基于RT-RAA的禽流感H5亚型核酸CRISPR-Cas13a检测方法的建立

采用逆转录-重组酶介导等温核酸扩增技术(RT-RAA)和成簇的规律间隔的短回文重复序列(CRISPR)检测系统，建立一种快速、高灵敏度和高特异性的禽流感病毒(AIV)H5亚型核酸检测新方法。通过分析342条禽流感病毒H5亚型的HA基因序列，选取保守性区域设计具有强特异性的CRISPR RNA(crRNA)序列以及RT-RAA引物，并对检测体系中的主要成分LwaCas13a蛋白、crRNA、TaqMan探针、T7 RNA Polymerase、NTP Buffer Mix含量进行优化，建立了基于RT-RAA的AIV H5亚型核酸CRISPR-Cas13a检测方法。取10⁵～1 copies·μL^-1含有目的基因的质粒标准品和其他亚型禽流感病毒以及其他禽病病毒分别验证和评价该方法的灵敏性和特异性。结果表明，本文设计的RT-RAA引物与crRNA特异且灵敏，其最佳反应体系中主要成分用量分别为LwaCas13a蛋白(60μg·mL^-1)2.0μL、crRNA(100μmol·L^-1)3.2μL、TaqMan...     

寒地李和杏遗传多样性SSR分析

以27份适宜北方生长的李、杏品种为试材,采用SSR分子标记技术对其进行遗传多样性分析,并运用UPGMA聚类分析法,分析了27份试材的亲缘关系,为寒地李、杏种质资源保存和品种选育提供分子生物学依据。结果表明:筛选的25对SSR多态性引物共扩增等位位点245个,其中多态性位点240个,多态性比率为97.96%。每对引物的等位基因数量为4~13,平均值为9.8。有效等位基因数平均值为2.740 5,Shannon′s信息指数平均值为1.052 0,多态性信息含量平均值为0.595 5,表明试材具有较高的遗传多样性。聚类分析结果表明,在遗传相似系数0.612处,27份试材可以分为李和杏两大类群。     

秦州区农机培训工作中存在的问题及对策

介绍了秦州区农机培训工作中存在的问题及相关对策。     

掌叶大黄栽培技术

<正>一、形态与习性掌叶大黄为多年生草本,高可达2米。根及根状茎粗壮,肥厚,稍木质化,外皮暗褐色,断面深黄色。叶片宽卵形或近圆形,长达35厘米,掌状浅裂至半裂,两面疏生乳头状小突起和白色短刺毛。茎直立,高2米。圆锥花序,花期6～7个月,果期7～8个月。种子容易萌发,在5～15℃时发芽率85%以上。喜冷凉气候,忌高温,忌连作,须隔4～5年再种。宜与豆科、禾本科作物轮作。     

我国药用动物养殖趋势

目前已知我国药用动物有５１０种。根据产销和市场需求，特提出部分药用动物的养殖前景，以供广大养殖爱好者在早日致富路上找到适合自己的养殖品种。全蝎：又名全虫，是传统名贵药材。随着全蝎用途的不断拓宽，近几年来其价格一直在高位上运行。目前，国内药市上淡全蝎售价为４５０～５００元／公斤，盐全蝎为３５０元／公斤左右，而药用仍以捕捉野生为主。但由于长期使用农药、化肥和大量捕捉，致使野生蝎子资源锐减，市场供需矛盾日益突出。近年来，我国养蝎业取得了重大进展，已攻克了许多养蝎技术难关，试验成功无冬眠养蝎技术，解决了…     

蓝桉,直干桉木材纤维长度在株内的变异

对３０株蓝桉、３６株直干桉胸高圆盘上不同方向，年龄及干不同高度的木材纤维长度所作的测定分析表明，两种树种株内木材在不同方向的差异不显著，年龄间、高度间的差异构其显著（Ｐ〈０．００１）。在１１年生以前，纤维长度随年龄几乎是直线上升，其变异可用对数曲线描述。纤维长度以胸高圆盘的平均值最短，以前，纤维长度随年龄的增长几科是直线上升，其变异可用对数曲线描述。纤维长度以胸高圆盘的平均值最短，其次为树高的３／     

槟榔江水牛ACVR1基因分离鉴定及表达谱分析

【目的】ACVR1作为一些TGF-β超家族成员信号通路的I型受体之一,在器官形成和细胞分化及卵泡形成等调控事件中扮演重要角色。迄今,有关ACVR1基因的研究主要集中在人上,有关水牛ACVR1基因的研究尚未见报道。【方法】采用RT-PCR测序法对槟榔江水牛ACVR1基因的编码区序列进行了分离鉴定,进一步对之进行了功能生物信息学和表达谱分析。【结果】水牛ACVR1基因编码区全长1 530 bp,编码1个由509个氨基酸残基构成的多肽。水牛ACVR1为弱亲水性蛋白,含有1个信号肽和跨膜区,定位在质膜上;该蛋白含有Activin_recp、TGF_beta_GS和STKc_ACVR1_ALK1三个保守结构域,其二级结构、三维结构与人的ACVR1极为相似。水牛的ACVR1与普通牛、野牦牛、人和猪等8个物种的ACVR1氨基酸序列间一致性99%。在所检测的水牛9个组织中,ACVR1基因在肝脏、脾脏、肾、瘤胃、卵巢、子宫和睾丸中均表达,其中在卵巢和子宫中表达水平最高。【结论】水牛的ACVR1与其他物种的ACVR1具有相近的氨基酸组成和结构特征,其作为BMP、AMH信号通路的I型共享受体,可能参与了水牛的细胞分化及卵泡形成等调控事件。