铜离子对鲤鱼的急性毒性研究

于水族箱内进行铜离子对鲤鱼的急性毒性试验。铜对鲤鱼 2 4h、 48h和 96h的半致死浓度分别为 1 67mg/L、 1 2 5mg/L和 0 77mg/L。安全浓度为 0 0 77mg/L。中毒鱼体表和鳃的粘液增多 ,鳃上附着有淡蓝色的絮状物 ,临死前出现痉挛症状。铜主要对鱼类的鳃、肠、肝、肾、脑造成较严重的损伤 ,特别是对鳃的损害与鱼的死亡有很大的关系     

盐度对暗纹东方鲀胚胎发育的影响

研究了不同盐度对暗纹东方鲀胚胎发育的影响，盐度为4和8的试验组中受精卵的发育历期、孵化率及初孵仔鱼24小时的存活能力和淡水相比均无显著差异。在盐度12及以上，绝大部分受精卵死亡，仅有极少数个体孵化出膜，且全为畸形并都在24小时内死亡；发育速度随着盐度的升高而变慢。因此，暗纹东方鲀胚胎正常发育所能耐受的盐度范围是0～8。     

3种工业废水对牙鲆胚胎的毒性效应

通过室内实验，研究了印染废水、电镀废水、农药废水3种工业废水及其混合物(等体积混合)对牙鲆胚胎的毒性效应。印染废水的主要有毒物为苯胺(20mg/L)和苯酚(24mg/L)，电镀废水主要有毒物为锌(1970mg/L)、铜(9mg/L)和铅(7．5mg/L)；农药废水及混合物主要有毒物为久效磷和亚磷酸盐。实验表明，这4种类型废水对牙鲆胚胎发育孵化有显著影响的最低体积分数分别为0．5％、0．15％、0．25％和0．25％；对牙Gf胚胎起始半数致死浓度(95％可信限，体积分数)分别为3．38％(2．29％—3．87％)、0．81％(0．71％—0．92％)、1．57％(1．37％—1．82％)和1．48％(1．24％—1，76％)。以牙鲆胚胎起始半数致死浓度(体积分数)为指标，这几种工业废水的毒性顺序为电镀废水＞农药废水＞印染废水。     

生物被膜形成对猪源沙门氏菌耐药性和毒力的影响

旨在探究猪源沙门氏菌生物被膜形成能力(成膜能力)对其耐药性和毒力的影响。通过96孔微量板法、K-B纸片法、微量稀释法和寇氏改良法,测定来源于腹泻仔猪的69株沙门氏菌的成膜能力、耐药表型、最小抑菌浓度(MIC)和对小鼠的半数致死量(LD_(50))。结果显示,69株沙门氏菌成膜阳性率为92.8%(64/69),以弱阳性(1+)为主(84.4%,54/64)。成膜菌对四环素(TET)和强力霉素(DOX)的耐药率最高,分别为76.6%(49/64)和75.0%(48/64);多重耐药率为15.6%(10/64),共有9种多重耐药谱,耐药模式70.0%为四环素-强力霉素-阿莫西林-氨苄西林-甲氧苄啶-复方新诺明-氟苯尼考(TET-DOX-AMX-AMP-TMP-SXT-FFC);TET和DOX对成膜菌的MIC较其浮游菌分别提高2倍～16倍和2倍～8倍。强阳性(3+)成膜菌对小鼠的LD_(50)值最大,与弱阳性(1+)之间差异显著(P0.05)。表明受试沙门氏菌普遍具有成膜能力,多重耐药范围广、耐药谱复杂,成膜菌对TET和DOX的耐药性与其成膜能力呈正相关,随着成膜能力增强,其LD_(50)值也随之增大。     

注射用重组抗肿瘤坏死因子-α人鼠嵌合单克隆抗体病毒去除/灭活工艺的建立及效果验证

旨在建立注射用重组抗肿瘤坏死因子-α人鼠嵌合单克隆抗体病毒去除/灭活工艺,并进行效果验证。膜过滤工艺去除病毒验证结果表明,膜过滤后的蛋白质回收率在98%以上,分子排阻色谱纯度在膜过滤前后没有明显变化;经测试,膜过滤后小鼠白血病病毒、小鼠微小病毒、呼肠孤病毒滴度的降幅均大于4 lg TCID_(50)/0.1 mL。低pH值孵放灭活病毒验证工艺结果表明,低pH值孵放前后蛋白质含量、分子排阻色谱纯度没有明显变化;测试结果表明,室温处理时间≥0.5 h,小鼠白血病病毒、伪狂犬病毒的滴度降幅均大于4 lg TCID_(50)/0.1 mL。该去除/灭活效果均符合《生物组织提取制品和真核细胞表达制品的病毒安全性评价技术审评一般原则》的要求,建立的工艺有效保证了产品的质量及安全性。     

副猪嗜血杆菌与猪丹毒丝菌混合感染病原的分离鉴定及生物学特性分析

从疑似副猪嗜血杆菌和猪丹毒丝菌混合感染病猪无菌采集心脏、肝脏、脾脏、肺及心包积液,采用常规分离培养法分离病原菌,通过染色镜检、生化鉴定、卫星试验和核酸测序同源性比对,确诊为副猪嗜血杆菌与猪丹毒丝菌混合感染。为进一步了解2株菌的生物学特性,测定了2株菌以及混合菌液的半数致死量(LD50)以及对常用抗生素的药物敏感性。结果显示:(1)将2株菌的序列与GenBank数据库中已发表序列进行同源性比对,副猪嗜血杆菌与猪丹毒丝菌的同源性各达到96%和99%;(2)致病性试验中,SPF鼠均在接种后24h左右开始死亡,从其心脏、肝脏、脾脏及肺均回收到攻毒菌,表明2株菌均为此次疫病的主要致病菌;(3)通过测定副猪嗜血杆菌和猪丹毒丝菌的LD50分别为5.28×109、3.58×104 CFU/mL,进一步证明二者具有较强毒性。根据2株菌的LD50等体积混合2种菌液注射SPF鼠,副猪嗜血杆菌与猪丹毒丝菌LD50均出现下调,分别为3.70×109、2.51×104 CFU/mL,表明混合感染增强了二者的致病力;(4)药敏试验结果显示副猪嗜血杆菌与猪丹毒丝菌对常用抗生素的耐药性与临床耐药谱相一致,未出现新的耐受药物;同时筛选出了2种菌的共敏感药物氧氟沙星和氟苯尼考,有利于对疾病的快速治疗与防控。     

硒化低聚氨基多糖对小鼠急性毒性试验

研究硒化低聚氨基多糖(LSA)的安全性,采用寇氏法和食品安全国家标准(GB 15193.3-2014)进行了急性毒性评价,计算了LSA对ICR小鼠的半数致死量(LD50)和95%置信区间,并通过小鼠给药后体质量、死亡情况、器官指数、病理变化评价LSA对小鼠的急性毒性。结果显示:LSA对小鼠灌胃给药的LD50为2 884 mg/kg,其95%可信限为2 378~3 497mg/kg。与空白对照组相比,各组小鼠心脏、肝脏、脾脏、肾脏指数差异不显著(P>0.05),最大剂量(10 000mg/kg)组肺脏和胸腺指数差异显著(P<0.05)。LSA急性中毒死亡小鼠各组织均有出血状况,其中肺部淤血较为严重,小肠内容物暗红色,个别出现肠臌胀。结果表明,LSA属于低毒物质,毒性作用小,可以对其药效进行进一步研究。     

猪链球菌宿主多样性调查

利用PCR方法对表观健康的猪肉、禽、鱼和狗随机抽取317份样品进行猪链球菌检测。结果显示,猪肉样品中4份呈阳性,阳性率为5.4%;禽口腔拭样中15份呈阳性,阳性率为10.6%;鱼和犬样品皆为阴性。进一步对阳性株进行分型鉴定,19株中9型7株,22型4株,1型、2型、16型及24型各1株,还有4株未知型号。对分离出来的19株菌株进行毒力岛GI4、GI8、GI12、毒力基因lin和rmp检测,结果为猪肉中分离出来的1株2型猪链球菌对GI8、GIl2、lin阳性。分别用从猪肉中分离出的2型、鹧鸪中分离出的9型、鸽子中分离出的9型、鸡中分离出的1型、研究室保存的2型菌株9801对斑马鱼进行攻毒试验,结果各半数致死量(LD_(50))依次为4.27×10~4CFU、2.72×10~4CFU、5.18×10~3CFU、2.25×10~4CFU、6.38×10~5CFU。     

氰戊菊酯经Tn细胞代谢前后毒性的变化

我们前期对氰戊菊酯经Tn细胞代谢后结构变化的研究表明,氰戊菊酯的苯氧基被羟基所取代,α-氰基从被氢基取。为了验证氰戊菊酯经Tn经代谢后毒性是否发生了改变,我们利用点滴法测定了氰戊菊酯及其经P450s修饰后的代谢产物对果蝇的毒性作用。结果显示氰戊菊酯对果蝇的半数致死量(LC₅₀)为14.062μg/ml,而最大浓度的代谢产物处理果蝇未见其毒性。我们的研究表明氰戊菊酯在体内经P450s代谢后的产物失去了对昆虫细胞的毒害作用,这一作用也可能是昆虫抗性产生的机制之一。     

禽腺病毒细胞病变观察和半数组织感染量测定

从贵州省的患病鸡群中分离出一株禽腺病毒，暂定名为ＨＳ－１。ＨＳ－１毒株鸭胚成纤维细胞上生长良好，第１代即出现明显的细胞病变，细胞培养上清液中病毒的血液效价达到２＾１３。采用交叉血凝抑制试验证实，贵州分离毒ＨＳ－１的标准毒株Ｖ－１２７属于同一血清型或相关血清型，其半数组织感染量经室０＾－２．５８／０．１ｍｌ。