苏云金芽胞杆菌伴胞晶体毒素对小鼠体内猪蛔虫三期幼虫的作用及其免疫组织化学定位

将培养好的感染性猪蛔虫卵以每只5×103个虫卵感染小鼠,于次日以不同方式(灌胃、肌肉注射、静脉注射和腹腔注射)注入苏云金芽胞杆菌伴胞晶体蛋白(insecticidal crystal proteins,Icps),对照组静脉注射BSA(小牛血清白蛋白),每只0.5mL,连续3d。小鼠于第6天剖杀,肝脏分离幼虫,计算减虫率。取肝脏,以4%多聚甲醛固定48h,制作石蜡切片,应用免疫组织化学SABC法定位蛔虫幼虫体内的Icps。研究结果显示,静脉注射晶体蛋白毒素效果最好,减虫率达到72.7%;肌肉注射、灌胃、腹腔注射效果次之,分别为19.1%、14.6%、14.36%。免疫组织化学研究显示,Icps结合到虫体的体表及肠道。     

温氏附红细胞体16S rRNA基因的序列测定和分析

从自然感染附红细胞体的湖北黄牛无菌采集血液,分离附红细胞体并提取病原基因组,用血营养菌的16SrRNA基因的通用引物进行PCR扩增,得到长约1.5kb的扩增片段,将其克隆到pMD18-T载体后进行测序和分析.结果表明该片段全长为1 471 bp（GenBank收录号为AY946266）,同源性分析表明该序列与Neimark公布的温氏附红细胞体（AF016546）的16S rRNA基因序列同源性达到98.7%,证实该病原为温氏附红细胞体,从分子生物学水平证实了温氏附红细胞体在湖北省的存在.将该序列与5种支原体、14种血营养菌及边缘无浆体等的相应序列进行比较,建立系统发育树,结果表明温氏附红细胞体同边缘无浆体的关系较远,而与肺炎支原体组的亲缘关系较近.     

涂林吉（苏云金）芽胞杆菌伴胞晶体毒素对捻转血矛线虫虫卵的致死作用

从感染捻转血矛线虫山羊的直肠内取粪便，分离出虫卵，置单克隆板孔中，再往各孔中加入系列浓度的涂林吉（苏云金）芽胞杆菌（ＹＢＴ－１９５３）伴胞晶体毒素溶液，置２５℃培养２４ｈ。结果表明，当伴胞晶体毒素总蛋白为１２０μｇ／ｍＬ时，虫卵死亡率为９９．４％，０．６％未死的虫卵孵出的第１期幼虫也因毒素的作用而全部死亡。本研究表明，涂林吉芽胞杆菌（ＹＢＴ－１９５３）伴胞晶体蛋白对捻转血矛线虫虫卵具有较强的毒力。     

规模化猪场猪肠道寄生虫病的防治

规模化养猪即集约化养猪给养猪业带来了一个新的概念。他显著地提高了养猪劳动效益，为猪只的生产繁殖创造了一个良好的环境条件，并且可以有效控制一些传染病的发生。但另一方面由于密集饲养，畜舍常年温暖潮湿，为某些疾病，特别是寄生虫病的发生和传播创造了有利条件。寄生虫病会引起猪只的消瘦、死亡。母猪空怀、死胎、流产，猪只生长速度和饲料报酬明显降低，严重影响规模化养猪场的经济效益。     

猪蛔虫重组融合蛋白As37的免疫原性分析及应用

研究表明,猪蛔虫三期幼虫、分泌排泄物等天然抗原对宿主能提供有效的免疫保护,一些猪蛔虫融合大肠杆菌重组表达蛋白也可作为防控猪蛔虫病的候选疫苗.作者已克隆了猪蛔虫rAs37基因并进行了原核表达.并通过对重组融合蛋白As37进行免疫原性分析,显示其具有良好的免疫学活性.在此基础上进行了动物免疫保护性试验.并利用大肠杆菌高效表达的重组蛋白,建立ELISA方法对血清抗体水平进行了检测.为开发蛔虫疫苗.进一步有效防治猪蛔虫及研究猪蛔虫的免疫学诊断方法打下了基础.     

杰氏片形吸虫致亚洲象死亡一例

杰氏片形吸虫致亚洲象死亡一例姚宝安，章康民，王安华（华中农业大学）高华学，傅克领，廖先富（武汉市动物园）１９９３年６月武汉市动物园一头亚洲象名翁角，雄性，１３岁，出现精神沉郁、食欲减少、呼吸急促、有时阴茎脱垂，于５日上午９时突然倒地死亡。一、尸体剖检...     

苏云金芽胞杆菌晶体毒素引发的日本血吸虫超微结构改变

对人工感染日本血吸虫尾蚴45d的家兔作主动脉灌注冲虫，获得的成虫经Earle’s液洗涤，加入细胞培养板内，用含10％牛血清的RPMI-1640培养液于37C、5％CO2培养箱中培养，将30mg／L的苏云金杆菌BtYBT-1532和HD-1毒素蛋白分别加入各孔中，取培养1、2、4、8、24、48h的虫体，制作超薄切片进行透射电镜观察。结果发现：HD-1不引起血吸虫体壁超微结构的变化。YBT-1532毒素则引发血吸虫成虫表皮的各种变化，包括基质空泡化，褶嵴肿胀粘连，基膜和环肌肿胀，杆状分泌小体和指环体减少，感觉结构坏死，环肌溶解，体壁细胞胞质内细胞器溶解坏死，纵肌肿胀，褶嵴破渍；雌虫肠壁基质脂滴增多，出现坏死区域。上述超微结构的改变均随毒素感作时间的延续而渐进增重。     

羧化胶乳凝集试验检测边缘无形体血清抗体的研究

利用边缘无形体可溶性抗原，以化学交联的方式致敏羧化胶乳制成胶乳抗原，成功地建立了一种检测牛边缘无形体血清抗体的胶乳凝集试验(LAT)诊断方法。用制备的胶乳抗原分别检测瑟氏泰勒虫、双芽巴贝虫、衣原体、附红细胞体阳性血清，结果均为阴性；与边缘无形体标准阳性血清、免疫牛血清、流行区血清样品均呈明显的凝集反应。研究结果表明，LAT方法具有操作简单、快速、敏感性高、特异性强、成本低廉等优点，是一种特别适合于基层现场检测边缘无形体血清抗体的新方法。     

4℃保存的红细胞对东方巴贝斯虫体外培养的影响

在采用微气静相培养技术对东方巴贝斯虫进行体外培养的基础上,观察了在4℃保存不同时间的悬浮于199培养液中的染虫红细胞和健康牛红细胞用于东方巴贝斯虫体外培养时的虫体生长情况,结果表明:染虫红细胞在4℃保存20 d 仍可用于建立起始培养;健康牛红细胞保存6d,对培养影响不明显,而保存9d 即严重影响东方巴贝斯虫的生长繁殖.这一结果对东方巴贝斯虫的虫体保存和培养条件的选择均具有重要意义.     

东方巴贝斯虫的18S rRNA基因的扩增及系统发育研究

利用真核生物18S rRNA基因的PCR通用引物对寄生于中国水牛的巴贝斯虫（已命名为东方巴贝斯虫-BnbPsia orientalis）基因组DNA进行扩增，得到其18S rRNA全基因片段，测序后blast分析表明该虫种属巴贝斯虫无疑。将该基因1700bp长片段序列与GenBank中15种已知巴贝斯虫的相应序列进行比较分析，建立系统发育树。结果表明，东方巴贝斯虫与南非未定种的巴贝斯虫亲缘关系最近，与羊巴贝斯虫亲缘关系较近，与牛巴贝斯虫、双芽巴贝斯虫的亲缘关系较远。这一结果说明水牛东方巴贝斯虫是一独立种。