SPF鸡和商品蛋鸡粪便菌群及大肠杆菌抗药性的比较分析

通过粪菌移植可以调节肠道菌群的组成,已成为降低肠道菌群抗药性的方法之一,而筛选合适的粪菌移植供体尤为重要。本研究利用16S rRNA基因高通量测序技术分析了两种候选供体SPF鸡和商品蛋鸡在不同养殖模式下5个不同日龄粪便菌群的组成,并利用药物敏感性试验比较了粪便中大肠杆菌的抗药性水平。结果表明,两种蛋鸡粪便菌群的丰富度都表现出随日龄增加而增加的趋势,其中商品蛋鸡粪便菌群的种类更加丰富,而SPF鸡粪便菌群的组成更加均一。在门水平上,SPF鸡拥有更多的厚壁菌门细菌,而商品蛋鸡含有更多的变形菌门、拟杆菌门和放线菌门细菌。在属水平上,两种蛋鸡粪便中的优势菌均为乳酸杆菌属和埃希氏-志贺氏菌属,其中SPF鸡存在更多的乳酸菌属和隐秘杆菌属,而商品蛋鸡含有更多的拟杆菌属、假单胞菌属、不动杆菌属、梭菌属、链球菌属和克雷伯菌属。药敏试验结果表明,SPF鸡粪便中大肠杆菌对抗生素的抗药率、多重抗药性比例和最低抑菌浓度(MIC)的频率分布均显著低于商品蛋鸡。该结果深入分析了两种养殖模式下不同日龄蛋鸡的粪便菌群,结合粪便中大肠杆菌抗药性水平的比较分析,进一步表明SPF鸡粪便菌群更加安全、敏感,可以作为粪菌移植的供体用于降低肠道菌群的抗药性。     

山东省养鸡场大肠杆菌多黏菌素耐药基因mcr-1的流行情况

2017-2018年,从山东省8个大型集约化养鸡场中共采集720份新鲜粪便样品,通过细菌分离鉴定共分离到697株非重复大肠杆菌.采用琼脂稀释法对所有菌株进行药敏试验;利用PCR扩增多黏菌素耐药基因(mcr-1);并对mcr-1阳性菌株扩增β-内酰胺类耐药基因(ESBL)和喹诺酮类耐药基因(PMQR).结果 显示,从69...     

马铃薯受马铃薯甲虫危害后冠层光谱特征的初步研究

使用美国ASD野外便携式光谱仪测量马铃薯受马铃薯甲虫危害后冠层光谱反射率,进行光谱微分、相关分析,得出结论：在750～975 nm范围内,受害后的马铃薯与健康的马铃薯相比冠层光谱反射率下降,红边斜率降低。选择了马铃薯受害后的敏感波段为736～920 nm。     

中国大豆蛋白亚基构成分析与缺失部分亚基的特异大豆品种的筛选

大豆蛋白亚基组成的不同直接影响大豆蛋白的加工特性与营养特性。本研究利用SDS-PAGE电泳分析大豆蛋白质组成并提出了便捷的样品预处理方法。对1 624个中国大豆栽培品种的分析结果表明,构成大豆蛋白的主要亚基均有一定变异,同时,结合Western Blot分析,首次在中国大豆栽培品种中发现了β-伴大豆球蛋白的β-亚基缺失的大豆品种,为大豆蛋白质的品质改良育种和加工理论研究提供了重要的材料。     

铜绿假单胞菌的血清分型、鞭毛分型和脉冲场凝胶电泳分型

铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)是一种重要的人畜共患病原菌,给人畜健康带来威胁。细菌分型是揭示病原菌流行规律、传播机制以及制定相应防控措施的基础。选取水貂、人和羊源PA共78株分别进行O-抗原血清分型、H-抗原鞭毛分型以及脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型。结果显示,60株水貂源PA主要流行血清型为G型(73.3%),其次为I,M,B,E型;鞭毛A型和B型分别占91.7%和8.3%。16株人源PA以血清型E型(25%)为主,其他型别G,M,I,B,D,F,H零散分布,鞭毛A,B型分别占68.8%和31.2%。2株羊源PA血清型为I型(100%),且均为鞭毛B型。PFGE分子分型共分为14个谱型,24个亚型,其中B1、F3、G1、H1这4个亚型的菌株同源性达到100%。结果表明,水貂源PA感染与血清G型和鞭毛A型高度相关(P0.01);人源PA感染优势血清型为E型且与鞭毛A型显著相关(P0.01);2株羊源PA感染均为血清I型和鞭毛B型;不同来源的PA菌株其PFGE分型呈现多样化和复杂性,相同来源的菌株其PFGE谱型有的完全相同,显示同一个克隆传播的可能,有的差异很大,显示不同分子克隆传播。本试验有助于阐明山东省3种来源PA的分子流行特征,为开展PA相关风险评估、控制及疾病诊治提供依据。     

口蹄疫病毒3B蛋白的表达纯化及其多克隆抗体的制备

为了深入研究口蹄疫病毒3B蛋白的结构及功能,本研究原核表达了3B蛋白并制备了针对3B蛋白的多克隆抗体。试验采用PCR方法扩增了口蹄疫病毒3B蛋白基因,并将其克隆到pET28a载体上,构建了重组质粒pET28a-3B,将其转化到大肠杆菌BL21感受态细胞中进行诱导表达。经过Ni-NTA琼脂糖亲和层析法初步纯化及Millipore超滤浓缩进一步纯化,将其免疫试验动物新西兰大白兔后制备出了抗3B蛋白的多克隆抗体。通过ELISA检测了该多抗的效价,Western blot试验检测了其反应性,通过间接免疫荧光(IFA)和Western blot试验检测了该多抗的应用性。结果表明:该抗体的效价为1∶512000,反应性良好;IFA试验和Western blot试验中可以检测到过表达后定位于细胞核和细胞质中的3B蛋白,也可以检测到在真核细胞中过表达的3B蛋白。说明本研究制备的口蹄疫病毒3B蛋白多克隆抗体可以作为开展该病毒相关研究的重要材料。     

噬菌体降低铜绿假单胞菌所致腐蛋的效果

铜绿假单胞菌是孵化过程中造成腐蛋的主要病原菌,拟尝试用裂解性噬菌体防治。选用腐蛋中筛选的铜绿假单胞菌PA-MH12,以此为宿主从河水中筛选到1株裂解性噬菌体MH12-Q,对其进行了生物学特性研究,体外进行了对铜绿假单胞菌所致腐蛋的防控效果试验。结果显示：噬菌体MH12-Q属于肌尾噬菌体科（Myoviridae）,效价可达到10¹³pfu·mL^-1,完全裂解效价（CLC）为10¹⁰pfu·mL^-1,最适生长温度为37℃,pH稳定性好,最适pH为6~8,且其在pH4~10的效价都能维持在较高的水平。最佳感染复数（OMOI）为0.001,感染宿主的潜伏期为30 min,爆发期为70 min。噬菌体MH12-Q可使高浓度铜绿假单胞菌的感染率从70%降低到40%。铜绿假单胞菌噬菌体MH12-Q的生物学性质适合生产应用,对孵化场腐蛋具有较好的防控作用,能够提高感染铜绿假单胞菌的鸡胚成活率。     

2012年第一季度山东省肉鸡集团公司鸡源大肠杆菌抗药性监测报告

大肠杆菌是肉鸡的主要致病菌，对其抗药性和毒力机制研究较为系统，但仍然无法找到一劳永逸的杀菌药物，因为决定抗药性毒力的基因储存在肠道和环境的菌群基因库中，是变异、流动的，且细菌还存在生理性适应。针对抗药性和毒力的动态变化，除了增加药物种类，根本的办法是进行系统的抗药性监测和流行病学调查工作。     

新型吸管式药敏检测盒的制备及在奶牛乳房炎诊治中的初步应用

为探索适于在兽医临床使用的药敏检测方法,本研究根据试管稀释法原理,研制组装新型吸管式药敏检测盒,并对该药敏检测盒的准确性、稳定性进行验证,然后对引起奶牛乳房炎的临床分离病原菌进行药敏检测。结果表明,新型吸管式药敏检测盒准确性高、稳定性好、便于保存,对临床分离病原菌的药敏检测结果与临床治疗情况基本相符,说明新型吸管式药敏检测盒适于在兽医临床使用。