中草药与益生菌在水产养殖中协同作用的研究进展

中草药与益生菌以其安全、高效、无副作用等优点,在水产养殖病害防控及机体免疫力提高方面展示了广阔的应用前景,两者均具有调控水质、促进生长、提高免疫力和调节微生物菌群等功能。中草药和益生菌在理论基础及应用中表现出极大的一致性,且有较好的协同作用,中草药富含的多种激素、氨基酸、糖类等可有效促进益生菌的增殖,而益生菌的消化代谢功能对中草药药效作用的发挥具有重要作用,两者之间的互作为联合应用奠定了良好基础,也开拓了一种全新的协同应用方式。本研究中就中草药与益生菌在水产养殖中协同作用的研究进展进行了综述,并对两者未来的应用前景和发展趋势进行了展望。     

施氏鲟抗热应激中草药免疫制剂的筛选

为筛选适用于鲟使用的抗热应激中草药免疫制剂,研究了中草药方剂对常温及高温应激情况下施氏鲟Acipenser schrenckii Brandt免疫性能的影响。在22℃养殖水温下,将1~+龄施氏鲟分为4个受试组,每组设两个平行,每个平行放30尾鲟,选取当归、鱼腥草和一种自组中草药复方(方四),分别以0.30、0.54、0.80 g/kg(体质量)的给药剂量对试验鲟口灌给药,每日1次,连续给药14 d,同时设立口灌蒸馏水的对照组;停药24 h后,每组取半数试验鲟于高温30℃下热刺激2 h后,与常温试验组共同采样,对试验鲟血清中蛋白含量、细胞吞噬和不同组织中溶菌酶活性进行测定。结果表明:方四和鱼腥草能有效抑制机体高温应激后血清中蛋白含量的异常增高;常温情况下,当归具有提高试验鲟细胞吞噬功能的作用;而方四不仅可以有效提高高温应激后机体的细胞吞噬作用,还可有效提高肝、血清、鳃和胃组织中的溶菌酶活性,并能在高温应激后保持其效果。研究表明,高温应激情况下,方四能有效保持施氏鲟机体内环境平衡,并促进机体细胞的吞噬作用和溶菌酶活性,可作为鲟抗热应激中草药免疫制剂进行深入研究。     

甲苯咪唑在鲫体内的药动学及残留消除研究

在水温(20±0.5)℃下,给体质量(50±10)g的鲫Carassius auratus单剂量口灌20mg/kg(体质量)甲苯咪唑后0.25h、0.5h、0.75h、1h、1.5h、2h、4h、6h、8h、12h、24h、36h、48h,及72h,采集鲫血浆,利用高效液相色谱法测定血浆中药物的浓度,药动学DAS3.0软件进行数据分析和处理,研究甲苯咪唑在鱼体内的吸收和消除规律。结果表明:单次口灌给药后,甲苯咪唑在血浆中的药时关系符合一级吸收二室开放模型。每天给药一次,连续3d,氨基甲苯咪唑(MBZ-NH2)于25d后低于检测限(0.0465μg/m L)。在本试验条件下,建议休药期不低于25d。     

三北地区鱼源气单胞菌的分离鉴定与药敏试验

选取三北地区鲤、鲫、草鱼、大西洋鲑等鱼体内分离到的气单胞菌共16株,结合革兰氏染色、氧化酶反应和分子生物学方法对其进行鉴定后,采用K-B药敏纸片法测定16株菌对10类25种药物的敏感性。结果表明:16株菌均为革兰氏阴性、氧化酶阳性细菌;Blast比对分析发现实验菌株的16S rRNA序列分别与Gen Bank数据库中维氏气单胞菌、嗜水气单胞菌、温和气单胞菌和杀鲑气单胞菌的不同菌株的16S rRNA基因序列同源性较高,相似性达95%以上;系统发育树显示16株菌分别与维氏气单胞菌、嗜水气单胞菌、温和气单胞菌和杀鲑气单胞菌的不同菌株聚为一支,而与肠杆菌、志贺菌和弧菌分支较远,从而判定为维氏气单胞菌、嗜水气单胞菌、温和气单胞菌和杀鲑气单胞菌;16株分离菌中有3株维氏气单胞菌、4株嗜水气单胞菌、3株温和气单胞菌和6株杀鲑气单胞菌;药敏试验中16株气单胞菌对氨苄西林、青霉素G、阿莫西林、三甲氧苄氨啶、复方新诺明、磺胺异噁唑、氯霉素、利福平具有较高的耐药性,耐药率达95%以上,对氟喹诺酮类药物普遍较敏感,不同菌株之间的耐药谱存在很大差异。为气单胞菌的鉴定及三北地区淡水鱼细菌病的药物防治提供科学依据。     

施氏鲟抗氧化中草药方剂的筛选

采用口灌方法研究了22℃养殖条件下,当归、鱼腥草及一种自组中草药复方(方一)的水煎剂对1+龄施氏鲟组织中抗氧化功能相关的酶活性及活性物质含量的影响。每受试组设两个平行,每个平行30尾受试鲟,按照当归、鱼腥草及方一分别为0.3,0.54,0.8 g/kg体质量的给药剂量每日口灌给药一次,连续给药14 d,同时设立口灌蒸馏水的对照组。停药24 h后,每组取半数受试鲟高温30℃热刺激2 h后,与常温实验组共同采集血液及肝脏样品,对样品中SOD和NOS活性,MDA和NO含量进行测定。实验结果表明,所选方剂均对受试鲟血液及组织中抗氧化相关活性物质含量和酶活性有一定影响,鱼腥草和方一效果尤其突出,可有效增强受试鲟SOD活性,降低MDA含量,并对NO含量和NOS活性有一定调节作用,且在高温应激条件下仍能保持其效用,可作为鲟抗氧化中药制剂的备选药物,进行进一步的筛选和深入优化。且鱼腥草资源丰富、价格低廉、使用简单,具有良好的应用前景和优势。     

两种给药方式下伊维菌素在虹鳟体内的药物代谢动力学研究

研究旨在通过口灌和腹腔注射两种给药方式,研究伊维菌素在虹鳟体内的药动学特征。采用高效液相色谱-紫外检测法（HPLC-UV）研究了以0.3 mg/kg剂量分别单次口灌和腹腔注射伊维菌素后,药物在虹鳟体内的药代动力学特征。结果表明：口灌给药方式下,伊维菌素在虹鳟血浆、肌肉中的药物浓度和时间关系符合一级吸收二室开放模型,而在肝脏、肾脏中符合一级吸收一室开放模型;腹腔注射给药方式下,伊维菌素在虹鳟血浆、肌肉、肝脏和肾脏中的药时关系均符合一级吸收一室开放模型。口灌给药后,伊维菌素在血浆中主要的药动学参数：AUC为123.709 mg/(L?h)、Ka为3.749 h^-1、t_1/2ke为 466.569 h、T_max为0.454 h、C_max为0.319 mg/L。腹腔注射给药后,伊维菌素在血浆中主要的药动学参数：AUC为52.560 mg/(L?h)、Ka为5.033 h^-1、t_1/2ke为103.236 h、T_max为1.317 h、C_max为0.350 mg/L。说明在两种给药方式下,伊维菌素在虹鳟体内的药动学特征存在明显的差异,伊维菌素在腹腔注射给药方式下吸收和消除速率均较口灌给要快。     

抑制山女鳟源水霉菌菌丝及游动孢子生长的药物筛选

研究了药物对山女鳟水霉病病原的抑制及杀灭效果,即中草药抑制水霉菌丝生长和抗水霉制剂抑制孢子的生长。实验选用过氧化氢、甲醛等6种常用抗水霉制剂及地肤子、蛇床子等16种中草药单方和2种复方(T1、T2)分别采用孢子计数法和琼脂平板扩散法对水霉游动孢子及菌丝的体外抑菌效果进行研究。研究结果显示,过氧化氢和甲醛抑孢子的效果优于孔雀石绿,而检科Ⅰ号、亚硝酸钠和过氧乙酸的抑制效果不及孔雀石绿。石榴皮和复方T1能有效抑制菌株SN的菌丝生长;地肤子、肉桂、柠檬、苦参、大蒜、黄精、茴香和菖蒲对菌株几乎无抑菌作用;黄芩、虎杖、金银花、苦楝皮、复方T2、蛇床子、土槿皮和大黄均有较好的抑制作用。实验为合理的筛选有效抑山女鳟水霉菌药物及制定科学有效地抗霉剂使用方法提供理论依据。     

氟苯尼考在感染鲁氏耶尔森氏菌的西伯利亚鲟体内的药效学

通过构建鲁氏耶尔森氏菌(Yersinia ruckeri)感染西伯利亚鲟(Acipenser baeri)病理模型,设立阴性对照组(不攻菌不给药)及阳性对照组(攻菌不给药),比较研究了高(50 mg.kg-1)、中(20 mg.kg-1)、低(5 mg.kg-1)氟苯尼考剂量治疗组和氯霉素(10 mg.kg-1)对照组西伯利亚鲟体内的药效学。连续给药3天后,阴性对照组和阳性对照组累计死亡率分别为0%和50%,表明病理模型构建成功;而氟苯尼考低、中、高剂量组和治疗对照组累计死亡率分别为30%、0%、0%、10%。愈后各实验组鱼血液中均无细菌感染;除阴性对照组外,鱼肝、肾组织中均可分离到鲁氏菌,但不致鱼死亡。实验结果表明,氟苯尼考对感染鲁氏耶尔森氏菌的西伯利亚鲟有较好的治疗作用,药效优于氯霉素,可用于治疗鱼类细菌性疾病。     

三种中草药方剂对鲫部分生化指标的影响

在水温20℃下研究了在饲料中分别添加3种中草药方剂(复方A由甘草、紫草等组成;复方B由生鸡内金、生牡蛎、山药等组成;复方C由茵陈、板蓝根、黄芩等组成),对平均体质量37.09±4.09g鲫(Carassius aura-tus)肝胰脏和血液中部分生化指标的影响。每组15尾,每天按照鱼体质量的2.0%投喂饲料,对照组投喂不含中草药添加剂的基础饲料。实验结束后,取样测定鱼体肝脏和血液部分生化指标。结果显示,复方A、B、C皆可显著提高血清谷草转氨酶(AST)和碱性磷酸酶(ALP)的活性,但却明显降低了尿酸(URIC)、总蛋白(TP)、总胆红素(TBIL)和球蛋白(GLB)的含量,其他几项生化指标升降不一;复方A、B、C对肝脏中Fe、ALP和肌酐(CREA)3项生化指标的提升效果比较明显,对Ca、P、AST、总胆固醇(CHOL)、乳酸脱氢酶(LDH)、TP和GLB起相反作用。结果的差异可能与中草药配方组成成分、取样部位、测试的生化指标有关。     

三种复方中草药对鲫血清、肝胰脏及脾脏中溶菌酶活性的影响

在水温18℃下研究了三种复方中药（AB、CD、AH）作为饲料免疫添加剂对体质量（44.6±0.2）g 1＋龄健康鲫（Carassius auratus）血清、肝胰脏和脾脏中溶菌酶活性的影响。试验鱼分为3组,每天按体质量的2.0%分别投喂添加了3种中药复方的饲料,对照组投喂基础饲料,每组均设相同数量的鱼做平行,连续饲喂28 d,停食1d后采集血液及组织样品,测定溶菌酶活性。结果显示：3种复方中药都能提高鲫体内溶菌酶活性。其中AB组提高血清中溶菌酶活性效果显著,AB、CD组对肝胰脏中溶菌酶活性的提升效果显著,3种复方中药对鲫脾脏中溶菌酶活性的提升均效果显著,说明3种复方中药均可增强鲫免疫力,有进一步研究和应用的价值,但对不同组织溶菌酶活性的影响不同,提示中药作用效果和机理的差异。