海南发生木瓜茎腐病

木瓜 (ＣａｒｉｃａｐａｐａｙａＬ .)是重要的热带、亚热带水果 ,从播种到采收只需 9个月 ,可周年结实 ,味美且富含ＶＡ 和ＶＣ,深受生产者和消费者的亲睐。 2 0 0 2年 6月 ,在海南省乐东一木瓜生产基地发现一种木瓜新病害 ,发病率高达 5 0 % ,严重影响木瓜产量。经初步鉴定认为是一种由瓜果腐霉引起的木瓜茎腐病。1　症状木瓜幼苗期和成株期均可受害。发病初期 ,在茎基部近地面处产生水渍状斑 ,并流出白色胶状物 ,后组织崩解、缢缩折倒 ,整株萎蔫。湿度大时 ,病部产生白色棉絮状菌丝体 ,即为病菌菌丝、孢囊梗和孢子囊。2　病原菌菌丝发达 …     

研究型教学模式在农业植物病理学课程教学设计中的应用

研究型教学模式是一种新型的教学模式。把这种教学模式科学合理地应用在农业植物病理学课程的教学课件制作、课堂讲授、主题讨论、项目作业训练、实验课与课程实习、课后交流等教学环节中,将有助于提高该课程的教学质量。     

116株芒果炭疽病菌对咪鲜胺的敏感性测定

研究芒果炭疽病菌对咪鲜胺的敏感性,以期为该病的综合防治提供参考。从国内及国外芒果产区采集病样,分离、纯化芒果炭疽菌菌株,采用生长速率法测定芒果炭疽病菌对咪鲜胺的敏感性。结果表明,分离获得的116株芒果炭疽病菌菌株对咪鲜胺的EC50值为0.000 8~0.073 9μg/mL,平均值为0.012 4μg/mL,EC50最大值是最小值的92.4倍。不同采集地区和采集部位菌株对咪鲜胺的敏感性不同,美国夏威夷的菌株敏感性最低,广东的最高;分离自叶片的菌株敏感性最高,果实的最低。芒果炭疽病菌对咪鲜胺具有较高的敏感性,生产上仍具有较高的使用价值,但不同菌株的敏感性之间具有一定差异性,存在潜在的抗性风险。     

芒果炭疽菌致病力室内快速测定方法研究

为研究建立我国芒果炭疽菌室内致病力快速、稳定的测定方法,以芒果炭疽菌为供试菌株,以贵妃芒的离体枝条、叶片和果实为材料,采用不同的方法造成伤口后接种芒果炭疽病菌,在25℃条件下培养5d后观测各处理的发病程度。结果表明:枝条接种,经烫打和打孔处理的病斑长度显著大于其余7种处理的病斑长度,其差异性达显著水平;叶片正、反面烫伤、10针刺伤处理的病斑长度显著大于3针、6针和割伤3种处理的病斑长度,差异显著;果实接种,经烫打、烫伤、打孔、10针刺伤处理的病斑长度显著大于3针、6针、环割3种处理的病斑长度,差异显著。从试验材料的选取、试验操作的难易度与稳定性及病斑的大小等方面综合分析认为,以直径为5mm菌饼接种在10针刺伤的古铜叶反面,在相对湿度100%、室温25℃条件下培养5d后的病斑直径可以作为评价病原菌致病力的依据。     

芒果胶孢炭疽菌漆酶lac1与致病力的相关性分析

为了明确芒果炭疽病病菌(Colletotrichum gloeosporioides)漆酶与该菌侵染相关致病因子之间的关系,本文以愈创木酚为底物筛选获得的高产漆酶菌株A2为材料,测定了漆酶粗提液对芒果炭疽病病菌致病力的影响,并通过半定量RT-PCR法,分析了在不同侵染时段漆酶基因lac1和其他酶基因的表达。结果表明,漆酶粗提液单独不能致病,但能促进该病原菌在寄主中的扩展;在侵染过程中,lac1表达与黑色素合成酶(thd和scd)基因表达相关性更高,与细胞壁降解酶(ecg和pel)基因表达也有一定相关性,但不及前者高。芒果胶孢炭疽菌分泌的漆酶有助于该菌在侵染芒果过程中的扩展,且对侵染相关致病因子黑色素合成酶和细胞壁降解酶基因的表达有一定影响。初步推测,漆酶lac1除了能通过降解芒果组织中的酚类物质、促进病原菌的扩展之外,也可以通过干扰与致病力相关的黑色素合成和细胞壁降解酶的产生来影响芒果胶孢炭疽菌致病力。     

GFP 标记杧果露水斑病病原菌及其侵染部位的确定

由枝状枝孢霉（Cladosporium cladosporioides）侵染引起的杧果露水斑病是近年杧果上新发生的病害,主要为 害果实。明确该菌能否穿透果皮侵入果肉,可为防治该病害选择合适的药剂提供依据。本 研 究 将 绿色荧光蛋白基因 gfp 和潮霉素抗性基因 hygB 表达盒插入了经定点突变后 Cl. cladosporioides 的 ITS 序列中,成功构建了 pITGH 重组载 体,将其用 PEG 介导方法转化杧果露水斑病菌原生质体,获得了在菌丝、分生孢子、萌发的分生孢子中稳定发出绿色 荧光的 GFP 标记菌株,该标记菌株与野生菌的菌落形态、颜色及致病力无明显差异,生长速度明显慢于野生菌。用该 标记菌株观察侵染过程,发现杧果露水斑病菌可以在杧果果皮上侵染和扩展,但不能扩展至果肉中。该结果为选择农 药类型提供了依据,也为进一步研究该病菌在活体杧果上的生物学、预测病害和通过观察定殖情况确定杧果品种的抗 病性等奠定了良好的材料基础。     

4种抑菌化合物影响杧果炭疽病菌漆酶的转录

[目的]通过探究茶多酚、白藜芦醇、丁香酚、氟康唑4种化合物对杧果炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides)的抑菌活性及对病原菌漆酶基因家族成员转录水平的影响,为该家族在寻找杧果炭疽病菌潜在抑菌化合物提供参考。[方法]通过菌丝生长速率法测定4种抑菌化合物对杧果炭疽病菌菌丝生长、分生孢子萌发和附着胞形成、黑色素合成的影响;同时测定这4种抑菌化合物对13个漆酶家族成员基因表达量和对胞外漆酶酶活的影响。[结果]在菌丝生长方面,茶多酚、白藜芦醇、丁香酚和氟康唑对杧果炭疽病菌菌丝生长的EC₅₀分别为15 010、1 109.88、308.26和163.52 (mg·L^-1)。从分生孢子萌发率和附着胞形成率来看,这4种抑菌化合物均对分生孢子萌发起促进作用,而都抑制了附着胞的形成。在黑色素合成影响来看,茶多酚和白藜芦醇均抑制黑色素合成,而丁香酚和氟康唑均促进黑色素合成。qRT‐PCR结果显示,100 mg·L^-1的茶多酚和168 mg·L^-1的白藜芦醇对2/13漆酶家族成员转录调控有抑...     

芒果炭疽病菌内切葡聚糖酶基因CgEg1B的克隆与敲除载体构建

芒果炭疽病（Colletotrichum gloeosporioides）是为害芒果的重要病害之一，为了明确内切葡聚糖酶CgEg1B与芒果炭疽病菌致病力的关系，本实验以芒果炭疽病菌DNA为模板，利用同源克隆技术扩增CgEg1B，对其序列特征、蛋白的保守结构域进行分析，并借助In-Fusion?HD Cloning Kit技术进行敲除载体构建。结果表明，该基因DNA和cDNA全长分别为1077 bp、1020bp，编码区有1个内含子（大小为57bp），推测编码339个氨基酸，其分子量约为37.13 kDa，等电点PI为5.11。与NCBI网站中已公布的基因进行Blastp比对，发现该序列与鳄梨炭疽菌（C.gloeosporioides）（EQB54542.1）的内切葡聚糖酶基因相似性均为99%；该基因的敲除载体pCgEg1BGH-1构建成功。CgEg1B基因具备真菌内切葡聚糖酶基因家族的序列特征，推测CgEg1B基因可能与芒果炭疽病菌的侵入、定植和致病性有关。     

露娜森和拿敌稳对芒果采后炭疽病的防治效果

为探索芒果花果期喷施杀菌剂而实现防控采后炭疽病的方法,选取露娜森和拿敌稳杀菌剂开展采后炭疽病防治试验。设计每种杀菌剂2个施药剂量梯度,咪鲜胺试验区,另设空白试验,共6个处理,比较各药剂处理间病情指数。试验结果表明,本实验所选用的药剂对芒果花果期的嫩叶、花、幼果未见药害,也不影响芒果的后熟,且采后7天时,花果期喷施1500倍浓度的露娜森的防效与采后浸果咪鲜胺的防效相当、防效达72.73%,货架期可维持7天,750倍浓度拿敌稳次之,对芒果炭疽病的采后储藏期有较好的防治效果,明显延长了芒果的货架期、储藏期。由于露娜森中含有新型的琥珀酸脱氢酶抑制剂——氟吡菌酰胺的原因,其作用机理是抑制了琥珀酸脱氢酶的活性。琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂通过干扰复合体Ⅱ上4个亚基来抑制线粒体的功能,阻止其产生能量,抑制病原菌生长,与咪鲜胺处理的结果一致,具有一定的推广应用价值。     

二氧化氯对黄瓜霜霉病的防治效果试验

探讨二氧化氯对黄瓜霜霉病的防治效果，以72% 霜脲·锰锌可湿性粉剂和清水处理为对照，在温室大棚内，开展不同浓度的二氧化氯对黄瓜霜霉病的防治效果试验。结果显示，3个浓度的二氧化氯处理组对黄瓜霜霉病均有防治效果，二氧化氯1000倍液处理组（1125g/hm2）病情指数和防治效果分别为8.05和75.25%，防治效果良好；各二氧化氯处理组的黄瓜叶片有药害斑点，后期能够恢复，各处理组黄瓜植株长势无明显差异；各二氧化氯处理组黄瓜结瓜数、产量均与清水处理组差异显著。结果表明，二氧化氯对黄瓜霜霉病具有较好的防控效果，有应用前景。