条石鲷(Oplegnathus fasciatus)源美人鱼发光杆菌杀鱼亚种(Photobacterium damselae subsp. piscicida)的分离鉴定

2013年浙江省舟山市某网箱养殖条石鲷(Oplegnathus fasciatus)暴发了一种严重的疾病,病鱼主要症状为脾、肾出现1-2 mm的白色类结节.从患病鱼内脏处分离得到1株优势菌OF-1,经人工感染实验证实为此次引起条石鲷死亡的致病菌,半数致死量为5.93×104 CFU/g.形态学观察结果显示,菌株OF-1为革兰氏阴性、短杆状,在TCBS培养基上不生长.API 20E细菌鉴定系统、16S rRNA系统发育树分析结果证实,该菌株为美人鱼发光杆菌杀鱼亚种(Photobacterium damselae subsp.piscicida).该菌对庆大霉素、青霉素、氟哌酸、氧氟沙星、氨苄青霉素等药物高度敏感,对红霉素、链霉素、卡那霉素、苯唑青霉素等药物具有抗性.     

南海北部海域大眼鲷资源的时空异质性

研究经济鱼类的资源密度重心及其时空异质性有助于深入了解其渔场形成过程,并为其渔业资源的可持续利用和科学管理提供参考依据。本研究基于2009—2014年南海捕捞信息网络中的南海北部海域底拖网渔业生产数据,运用重心分布、自举法(Bootstrap)和地统计等方法研究了大眼鲷资源密度重心分布和时空异质性。结果发现,2009—2014年大眼鲷资源密度总体上呈逐年降低的趋势,且差异极显著,最高值为2012年的(26.69±7.34) g/(h·kW·nets)。不同年份大眼鲷资源密度重心均分布在南海北部50～100 m等深线间,资源密度重心年际分布差异不显著,主要集中于调查海域中部。大眼鲷资源密度在70～90 km的尺度范围内呈强烈的空间自相关格局及良好的空间结构性(块金系数25%),主要受环境因素的作用;在90 km以上的尺度范围,空间自相关性较弱,受随机成分影响较大。     

鱼类标志放流步骤的优选及其在黄鳍棘鲷中的应用

鱼类标志放流过程中,关键细节缺失参考依据易导致标志鱼因标志操作不规范而死亡(或导致标志脱落),从而影响基于标志群体抽样的增殖效果评估、放流群体时空格局等后续研究的准确性。本研究以南海重要增殖放流鱼类黄鳍棘鲷为对象,采用多因素方差分析对比了标志过程中关键操作(标志前麻醉与否、标志部位、植入角度)的生长率、存活率、标志保留率的差异。40 d的实验结果显示,不同标志操作对鱼的生长无显著影响。麻醉与否对实验鱼的存活率影响极显著。标志部位、植入角度对标志保留率影响显著。优选出的最佳标志操作组合为麻醉,将T型标志以45°植入背鳍基前部肌肉(存活率95.56%、标志保留率98.89%)。综合以往资料,本研究提出了黄鳍棘鲷[体长(10.05±0.39)cm]T型标志操作规范建议,为今后科学开展标志放流提供参考依据:①标志前暂养,将待标志鱼放入培育池内暂养3 d或以上,标志前24 h停食;②材料消毒,将T型标志和标志枪针头用75%酒精浸泡消毒5 min;③麻醉,用30 mg/L丁香酚溶液(或MS-222麻醉剂)麻醉至鱼体腹部向上翻转时,迅速进行标志;④标志,用标志枪针头拨去标志部位的1个鳞片,然后针头与鱼体呈45°将T型标志植入背鳍基前部肌肉;⑤鱼体消毒,将标志鱼放入含有5%聚维酮碘(或高锰酸钾)的海水溶液中药浴消毒30 min;⑥标志后暂养,消毒后的标志鱼人工暂养7 d后可放流。     

条石鲷大棚温室越冬试验

为研究条石鲷(Oplegnathus fasciatus Temminck et Schlegel)的越冬技术,在室外地埋式水泥池进行了一龄、二龄条石鲷的越冬试验。结果表明,采用双层中空PC阳光板保温,越冬期间越冬池的水温可维持在10 ℃以上；条石鲷的越冬成活率在90 %以上,最高达99.7 %；条石鲷的平均体质量有所增加,平均增重率最高14.28 %,最低6.09 %。通过试验还发现,条石鲷的日平均摄食率与日平均水温存在相关关系,日平均摄食率随日平均水温的上升而提高。     

饲料中n-3高度不饱和脂肪酸含量对花尾胡椒鲷亲鱼组织的脂质含量和脂肪酸构成的影响

以n-3高度不饱和脂肪酸（n-3HUFA）含量（w）为1．12％、2．40％、3．70％、5．85％的4种配合饲料或冰鲜杂鱼喂养花尾胡椒鲷Plectorhynchus cinctus雌亲鱼1周年，研究饲料中n-3 HUFA含量对性腺、肌肉和肝胰脏等组织的脂质含量和脂肪酸构成的影响．结果显示，各组织中的脂质含量在各投喂组之间无显著差异（P〉0．05）．然而，在1．12％、2．40％和3．70％（w）投喂组，其性腺和肌肉脂质中18：2n-6、二十碳五烯酸（EPA）、n-3多不饱和脂肪酸（n-3 PUFA）、n-3 HUFA的含量与饲料中相应脂肪酸的含量存在较明显的平行变化趋势；在性腺脂质中，1．12％、2．40％、5．85％（w）投喂组的二十二碳六烯酸（DHA）和1．12％（w）投喂组的n-3 PUFA、n-3 HUFA的含量都显著低于冰鲜杂鱼投喂组（P〈0．05）；在1．12％、2.40％和3．70％（w）投喂组，上述3种组织中的n-3 PUFA、n-3 HUFA、DHA含量以及DHA／EPA比值都显著高于饲料中相应脂肪酸的含量和比值（P〈0．05）．结果表明，花尾胡椒鲷组织中的脂肪酸构成受饲料中n-3 HUFA含量影响，受影响的顺序是性腺〉肌肉〉肝胰脏；组织对n-3 PUFA、特别是DHA具有较强的选择性保留作用，说明这些脂肪酸在性腺发育成熟中具有重要的生理作用．     

中国养殖斑石鲷(Oplegnathus puncatus)上皮囊肿病的发现及显微观察

2015年,山东省某养殖场工厂化养殖的斑石鲷(Oplegnathus puncatus)幼鱼(全长为15 cm左右)因病陆续死亡,15d内累积死亡率达40％以上.现场调查发现,发病池水温为21℃,盐度为30.患病鱼群散开、不聚集.病鱼身体侧偏,活力差,常贴底或者贴壁,严重者随着水流漂流.病鱼呼吸困难,口部持续张开,鳃盖开合频繁,对投喂的食物无反应.但病鱼反应灵敏,难以捕捉.临床检查和剖检可见病鱼鳃表面覆盖着大量黏液,鳃丝有损伤,肠道无食物.取病鱼鳃丝制成水浸片,在光学显微镜下观察,鳃丝上可见到许多直径约为30-70 μm的囊肿物,外观圆形或卵圆形,呈浅黄棕色.在苏木精-伊红染色的石蜡切片中,病鱼次级鳃丝末端粘连,许多上皮细胞膨大呈囊肿状.囊肿嗜碱性,内部均质化.在扫描电子显微镜下观察,病鱼鳃丝呈棍棒化,鳃小片被大量黏液覆盖,表面光滑的囊肿细胞镶嵌其间.通过上述疾病现场调查、病鱼的临床检查、鳃组织的光学显微镜和扫描电子显微镜病理观察,可以初步确定该病为斑石鲷上皮囊肿病.这是上皮囊肿病在中国养殖斑石鲷中首次被发现和记载.     

斑石鲷低氧耐受能力及血液生理生化指标变化研究

为阐明斑石鲷(Oplegnathus punctatus)低氧耐受能力及低氧胁迫过程中血液生理生化指标的变化规律，本研究通过生理学和生态学方法，查明2种规格斑石鲷在临界氧分压(critical oxygen tension, Pcrit)和失去平衡点(loss equilibrium, LOE)时的溶解氧浓度，观察自然耗氧条件下其呼吸行为变化，分析低氧胁迫和恢复溶解氧过程中血液皮质醇和葡萄糖含量、血红蛋白(hemoglobin, Hb)浓度、红细胞(red blood cell, RBC)和白细胞(white blood cell, WBC)数目、红细胞积压(hematocrit, HCT)变化。结果显示，在水温(23.0±0.5)℃、氨氮浓度<0.5 mg/L、亚硝酸盐浓度0~0.05 mg/L、盐度为30、pH为7.80的条件下，200和50 g斑石鲷的Pcrit值分别为(4.05±0.09)和(3.15±0.12) mg/L，LOE值分别为(1.16±0.08)和(0.93±0.11) mg/L，且50 g斑石鲷到达LOE值的时间(t=480 min)比200 g斑石鲷(t=110 min)更长；自然耗氧过程中，2种规格斑石鲷呼吸频率均呈先升高后降低的变化趋势，且均在Pcrit值处显著升高，达到最大值(P<0.05)。低氧胁迫导致血浆葡萄糖和皮质醇含量显著升高，在LOE值处达到最大值(P<0.05)，但50 g斑石鲷的葡萄糖和皮质醇含量上升幅度显著低于200 g斑石鲷(P<0.05)。同时，低氧引起斑石鲷的WBC和RBC数目、Hb浓度和HCT显著升高，50和200 g斑石鲷分别在Pcrit和LOE值处达到最大值(P<0.05)。恢复正常溶解氧24 h后，2种规格斑石鲷均恢复正常呼吸运动，上述生理生化指标均与对照组无显著差异(P>0.05)。综上所述，2种规格的斑石鲷相比较，50 g斑石鲷的低氧耐受能力更强，200 g斑石鲷对低氧胁迫的应激反应更敏感，2种规格斑石鲷均可通过增加呼吸频率、提高血液WBC和RBC数、皮质醇、葡萄糖和Hb浓度，增强对溶解氧的吸收利用，应对低氧胁迫导致的生理状态改变，相关结果为斑石鲷高效养殖提供了基础数据。     

基于形态学特征和线粒体Cyt b序列的横带髭鲷野生与养殖群体比较

对横带髭鲷形态特征以及野生群体和养殖群体的遗传差异进行了分析。共测定94尾横带髭鲷的19项生物学特征。结果表明，野生群体和养殖群体间形态差异不明显。同时，扩增了野生群体和养殖群体的线粒体Cyt b基因片段，22尾横带髭鲷个体共检测到5种单倍型，其中养殖群体仅有1种单倍型，野生群体具有5种单倍型，且养殖群体的单倍型多样度及核苷酸多样度均低于野生群体。基于横带髭鲷线粒体Cyt b片段构建的单倍型网络图及系统发育树未发现该物种存在明显的谱系结构。综上所述，相较于野生群体，横带髭鲷养殖群体的遗传多样性水平较低，因此有必要采取科学的人工繁育技术与方法，提高养殖群体的遗传多样性水平，以保护横带髭鲷的种质资源。     

A属短鲷繁殖水质特点及水质调控技术

通过对A属短鲷原生地水域环境及水质特点的分析,结合几年来的繁殖经验,提出繁殖该类观赏鱼所需水域环境的营造方法及水质调控技术.     

大型围栏养殖模式下2种规格斑石鲷耐高温研究

鱼类作为水生变温动物，围栏圈养环境海水温度的突变会对其机体正常的生理活动产生显著影响。本研究以2种规格斑石鲷(Oplegnathus punctatus)为实验对象，分析了急性高温(32℃)胁迫后1、3、6 h，恢复正常温度(25℃)后6 h和12 h时，其呼吸频率、血清中葡萄糖(GLU)和皮质醇(COR)含量、血液中红细胞(RBC)和白细胞(WBC)数目、血红蛋白(HGB)含量、红细胞积压(HCT)以及肝脏热休克蛋白(hsp70、90) mRNA表达量的变化。结果显示，32℃高温条件下，2种规格斑石鲷呼吸频率呈先升高后降低的变化趋势，其中，50 g和200 g斑石鲷分别在0.3 h (20 min)和1 h时呼吸频率达最高值(P<0.05)。2种规格斑石鲷COR和GLU浓度皆呈先升高后降低的变化趋势，50 g斑石鲷COR浓度在1 h时显著高于其他处理组(P<0.05)，GLU浓度在6 h时显著高于其他处理组(P<0.05)；200 g斑石鲷COR浓度在1 h时显著低于50 g斑石鲷血清COR浓度(P<0.05)，恢复6 h后，COR浓度与对照组相比无显著差异(P>0.05)，GLU浓度在高温胁迫期间一直处于较高水平，恢复12 h时与对照组相比无显著差异(P>0.05)。高温胁迫过程中，50 g斑石鲷WBC、RBC、HGB含量呈先上升后下降的趋势，200 g斑石鲷WBC、RBC、HCT处理组与对照组相比无显著差异(P>0.05)，HGB含量呈先上升后下降的趋势，3 h时显著高于对照组(P<0.05)。高温诱导2种规格斑石鲷肝脏组织中hsp70和hsp90 mRNA表达量皆呈先上升后下降的趋势，hsp70和hsp90 mRNA表达量分别在3 h和1 h达到最高(P<0.05)。上述指标在恢复正常温度(25℃) 12 h后，恢复至正常水平，同对照组无显著差异(P>0.05)。综上，急性高温刺激显著增加了2种不同规格斑石鲷的呼吸频率、COR和GLU含量，上调了肝脏hsp70和hsp90 mRNA表达，小规格的斑石鲷应对高温胁迫具有更强适应调节能力。相关结果为斑石鲷大型围栏养殖提供了有效数据支撑，同时也为进一步阐明斑石鲷高温耐受调控机制奠定了基础。