PDX-1基因对人胚肾细胞胰岛发育相关基因表达的影响

【目的】研究人PDX-1基因对胰岛发育相关基因和胰岛素基因(Insulin,INS)表达的影响,探讨PDX-1基因诱导非β细胞为胰岛素分泌细胞的可能性。【方法】采用PCR扩增技术,从人的胰腺cDNA中扩增PDX-1基因和INS基因的阅读框架,分别构建了质粒pAAV-PDX-1和pAAV-INS;将pAAV-PDX-1转染人胚肾细胞(293T)48 h后,RT-PCR检测293T细胞中胰岛发育相关基因的表达;再将pAAV-PDX-1和pAAV-INS共转染293T细胞48 h后,RT-PCR检测293T细胞中INS的表达。【结果】转染pAAV-PDX-1的293T细胞中,检测到胰岛发育相关基因PDX-1、Ngn3、PC2、BETA2的表达;PDX-1没有直接增强INS基因表达的作用。【结论】在293T细胞中,PDX-1基因对胰岛发育相关基因的表达有重要影响,PDX-1在诱导非β细胞为胰岛素分泌细胞的过程中可能有着重要的作用。     

信丰县脐橙病虫害绿色防控技术研究初报

信丰是中国脐橙之乡,赣南脐橙的发源地,种植脐橙具有得天独厚的优越条件,现有脐橙面积1．87万hm^2,脐橙总产量17．5万t。信丰被评为江西省绿色食品生产“十强县”、全国柑橘生产“二十强”县。为了贯彻“公共植保、绿色植保”的理念,研究推广脐橙病虫害绿色防控技术,2009年笔者在大阿镇大阿果园场实施了脐橙病虫绿色防控示范。通过集成推广冬季清园、健身栽培、诱杀控害、生态控制、以螨治螨等绿色防控技术,项目实施取得了良好的经济效益、社会效益和生态效益。     

茄子砧木根系苯丙烷类代谢与抗南方根结线虫水平的关系

采用盆栽幼苗人工接种方法,研究南方根结线虫侵染对茄子砧木幼苗根系苯丙氨酸解氨酶(PAL)、酪氨酸解氨酶(TAL)及多酚氧化酶(PPO)活性和总酚、木质素含量的影响.结果表明,无论是否遭受南方根结线虫侵染,幼苗根系PAL、TAL、PPO活性及总酚、木质素含量均以托鲁巴姆显著高于赤茄.虽然南方根结线虫侵染使2个茄子砧木幼苗根系苯丙烷类物质含量及相关酶活性均有所增加,但以托鲁巴姆增幅较大,其PAL、TAL、PPO活性及总酚、木质素含量的最大增幅较对照分别高67.87%、82.13%、32.19%、62.14%和20.91%,而赤茄仅分别较对照高47.13%、45.52%、18.08%、35.38%、14.86%.整个侵染进程中,托鲁巴姆始终表现出强烈的抗性反应,而赤茄除在初次侵染前期表现出一定的抗性反应外,其余时间反应较弱,尤其在遭受二次侵染时,抗性反应显著低于初次侵染.表明苯丙烷类代谢产物及关键酶与茄子砧木抗南方根结线虫水平密切相关.     

日粮添加地衣芽孢杆菌对仔猪发酵床垫料理化性质及微生物群落的影响

试验旨在研究发酵床饲养模式下,猪日粮中添加地衣芽孢杆菌对发酵床的理化性质和微生物群落的影响。分别饲喂基础饲粮(对照组)、基础饲粮+杆菌肽锌+硫酸黏杆菌素(抗生素组)和基础日粮+地衣芽孢杆菌(益生菌组)的试验日粮。结果表明:饲粮中添加地衣芽孢杆菌能显著提高发酵床垫料蛋白酶活性(P0.05),对垫料脲酶活性和铵态氮含量无显著影响(P0.05);试验第15 d时,抗生素组的垫料放线菌数量显著低于对照组(P0.05);第35 d时,益生菌组的芽孢杆菌数量显著高于其他组(P0.05);第49 d时,益生菌组的芽孢杆菌数量显著高于抗生素组(P0.05),抗生素组的葡萄球菌数量比对照组显著降低(P0.05);益生菌组、抗生素组的大肠杆菌低于对照组,抗生素组的细菌总数、芽孢杆菌数量低于对照组,但差异均不显著(P0.05),饲粮抗生素一定程度上减少了垫料益生菌,但能有效减少垫料病原菌;各处理组间,垫料微生物DGGE的香农-威纳指数、均匀度均无显著差异(P0.05)。饲用地衣芽孢杆菌显著增加垫料中芽孢杆菌分布数量,提高垫料中垫料蛋白酶活,没有显著影响垫料细菌多样性指数,一定程度上提高粪便原位降解效率。     

硒对宁化牛角椒种子萌发及幼苗生长的影响

通过种子萌发和幼苗生长试验,研究了不同质量浓度的Na_2SeO_3对宁化牛角椒种子萌发及幼苗生长的影响。试验结果表明,适当浓度的Na_2SeO_3处理可以提高宁化牛角椒种子发芽势、发芽指数、种子活力指数、幼苗生长指标及PSⅡ反应中心活性。Na_2SeO_3处理宁化牛角椒种子的最适浓度为2 mg/L,Na2Se O3处理宁化牛角椒幼苗的最适浓度为5 mg/L,当硒浓度过大时,宁化牛角椒种子萌发和幼苗生长受到明显抑制,幼苗叶片PSⅡ反应中心活性下降。     

牛胚胎生殖细胞的分离与培养

以牛胎儿为材料,从原始生殖细胞（PGC）分离培养出胚胎生殖细胞（EG）,并进行传代和鉴定,对影响胚胎生殖细胞分离与培养的因素进行了探讨,研究发现以共培养方式培养牛原始生殖细胞时,原代培养都可以出现大量形态较好的EG细胞集落,说明同源的体细胞可以很好地支持PGC的生长和增殖,组织块培养细胞克隆数目较少,PGC很难增殖,不能形成典型的集落,传代也不理想,只传了一代.同时比较了不同传代方法对牛胚胎生殖细胞细胞传代的影响,发现消化＋机械分离法和消化＋吹打法都可以用于EG细胞的传代.消化＋吹打法操作简单,省时省力,也能够很好的保持细胞的增殖活力.原代培养的牛原代胚胎生殖细胞进行了细胞表面标志抗原SSEA-1,3,4鉴定,呈弱阳性.细胞体外培养可以分化为成纤维样细胞、上皮样细胞和类胚体.     

南宁地区犬细小病毒VP2基因的克隆及遗传进化分析

为了解广西南宁地区犬细小病毒（CPV）的流行现状与病毒变异情况,本试验对初步确诊为犬细小病毒病的12份阳性病料提取基因组DNA,以提取的基因组DNA为模板,通过PCR扩增VP2基因序列并测序,将12个阳性毒株样本VP2基因测序结果与GenBank中登录的17株国内外CPV分离株VP2基因进行同源性比对,采用Mega 7.0软件绘制遗传进化树,分析其病毒亚型和遗传进化情况。结果显示,成功扩增得到12个毒株样本的VP2基因片段,大小约1 755 bp,12株阳性样本毒株的VP2基因同源性在99.2%~100.0%之间,其中NN01与NN07、NN02与NN06同源性最高,为100.0%;阳性样本毒株与国内其他分离株VP2基因的同源性为97.6%~100.0%,其中NN08、NN10及NN04与CPV-ZJ1579同源性最高,均为100.0%,属于CPV-2a亚型;阳性样本毒株与国外代表性毒株同源性在98.1%~99.8%之间。遗传进化树分析表明,12个样本毒株中有3株属于CPV-2a亚型,3株属于CPV-2b亚型,6株属于CPV-2c亚型。这是继2018年初广西分离到CPV-2c型CPV后,首次发现南宁地区大规模流行CPV-2c亚型病毒,预示着CPV-2c亚型CPV在国内的流行正在增加。综上所述,广西南宁地区CPV-2a、CPV-2b与CPV-2c亚型并存,但CPV-2c亚型的比重比其他地区大,这也给该地区提供了新的防治信息,在实际CPV防控工作中除了对CPV-2a、CPV-2b等传统流行亚型的关注之外,更应该重视CPV-2c亚型CPV的防控。     

日粮中不同脲酶抑制剂和尿素水平对兔生产性能及屠宰性能的影响

兔日粮中添加1％～2％的尿素可以作为日粮蛋白质的补充,促进兔的生长;日粮中添加3％尿素后,试验兔的生长也比对照组略有加快,饲料报酬明显改善,试验过程中未出现尿素中毒现象。在尿素日粮中添加不同种类的脲酶抑制剂对兔的生长产生了不同的饲养效果,添加20mg／kg AHA并未对兔的生长产生明显的促进作用(P＞0．05),饲料报酬有明显改善(P＜0．05);添加50mg／kg AHA组兔的日增重和饲料报酬与尿素日粮对照组相比均有显著提高(P＜0．05),但不同剂量的AlIA之间无显著性差异。添加250mg／kg YUCCA极显著地促进了兔对尿素氮的利用(P＜0．01),但添加50mg／kg HQ使兔的生长受到了一定程度的抑制。     

茄子砧木对南方根结线虫抗性的鉴定与评价

为确定茄子砧木抗南方根结线虫的水平及其鉴定评价方法,以11份茄子砧木为试材,采用盆栽幼苗人工接种方法,测定了南方根结线虫对幼苗各器官相对生长量及相关抗性指标的影响,并进行了聚类分析及隶属函数分析。结果表明,南方根结线虫侵染引发的幼苗不同器官的相对生长量、不同抗性指标及其变异系数不同。利用变异系数较大的根结指数进行聚类分析结果与4个抗性指标综合分析结果完全一致,但与利用5个相对生长量指标及相对根系鲜质量聚类结果存在些微差异。通过综合鉴定评价,将供试茄子砧木材料分为抗病、耐病、中感、高感4个类群,其抗（耐）病能力强弱依次为：托鲁巴姆、托托斯加、圣托斯、刺茄、北农茄砧、台茄、刚果茄、赤茄、耐病VF、香瓜茄、琼野茄。