饱和烷烃法测定放牧采食量的研究进展

放牧采食量问题历来是动物营养学家和草原学家所十分关注的一个技术难题。迄今为止，解决该难题的最佳方法是运用烷烃技术。笔者综述了植物蜡质层的饱和烷烃作为指示剂测定放牧采食量的原理和方法，并指出其在应用过程中存在的问题及优缺点。     

不同NFC/NDF比对奶山羊瘤胃微生物及瘤胃pH值变化的影响

试验研究了在不同非纤维性碳水化合物/中性洗涤纤维（NFC/NDF）比饲粮条件下诱发奶山羊亚急性瘤胃酸中毒（subacute rumen acidosis,SARA）过程中瘤胃微生物区系和瘤胃pH值的变化。该试验选用6只安装了永久性瘤胃瘘管的泌乳期关中奶山羊为试验动物,采用自身对照试验法,共分4期进行,每期10d,依次饲喂NFC/NDF比为1.02（Ⅰ期）、1.24（Ⅱ期）、1.63（Ⅲ期）、2.58（Ⅳ期）的4种饲粮,以逐渐增加饲粮精料的方法诱导奶山羊发生SARA。结果表明,随着饲粮NFC/NDF比的增大,瘤胃pH值显著降低（P〈0.05）,并且瘤胃pH值下降幅度也随之加快;随着饲粮NFC/NDF比的增加,淀粉分解菌的数量增幅最显著（P〈0.01）;饲粮NFC/NDF比为1.63时,瘤胃细菌总数、乳酸杆菌及坏死梭形杆菌的数量显著增加（P〈0.05）,当该比值为2.58时,埃氏巨型球菌和反刍兽新月单胞菌的数量出现显著增多（P〈0.05）;原虫数量在Ⅳ期降至最低,而牛链球菌的数量在整个试验期并未出现明显的波动。饲粮NFC/NDF比为1.63时,瘤胃内与碳水化合物分解有关的多数细菌的数量明显增加,SARA期时增幅更为明显,而此时原虫数量为最低。     

慢性瘤胃酸中毒状态下奶山羊瘤胃细菌内几种相关细菌数量变化的研究

研究慢性瘤胃酸中毒（subacute rumen acidosis,SARA）状态下,相关瘤胃微生物数量的变化。将6只体重相近,体况良好,并安装有永久性瘤胃瘘管的泌乳期关中奶山羊作为试验对象,以逐渐增加精料的方式诱导动物发生SARA。试验分4期进行,4期日粮的精粗比分别为5∶5、6∶4、7∶3和8∶2。分别采用16S rRNA 探针杂交法和传统培养法对SARA状态下瘤胃内微生物数量变化进行测定。随着日粮精料比例的增加,牛链球菌、乳酸杆菌、反刍兽新月单胞菌、埃氏巨型球菌和淀粉分解菌的数量出现不同程度的增加,而3种主要纤维分解菌的数量有所下降,其中淀粉分解菌的数量极显著增加（P<0.01）。在SARA状态下瘤胃细菌总数、乳酸产生菌和乳酸利用菌数量均有所增长,同时3种主要纤维分解菌的数量明显下降。     

日粮添加延胡索酸二钠和瘤胃素对慢性酸中毒奶山羊瘤胃发酵和细菌数量的影响

本试验研究延胡索酸二钠与瘤胃素组合在高精料日粮条件下对慢性瘤胃酸中毒状态下瘤胃发酵功能和微生物数量的影响.选取6只2～3岁平均体重(32.00±1.21) kg安装有永久性瘤胃瘘管的泌乳期奶山羊作为试验动物,采用逐渐提高日粮精料的方式诱导发生SARA.试验动物处于SARA后,试验组添加组合添加剂(延胡索酸二钠10 g,瘤胃素34 mg),对照组不添加.测定瘤胃发酵指标并通过16S rRNA探针杂交定量分析法结合传统厌氧培养法分析瘤胃内细菌的变化情况.结果表明,组合添加剂能显著提高瘤胃VFA浓度(P<0.05),维持高精料条件下瘤胃pH的稳定,使乳酸杆菌和牛链球菌数量减少(P<0.05),而反刍兽新月单胞菌、埃氏巨型球菌和产琥珀酸丝状杆菌的数量增加(P<0.05).以上结果说明,延胡索酸二钠和瘤胃素的联合使用可以改善SARA状态下的瘤胃发酵功能,并使乳酸产生菌减少而乳酸利用菌增加.     

内蒙古白绒山羊瘤胃营养成分流通速率的模型化研究

在不同日粮条件下,建立了内蒙古白绒山羊瘤胃营养成分流通速率(Kp)预测模型:Kp=-0.052MBW-0.0046DMI+0.0987FL+5.141(R2=0.897,n=27,P<0.05)。并在其它不同的常用日粮条件下进行了验证,证明了该试验建立的预测模型可以在内蒙古白绒山羊的常用日粮Kp值的预测上应用。     

对蒙牛澳亚国际牧场泌乳牛产乳效率的研究

饲料转化效率是畜牧业一项极其重要的经济衡量指标。产乳效率（Dairy Efficiency，DE）是用来衡量乳牛的饲料转化效率的，通常以奶牛每千克干物质采食量可生产3.5％乳脂校正乳（FCM）的量来表示。由此可知产乳效率将直接与奶牛养殖者经济效益挂钩，这是因为干物质采食量直接反映了奶牛的饲料成本，而产奶量则直接反映了奶牛养殖的收益回报。面对我国当前奶牛饲料成本高、奶价较低、奶牛养殖利润薄的现实，     

山羊紧密连接相关蛋白ZO-1序列的生物信息学分析

为了研究山羊紧密连接相关蛋白ZO-1基因编码蛋白的组成结构及生物学特性,试验应用生物信息学方法对ZO-1蛋白的氨基酸序列组成、理化性质、亲疏水性、信号肽、跨膜结构域、磷酸化位点、亚细胞定位、蛋白质二级和三级结构进行预测与分析,并构建系统进化树。结果表明:该基因全长1 164 bp,编码387个氨基酸; ZO-1蛋白分子质量为45. 25 ku,理论等电点为6. 52,由20种氨基酸组成,呈酸性,不稳定指数为58. 54,是一个不稳定的亲水性蛋白;具有41个潜在的磷酸化位点,不存在信号肽和跨膜区;亚细胞定位分析显示,ZO-1蛋白主要存在于细胞核,在线粒体和细胞质中也有少量分布;二级结构预测显示,ZO-1蛋白以α-螺旋为主要结构,比例为68. 73%;三级结构预测显示,ZO-1蛋白是由α-螺旋、β-转角、β-折叠和无规卷曲组合成的超二级结构,经折叠、弯曲等一系列复杂过程形成了一个稳定的结构;系统进化树分析发现,山羊的ZO-1基因编码蛋白序列首先与绵羊聚为一类,然后与牛聚为一类,这与动物学分类结果一致,这种同源性在一定程度上代表着物种亲缘关系的远近。说明ZO-1基因有望成为维持山羊瘤胃上皮组织屏障功能和预防亚急性瘤胃酸中毒疾病的重要基因。     

体外法研究pH与脂多糖或组胺的交互作用对奶山羊瘤胃上皮细胞紧密连接蛋白mRNA表达量的影响

本试验旨在采用体外法研究p H与脂多糖(LPS)或组胺(HIS)的交互作用对奶山羊瘤胃上皮细胞紧密连接蛋白mRNA表达量的影响。选用8只体况良好,体重、泌乳量相近的萨能奶山羊作为瘤胃上皮供体。采用3×3双因素试验设计,山羊屠宰后采集瘤胃上皮,插入到尤斯灌流仪器(Ussing chamber)半室中央,在浆膜侧半室加入5 m L缓冲液,黏膜侧加入配制好的不同处理的培养液5 m L,每个处理3个重复。试验1:因素1为p H,分别为7.4、5.5、5.2;因素2为LPS浓度,分别为0、30、60 k EU/m L。试验2:因素1为p H,分别为7.4、5.5、5.2;因素2为HIS浓度,分别为0、0.5、10.0 ng/m L。采集培养80 min后的瘤胃上皮,测定其紧密连接蛋白Claudin-1、Claudin-4、Claudin-7、Occludin、zonula occludens-1(ZO-1)mRNA表达量。结果显示:1)p H与LPS的交互作用对Claudin-1、Claudin-7、ZO-1 mRNA表达量影响显著(P0.05)。与p H 7.4×0 k EU/m L LPS组相比,降低p H或添加LPS均显著降低了Claudin-1、Claudin-7 mRNA表达量(P0.05),ZO-1 mRNA表达量有整体降低的趋势,在p H 5.2×60 k EU/m L LPS组最高。2)p H与HIS的交互作用对Claudin-1、Claudin-7、ZO-1 mRNA表达量影响显著(P0.05)。p H 5.5×0.5 ng/m L HIS组Claudin-1 mRNA表达量最低,但与p H 5.2×0.5 ng/m L HIS组差异不显著(P0.05)。p H 7.4×10.0 ng/m L HIS组Claudin-7 mRNA表达量显著低于p H 7.4×0 ng/m L HIS组(P0.05),但与p H 5.5×10.0 ng/m L HIS组差异不显著(P0.05)。与p H 7.4×0 ng/m L HIS组相比,降低p H或添加LPS有提高ZO-1 mRNA表达量的趋势,且p H 5.2×10.0 ng/m L HIS组显著提高(P0.05)。结果提示,亚急性瘤胃酸中毒(SARA)发生后,p H与LPS或HIS交互作用于瘤胃上皮,降低瘤胃上皮紧密连接蛋白mRNA表达量,进而增大瘤胃上皮黏膜通透性。     

亚急性瘤胃酸中毒对奶山羊血浆异常代谢产物及生化指标的影响

本试验通过递增饲粮非纤维性碳水化合物与中性洗涤纤维比(NFC/NDF)方式诱导奶山羊发生亚急性瘤胃酸中毒(SARA),旨在探讨SARA诱导过程中奶山羊血浆组胺(HIS)、脂多糖(LPS)含量及生化指标的变化。选取4只体况良好、体重接近的泌乳期萨能奶山羊,依次饲喂NFC/NDF为1.40、1.79、2.31、3.23的4种饲粮,每种饲粮饲喂15 d(为1组),前12 d为适应期,后3 d为采样期。酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血浆中HIS、LPS的含量,生化分析仪测定血浆生化指标。结果表明:1)当饲粮NFC/NDF由1.40递增至3.23时,成功诱导奶山羊处于SARA状态。2)在诱导SARA发生过程中,随着饲粮NFC/NDF增加,血浆HIS和LPS含量增加,NFC/NDF为3.23时显著高于NFC/NDF为1.40时(P0.05)。3)随着饲粮NFC/NDF增加,血浆免疫球蛋白M(Ig M)、免疫球蛋白A(Ig A)、免疫球蛋白G(Ig G)含量无显著变化(P0.05);血浆肌酐(CREA)、D-乳酸(LD)含量及肌酸激酶(CK)、谷草转氨酶(AST)、二胺氧化酶(DAO)活性无显著变化(P0.05);血浆γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)活性呈升高趋势,NFC/NDF为3.23时显著高于其他各组(P0.05);血浆尿素氮(UN)含量降低,NFC/NDF为1.40时显著高于其他各组(P0.05);血浆碱性磷酸酶(ALP)活性升高,NFC/NDF为3.23时极显著高于其他3组(P0.01);血浆游离脂肪酸(FFA)含量先升高后降低,且在NFC/NDF为2.31时极显著高于其他各组(P0.01);血浆β-羟丁酸(β-HB)含量降低,NFC/NDF为1.40时呈极显著高于其他各组(P0.01)。结果提示,随着饲粮NFC/NDF递增,血浆中HIS和LPS含量显著增加,引发了机体炎症反应,加重了瘤胃上皮的损伤和SARA病情,激发奶山羊免疫活化状态;诱导SARA发生过程中,血浆生化指标有不同程度的变化,提示SARA期间奶山羊处于应激状态,引发了肝功能损伤。     

体外法评价活性酵母及其发酵饲料对瘤胃发酵参数的影响

本研究选择7株酿酒酵母菌（Saccharomyces cerevisiae,编号为XR4、YL5、YN7、XL8、BC、SL、AQ）、5株产朊假丝酵母菌（Candida utilis,编号为SC18、SR12、YJ2、YD6、BY）及1株热带假丝酵母（Candida tropicalis,编号为BR）,采用体外产气法研究其对体外瘤胃发酵参数的影响。结果显示,与对照组相比,活性酵母菌株对产气量均未产生显著影响（P>0.05）;酵母发酵饲料SC18、XR4、BY、AQ和BC组产气量显著升高（P<0.05）,且这5组产气量增长率均优于其对应的活性酵母组（P<0.05）。13株酵母菌中的10株活性酵母及其发酵饲料均能使菌体蛋白含量显著增加（P<0.05）,且大部分活性酵母菌蛋白增长率均高于其对应的发酵饲料（P<0.05）。活性酵母及其发酵饲料对氨态氮含量均未产生明显影响（P>0.05）。活性酵母YD6、BR、SC18、YL5、XR4、SR12、BY、BC组总挥发性脂肪酸含量显著高于对照组（P<0.05）,酵母发酵饲料YD6、BR、YJ2、SC18、SR12、SL、YL5、XR4组总挥发性脂肪酸含量显著高于对照组（P<0.05）。综上所述,活性酵母可显著提高菌体蛋白含量及挥发性脂肪酸含量,其中BY、XR4、BC效果更佳;酵母发酵饲料可显著提高产气量、菌体蛋白含量、挥发性脂肪酸含量,其中SC18、BY、BC效果更佳;酵母发酵饲料在增加产气量、总挥发性脂肪酸含量上效果要优于其活性酵母。