｃｕｌａｒｉａｓａｓａｋｉｉ)的农用抗生素 ,具有药效高、无毒副作用、持效时间长的特点 ,是一种重要的农用抗生素。从 2 0世纪 70年代问世以来 ,2 0多年经久不衰 ,已成为家喻户晓的理想生物农药 ,对我国水稻高产、稳产起了重要的作用。随着人们对环境保护的日益重视 ,微生物农药显示了广阔的应用前景。目前 ,在水稻的主要病害 (水稻纹枯病 )防治中 ,几乎 90 %以上是采用井冈霉素[1～ 4] 。为提高效价 ,进一步降低成…     

欧盟修订13种低风险有效成分的登记资料要求

最近,欧盟对13种天然低风险有效成分农药的登记资料要求进行了修订,这意味着欧洲食品安全局(EFSA)完成了这些有效成分的同行评审。根据低风险物质的快速评审程序,这些有效成分均在2009年获得重新登记,程序同时允许EFSA在稍晚些时候完成他们的同行评审。     

畜禽动物中阿奇霉素兽残检测的研究现状及发展趋势探讨

如今,食品安全问题越来越受到人们的关注,特别是近年来,我国出现了各类食品安全问题,我国已经将治理食品安全问题作为重要的方针.现在禽畜动物交易越来越频繁,但是禽畜动物安全问题频出,阿奇霉素是在肉类食物中残留最多的药物,所以,做好阿奇霉素的检测工作相当重要.本文通过分析禽畜动物中阿奇霉素的检测技术,并采取措施完善检测的方案,从而为我国质监部门的工作提供更加完善的方法.