Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒三种定量检测方法的比较与评价

为了解决Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒(grass carp reovirus genotypeⅡ,GCRV-Ⅱ)含量和滴度测定方法的选择问题,本研究利用荧光定量PCR(quantitative PCR,qPCR)、免疫过氧化物酶单层细胞试验(immunoperoxidase monolayer assay,IPMA)和间接免疫荧光试验(indirect fluorescent assay,IFA)三种方法来对GCRV-Ⅱ进行检测和含量测定,从特异性、敏感性、可靠性和检测结果的相关性来比较这三种方法对于GCRV-Ⅱ定量检测的差异。结果显示:qPCR、IPMA和IFA三种方法检测GCRV-Ⅱ的最低限分别为8.6、86和86拷贝/μL,qPCR的检测灵敏度比IPMA和IFA高一个数量级;特异性分析表明,qPCR、IPMA和IFA三种方法均只能检测出GCRV-Ⅱ型分离株,而其它病毒和未感染病毒的阴性对照细胞均为检测阴性,表明这三种方法均具有较高的特异性;3种方法分别检测60份已知临床样品,qPCR、IPMA和IFA的诊断敏感性和特异性分别为96.7%(29/30)和100%(30/30)、100%(30/30)和93.3%(28/30)及100%(30/30)和100%(30/30);三种方法对于GCRV-Ⅱ的定量检测结果中病毒拷贝数和病毒滴度之间具有较好的相关性,其拟合曲线分别为:Y(IPMA,TCID_(50)/mL)=23.629X-536 174(qPCR,拷贝/mL)(R~2=0.996)、Y(IFA,TCID_(50)/mL)=20.318X-575 062(qPCR,拷贝/mL)(R~2=0.995)和Y(IPMA,TCID_(50)/mL)=1.161X-1 176(IFA,TCID_(50)/mL)(R~2=0.999)。结果表明,GCRV-Ⅱ病毒滴度的测定,除了用IPMA和IFA外,也可以采用qPCR方法通过测定病毒的核酸拷贝数来测算其病毒滴度。     

肉兔标准化生产中主要疫病免疫程序及其应用效果

笔者分析了目前我国肉兔工厂化、规模化生产中在主要疫病防疫方面存在的主要问题及其所产生的危害,并针对我国的国情和生产规模等方面的不同,制定了规模化标准化肉兔生产中主要疫病的防疫程序。     

植物免疫诱导剂在草莓中的应用情况

为了助力实现草莓的安全生产,对一类能诱导植物产生免疫防御反应的植物免疫诱导剂在草莓中的应用情况进行综述。主要阐述了植物免疫诱导剂的种类、诱导机理及其在草莓栽培上的应用现状,发现:植物免疫诱导剂能促进草莓生长和发育、诱导抗病性、提高产量、改善果实品质、提高耐贮性等,从而减少了化学农药的使用,有利于草莓高质量生产,应用前景广阔。     

富硒乳酸菌中药制剂对育肥猪免疫、抗氧化能力的影响

本试验旨在研究富硒乳酸菌中药制剂(LSTCM)对育肥猪免疫、抗氧化能力的影响。选取日龄相近、体重(57±1.50)kg、体况良好的杜×长×大三元杂交育肥猪60头,分为4个组,每组3个重复,每重复5头猪。对照组饲喂基础日粮,试验组分别在基础日粮中添加0.1%、0.3%、0.5%的LSTCM(硒含量为100 mg/kg)。预试期10 d,正试期60 d。结果表明:与对照组相比,0.3%、0.5%LSTCM组IgA含量极显著提高,而IgG及IgM含量显著提高;与对照组相比,0.3%LSTCM组血清、肌肉、肝脏中总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性均提高(P<0.01),肾脏中T-AOC、SOD活性均提高(P<0.01),GSH-Px活性提高(P<0.05),血清、肌肉、肾脏中丙二醛含量均降低(P<0.01),肝脏中降低(P<0.05)。综上所述,富硒乳酸菌中药制剂能显著提高育肥猪免疫能力以及血清及组织的抗氧化能力。     

异地晒黄烟种质资源的引进与鉴定评价

摘 要：为育成优质、抗病、高产的晒黄烟新品种，从异地引入黑龙江省20份晒黄烟种质资源，通过对其遗传多样性及抗病性的对比鉴定，筛选出适宜本地区的优良亲本。分析结果表明：其中7份优异的种质资源可作为亲本材料进行新品种的选育，其名称为青梗、齐市晒烟、黄烟-1、黄烟-2、高产烟-1、包盖烟-1、南雄烟-2。选取10个不同的数量性状进行对比分析，其香农-威尔指数在4.1~4.3之间，表明各种质资源的表型性状具有较大的遗传多样性。筛选出的优异种质资源极大的丰富了本地育种材料，有利于扩大遗传背景，提高育种效率。     

绿茶粉改善免疫应激小鼠肠道屏障的作用机制

为探究绿茶粉改善免疫应激小鼠肠道屏障功能的作用机制。选取72只三周龄SPF级C57BL/6雄鼠,对其适应性喂养3 d后随机分成Ⅰ组(阴性对照)、Ⅱ组(阳性对照)、Ⅲ组(添加抗生素)、Ⅳ组(添加1%绿茶粉+茶多酚)、Ⅴ组(添加2%绿茶粉+茶多酚)和Ⅵ组(添加3%绿茶粉+茶多酚),每组3个重复,每个重复4只。在小鼠45 d时,Ⅰ组腹腔注射生理盐水,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ组按10μL/g的剂量腹腔注射大肠杆菌脂多糖。注射5 h后采集血液及组织器官。采用RT-PCR测定肠上皮紧密连接蛋白ZO-1、Occludin和Claudin蛋白相对表达量; ELISA法测定血清中IgA、IgG、IgM、肠道sIgA和血浆内毒素含量。结果表明,与Ⅱ组相比,添加茶多酚的绿茶粉能显著降低小鼠血浆内毒素的含量,促进血清中IgA、IgG、IgM和肠道sIgA分泌,同时增加肠上皮紧密连接蛋白ZO-1、Occludin和Claudin蛋白相对表达量。本研究表明,绿茶粉可以通过促进肠上皮紧密连接蛋白ZO-1、Occludin和Claudin蛋白相对表达量,修复肠道屏障,增强免疫应激小鼠的体液免疫,从而减轻肠道炎症,达到保护肠道的作用。     

纳米酶免疫层析试纸条法检测玉米褪绿斑驳病毒

【目的】建立纳米酶免疫层析试纸条(Nanozyme Immuno-chromatographic Strip Assay, NISA)检测玉米褪绿斑驳病毒方法。【方法】采用双抗夹心法,将纳米酶标记的鼠抗体IgG与McmV结合后,再与硝酸纤维素膜质控线上的鼠抗体结合,二氨基联苯胺(Diaminobenzidine, DAB)滴加显色。【结果】采用研制的NISA和反转录PCR法(RT-PCR)对玉米褪绿斑驳病毒梯度稀释的研磨液进行检测,灵敏度分别为10^-7和10^-5;用其他4种病毒作对照进行特异性实验,无交叉反应;用该试纸条对供试样品进行检测,并以RT-PCR方法及基因测序方法对检测结果进行验证,三者检测结果一致。【结论】该试纸条检测McmV的灵敏度高、特异性强,可用于科研、农业生产单位和口岸机构对McmV的检测。     

禽大肠杆菌病及其中西医防治

近几年来,随着科学技术不断发展,国内外学者研制出了许多先进的疫苗,在防止畜禽传染病发生及传播方面取得了很大成绩,使养殖业有了长足的进步,在丰富人们的饮食结构及提高养殖业收益方面效果明显。但即便如此,由于养殖环境的污染、药物使用方法不恰当、免疫程序不正确、畜禽机体的状态、免疫抑制病、应激因素、饲料污染及营养、动物福利等诸多方面的原因,仍然有许多养殖场发生了不同类型的传染病,使养殖业遭受了巨大的经济损失。据山东省菏泽市动物医院近两年来的门诊资料统计,在诸多的传染性疾病中。     

猪场复产中的提阈值和复产能与中草药的应用

非洲猪瘟暴发一年多来,国内生猪产能损失过半,猪价高涨。养猪的高利润驱使一些清场的猪场投入复产,但鲜有成功案例。依据避免疫情再次暴发和持续生产的标准,猪场复产成功的关键在于净化猪场病毒、提高猪群感染阈值和恢复产能。中药具有促生长、增强繁殖能力、调理免疫能力、抗菌、抗应激和调理代谢等功能,在增强猪群非特异性免疫、提高感染阈值、减少母猪繁殖障碍和提升母猪繁殖性能等方面具有巨大的应用价值。