白菜雄性不育相关基因BcMF3和BcMF4的A9启动子的基因沉默植物表达载体的构建

以白菜(Brassica campestris ssp.chinensis,syn.B.rapa ssp.chinensis)雄性不育相关基因BcMF3和BcMF4为沉默对象,利用绒毡层组织特异性的A9启动子,构建了反义RNA、RNA干涉和双价反义RNA植物表达载体。结果表明,经过一系列分子操作,获得了A9启动子和目的基因片段,并利用它们构建了5个基因沉默植物表达载体,可用于基因功能验证。     

植物花粉发育的分子生物学研究进展

随着分子生物学技术在花粉生物学研究领域中广泛的应用，花粉发育过程中一些关键问题及其有关分子机理的研究均获得了重要进展。对花粉发育及其特异基因的克隆、表达和调控进行了综述。     

白菜雄性不育相关基因BcMF3功能的反义RNA验证

为了研究白菜等十字花科植物花粉发育及雄性不育发生的机理,根据编码果胶甲酯酶的白菜雄性不育相关基因BcMF3的cDNA序列设计特异引物,从普通白菜(Brassica campestris ssp.chinensis var.communis,syn.B.rapa ssp.chinensis var.communis)花蕾cDNA中扩增出458 bp的片断,构建BcMF3的反义RNA植物表达栽体,然后转化菜心(B. campestris ssp.chinensis var.parachinensis).研究发现,31.3%菜心转基因植株花粉表现出畸形,而且只有部分花粉具有活力,花粉离体萌发率降低为31.6%,其花药果胶甲酯酶活性降低了12.8%.上述结果表明BcMF3基因与普通白菜和菜心等白菜植物的花粉发育密切相关.     

氮磷钾施用量与辣椒品质的相关性研究

采用三因素五水平正交旋转组合设计 ,用基质盆栽法 ,研究了氮、磷、钾施用量与辣椒品质的相关性 ,建立了相应回归方程。结果表明 :氮对辣椒干物质的形成起主要作用 ,钾与辣椒果实维生素C含量呈典型曲线相关 ,氮与辣椒素含量呈显著直线相关 ,氮、磷、钾之间存有显著的交互作用效应。无土栽培辣椒氮、磷、钾最优组合方案为氮 :35 2～ 388mg/L ;磷 :5 4～ 6 2mg/L ;钾 :337～ 4 0 9mg/L。     

中国白菜与同属其它类群种皮形态的比较和分类

扫描电镜观察结果表明中国白菜、日本水菜和芜菁的种皮均呈网状纹饰，可分为基本网纹和次生网纹，中国白菜的次生网纹呈链环状加厚，其中结球白菜欠明显，不结球白菜各类群中的绝大多数品种明显．日本水菜的次生网纹呈链环状不均匀角质加厚．芜菁的次生网纹不明显，基本网纹同中国白菜一样呈清晰网状．甘蓝的种皮纹饰为非链环状不均匀角质加厚的穴坑状．据此，提出中国白菜、日本水菜和芜菁作为芸薹种ＢｒｓｓｉｃａｃａｍｐｅｓｔｒｉｓＬ．的三个亚种，结球白菜为中国白菜ｓｓｐ．ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ的一个变种的建议．     

Ogura雄性不育甘蓝型油菜×白菜、芜菁杂种F1及其回交后代染色体减数分裂行为分析

 以甘蓝型油菜（Brassica napus L.，AACC，2n＝38）Ogura CMS材料与白菜 （B. campestris ssp. chinensis Makino, AA，2n＝20） 品种新选1号、矮脚黄和芜菁 （B. campestris ssp. rapifera Sinsk , AA，2n＝20）品种耐病98-1进行杂交、回交。F1花粉母细胞减数分裂染色体构型为10Ⅱ+9Ⅰ。BC1生长势强的群体中，新选1号和耐病98-1染色体构型多为10Ⅱ+9Ⅰ，矮脚黄的染色体构型以10Ⅱ和10Ⅱ+7Ⅰ占优势；BC1生长势弱的群体中，新选1号和耐病98-1染色体构型多为10Ⅱ+7Ⅰ，矮脚黄的染色体构型多为10Ⅱ+1Ⅰ。BC2生长势强的群体中，新选1号的染色体构型多为10Ⅱ+1Ⅰ，矮脚黄多为10Ⅱ；BC2生长势弱的群体中，新选1号和矮脚黄多为10Ⅱ，耐病98-1多为10Ⅱ+6Ⅰ、10Ⅱ+5Ⅰ。BC3根尖染色体观察新选1号、矮脚黄染色体数达到100%，耐病98-1中染色体数为20的细胞达到78.12%。同时对BC1代不同染色体数在减数分裂Ⅰ的分离规律进行了研究。结果表明，AACC染色体组物种与AA染色体组物种杂交经少数几代回交即可获得后代性状相对稳定的不育系。     

浙江高山蔬菜产业现状及发展对策

简要阐述了浙江省高山蔬菜产业现状及存在问题，探讨了发展高山蔬菜产业的方向，提出必须以市场为导向，依靠科技进步，合理调整生产布局，大力发展无公害高山蔬菜等对策。     

酵母SAMDC基因表达载体构建以及农杆菌介导转化番茄的研究

SAMDC(腺苷甲硫氨酸脱羧酶)是参与植物多胺合成的一个关键酶.通过GenBank上已经发表的序列,设计两对引物,分别以酵母基因组DNA和番茄基因组DNA为模板克隆出SAMDC基因和E8启动子.构建了以CaMV35S和E8为启动子的两个SAMDC基因植物表达载体,酶切分子鉴定后,经农杆菌介导以叶盘法转入番茄中,获得了转基因植株.经PCR检测和X-Gluc组织化学染色检测,目的基因已经成功转入番茄中.为研究多胺在番茄中代谢活性以及SAMDC基因对番茄抗逆性和番茄果色的影响提供了研究基础.     

白菜核雄性不育两用系花蕾的mRNA差别显示及其cDNA差异片段分析

用mRNA差别显示技术对白菜核雄性不育两用系中不育株群与可育株群花蕾总RNA进行了比较分析.在6种反转录模板和20种差异随机引物共120种组合的选择扩增中共回收了18个cDNA差异片段,对其中6个cDNA差异片段进行Northern验证,获得了一个白菜核雄性不育两用系可育株群并在花蕾中特异表达的阳性差异片段,简称为B0302-4.Northern验证结果表明它在不育株中的表达受到了明显的抑制,其长度为463 bp.经GenBank BLAST查询,它与拟南芥第一条染色体上编码细胞色素P450的基因CYP86C4核苷酸序列有84.3%的同源性.     

白菜雄性不育相关基因BcMF4的反义RNA验证

根据普通白菜(Brassica campestris ssp.chinensis var.communis)雄性不育相关基因BcMF4的cDNA序列设计特异引物,从普通白菜花蕾cDNA中扩增出607 bp的片断,然后将该片段连接至双元载体pBI12l中,得到反义RNA植物表达载体并导入农杆菌LBA4404菌株中;通过组织培养途径转化菜心(B.campestris ssp.chinensis var.parachinensis),得到了12株转基因植株,其中5株的43.7%的花粉为缩小空瘪畸形,29.6%的花粉缺乏生活力,而且其花粉离体萌发率降低至24.7%.结果表明,反义RNA技术沉默BcMF4基因导致了菜心转基因植株的部分花粉发育不良,BcMF4基因在普通白菜和菜心等花粉发育中起着重要作用.