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诺卡氏菌(Nocardia seriolae)是近年来海淡水养殖鱼类频发慢性传染病的病原菌。该研究通过引物扩增得到全长1 254 bp、编码417个氨基酸的诺卡氏菌毒力因子mce1A基因的全序列。该基因编码蛋白质的分子量约为43.98 k D,理论等电点5.14,含有161个疏水性氨基酸,疏水性平均值为0.044,为疏水性蛋白,具有α-螺旋、β-折叠和无规则卷曲3种结构。经预测,Mce1A有MCE、DUF3407区域、OM_asym_Mla D、Mtu_fam_mce、Mla D 5个结构域,彼此交叠,含有公共区域。根据Mce1A氨基酸构建的系统进化树可以发现诺卡氏菌和新星诺卡氏菌的亲缘关系最近。构建p ET32a-mce1A重组质粒并转化至大肠埃希菌BL21中,得到的重组蛋白的相对分子量约63 k D。温度、IPTG浓度对重组蛋白表达量没有影响。该研究为进一步研究Mce1A的致病机制奠定了基础。 相似文献
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以添加0、0.2%、0.4%、0.8%和1.6%半乳低聚糖(GOS)的饲料投喂军曹鱼(Rachycentron canadum)8周,研究GOS对军曹鱼生长、部分血清免疫和生化因子的影响。当饲料中GOS的添加水平低于0.4%时能促进军曹鱼生长,但影响不显著(P〉0.05)。在饲料中添加适当水平的GOS对军曹鱼血清溶菌酶和超氧化物歧化酶(SOD)活性有显著的促进作用,而对过氧化氢酶(CAT)活性有显著的抑制作用。GOS对军曹鱼血清生化因子如总蛋白、白蛋白、球蛋白、总胆红素和直接胆红素的浓度有显著影响,对间接胆红素的影响不显著;只有GOS为0.2%的试验组血清总胆固醇浓度显著高于对照组,而0.4%的试验组血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)浓度显著低于对照组;当添加量低于0.8%时,碱性磷酸酶(AKP)活性随饲料中GOS含量增加而降低。结果表明,在饲料中添加适当水平的GOS有利于军曹鱼的生长,并且能够改善军曹鱼的免疫功能和健康状况,其最佳添加量为0.2%~0.4%。 相似文献
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供试中草药制剂(TCM)由烘干的板蓝根、大青叶、连翘、黄芪、藿香和沙打旺等6种原料药等量组成,5种供试饲料中TCM的添加量分别为0、0.1%、0.2%、0.4%、0.8%,研究了TCM对军曹鱼生长性能、全鱼营养组成及免疫的影响。结果表明:(1)养殖4周后,各组除了成活率没有显著性差异外,0.1%TCM添加组军曹鱼的增重率和饲料利用率显著优于其他组,且随着TCM添加量的升高,增重率呈下降的趋势而饲料系数升高。试验8周结束时,增重率与前4周的结果相似,对照组的成活率显著低于其他组。(2)投喂不同剂量TCM的军曹鱼肥满度没有显著差异,但肝体比和脏体比随着剂量的增加而呈下降趋势;饲料中添加TCM对军曹鱼全鱼的的水分、粗蛋白和灰分没有显著影响,但0.4%、0.8%TCM添加组的全鱼脂肪含量显著降低。(3)添加TCM可有效提高鱼体的溶菌酶活力和白细胞杀菌活力,随着TCM添加量的升高,溶菌酶活力呈上升趋势,白细胞杀菌活力投喂组显著高于对照组,但不同剂量的TCM添加组影响不显著。添加TCM可有效降低鲨鱼弧菌对军曹鱼的致死率。 相似文献
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本试验采用同源克隆和末端快速扩增(RACE)的方法,得到714 bp的军曹鱼(Rachycentron canadum) Hepcidin基因全长cDNA序列。该序列包括213 bp的5'末端非编码区(UTR)、228 bp的3'UTR及273 bp的开放阅读框(ORF),编码90个氨基酸,预测其蛋白分子质量约为10.03 ku,等电点为7.54,预测的蛋白包括信号肽、前肽和成熟肽。通过构建Hepcidin氨基酸序列的系统进化树并进行氨基酸同源性比对,结果显示军曹鱼与已知鱼类及哺乳动物Hepcidin氨基酸的同源性在24.4%~85.6%之间。实时荧光定量PCR(quantitative Real-time PCR,qRT-PCR)检测结果显示Hepcidin基因在正常军曹鱼组织中均表达,但表达量在各个组织中有所不同,其中以肝脏表达量最高。经脂多糖(LPS)和甲醛灭活的鲨鱼弧菌(Vibrio carchariae)刺激后,肝脏、头肾、脾脏中Hepcidin基因表达均上调。 相似文献
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为了解和分析南海沿岸地区临床分离的哈维弧菌(Vibrio harveyi)菌株耐药谱多样性,采用K-B法对84株哈维弧菌分离株进行了12种抗生素的敏感性实验,并通过聚类分析对分离菌株耐药性进行研究,探讨其抗生素耐药性同菌株时空分布的关系。实验结果显示,84株哈维弧菌的耐药谱型数量为26种,谱型丰富度为31.0%;多重耐药谱型数量(耐药种数3种以上)为13种,占总耐药谱型数量的50.0%,谱型丰富度达59.1%。海南、广东、广西、福建的分离株分别包含有18种、15种、3种、1种耐药谱型,4个地区均具有J型(FUR/AMO)耐药谱;2007―2012年各年份菌株耐药谱型为:2007年2种(J、M,耐2种抗生素)、2010年4种(A、B、J、M,耐5种抗生素)、2011年24种(除Y、Z外的A-X耐药谱型,耐7种抗生素),2012年26种(包括Y、Z耐药谱型,耐8种抗生素)。聚类分析将实验菌株分为i~vi共6个亚群,进而聚类为Group I、Group II两个组群;各亚群菌株具有独特的耐药谱型,耐药谱型分别是N、P、T、U、Y(i亚群),R、S(ii亚群),K、P(iii亚群),F、H、O、X、V、W(iv亚群),E、G、Q(v亚群),C、L、Z(vi亚群);两个组群菌株没有共同的耐药谱型。研究结果表明,哈维弧菌分离株耐药谱型多样,谱型丰富度较高,来源不同的菌株耐药谱型存在差异,聚类分析方法能够根据耐药性情况有效地对菌株分型。 相似文献
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赤点石斑鱼神经坏死病毒MCP基因原核表达条件优化 总被引:2,自引:0,他引:2
[目的]优化赤点石斑鱼神经坏死病毒的主衣壳蛋白(MCP)基因的原核表达条件。[方法]采用RT-PCR技术扩增出赤点石斑鱼神经坏死病毒MCP基因,构建重组表达载体pRSETA-MCP,以其转化大肠杆菌BL21(DE3)plysS,在不同培养基、温度、pH值条件下进行诱导表达。[结果]重组菌在SOB和LB培养基、pH值7.0、37℃条件下表达量最高,所得的融合蛋白分子量约为44.5 kD。[结论]该研究为RGNNV-MCP疫苗研制奠定了基础。 相似文献