猪链球菌ZKHY株gdh基因的克隆与序列分析

对猪链球菌ZKHY株的谷氨酸脱氢酶基因(gdh)进行克隆和序列分析,以ZKHY株的基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增出谷氨酸脱氢酶基因片段,克隆于pMD-18T载体,转化宿主菌JM109中进行序列测定。将测序结果与GenBank已登录序列进行核苷酸和氨基酸的同源性分析。序列分析显示,成功克隆了猪链球菌ZKHY株的gdh基因,ZKHY与已报道的猪链球菌gdh基因有密切的亲缘关系,核酸序列与血清2、7、9型的同源性为97.2%~98.4%,其中与2型菌株同源性为97.2%~97.3%;与7型菌株同源性为98.4%;与9型菌株同源性为97.6%。其编码的氨基酸序列同源性则更高,与GenBank中已收录的序列同源性在98.9%以上。ZKYH株可能是属于2、7、9型之外的其他血清型;所克隆的基因在猪链球菌之中非常保守,可以进行表达以用作免疫学方面的相关研究。     

某规模化猪场猪增生性肠炎的诊断与防治

湖北省某规模化养猪场生猪发生间歇性腹泻,粪便变软、变稀而呈糊状或水样,有时混有血液,病猪生长迟缓。随机采集新鲜的猪粪样100份,通过猪增生性肠炎FIRSTtest检测确诊为猪增生性肠炎。其中保育猪粪样25份,阳性率32%;育肥猪粪样25份,阳性率60%;后备母猪粪样25份,阳性率40%;妊娠母猪粪样25份,阳性率44%。在加强消毒等综合防控措施的同时,用阿莫西林、泰妙菌素和泰乐菌素分别拌料防治本病做对比试验,发现泰妙菌素和泰乐菌素对猪增生性肠炎起到很好的防治作用。     

鸡白痢和鸡伤寒沙门氏菌的PCR-RFLP分子鉴别

根据鸡白痢沙门氏菌和鸡伤寒沙门氏菌fliC基因可变区两端的保守序列设计1对引物,PCR扩增出约600bp的产物,用Hin6I对PCR产物进行酶切,经RFLP分析区分鸡白痢沙门氏菌、鸡伤寒沙门氏菌的生物型。利用该技术对6株鸡白痢沙门氏菌标准株及2株鸡伤寒沙门氏菌标准株进行分子鉴别,得到的结果与预计的RFLP模式相符,证明该方法可行。在此基础上对我国不同地区、不同年代的191株鸡沙门氏菌进行分子鉴别,191株中有185株分离株符合鸡白痢沙门氏菌的RFLP模式,6株分离株符合鸡伤寒沙门氏菌的RFLP模式,其中有176株PCR—RFLP鉴定结果与生化特性符合率达100％,另有15株根据生化特性不能鉴别。     

河南省猪产业链中耐头孢菌素沙门菌对β-内酰胺类和喹诺酮类药物的耐药机制分析

对河南省猪产业链中分离的28株耐头孢菌素沙门菌进行血清学分型、药敏试验和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)筛查，并进一步采用PCR扩增和DNA测序检测β-内酰胺基因、喹诺酮类耐药基因以及喹诺酮类耐药决定区(QRDR)氨基酸突变。结果显示，河南省猪产业链中耐头孢菌素沙门菌的流行率为0.89%(28/3 137),其中肝脏样品流行率最高(4.98%,16/321);28株检测菌，共分为7种血清型，主要血清型为印第安纳(46.43%,n=13)和单相鼠伤寒变种(25%,n=7)。所有菌株除了黏杆菌素，对其他11种药物耐药率均高于60%,多重耐药率为100%;至少携带1种β-内酰胺酶基因，携带率最高的基因是blaCTX-M(89.29%,n=25),共携带有6种组合的β-内酰胺酶基因谱；共检测到4种喹诺酮类耐药基因(aac(6)-Ib-cr、oqxAB、qnrS和qnrC),gyrB和parE均无氨基酸突变，其中15株菌同时发生gyrA(Ser83Phe与Asp87Asn/Gly)突变和parC(Thr57Ser与Ser80Ile/Arg)突变，无论是否存在喹诺酮耐药基因，对环丙沙星均呈高水平的...     

玉米联合收获机的故障分析与维修技术

随着玉米产业的快速高质量发展，生产过程中应用的中大型农机设备显著增多，玉米联合收获机作为玉米收获的重要机型，能有效提高收获效率和质量。为保证玉米联合收获机的高效率应用，介绍了我国玉米联合收获机应用情况，总结了在生产实践中的常见故障现象、原因及检查维修方法。