无乳链球菌dnaJ基因缺失株的构建及其致病性研究

为研究dnaJ基因序列与细菌致病力的关系,本研究构建了dnaJ基因缺失株和互补株,并对其致病性进行验证。参照GenBank中无乳链球菌GD201008-001(登录号:NC_018646)目的基因序列分别设计引物,PCR克隆dnaJ基因上、下游同源臂基因序列,通过融合PCR将两个片段连接到一起,构建dnaJ基因上、下游同源臂融合片段,PCR克隆含有启动子序列的dnaJ基因。将dnaJ基因上、下游同源臂融合片段和含有启动子序列的dnaJ基因分别连接链球菌-大肠杆菌穿梭质粒pSET4s和pSET2,电转化GD201008-001感受态细胞,构建dnaJ基因缺失株ΔdnaJ和互补株CΔdnaJ。通过分析ΔdnaJ和CΔdnaJ的遗传稳定性与形态学变化对dnaJ上、下游基因转录的影响,以及生长速率和斑马鱼攻毒试验评价dnaJ基因对无乳链球菌毒力的影响。经PCR鉴定和测序证明,ΔdnaJ和CΔdnaJ构建成功;与野生株GD201008-001相比,ΔdnaJ和CΔdnaJ在细菌染色形态上均无明显差异,但ΔdnaJ在液体培养基中的生长速度明显减缓;dnaJ基因的缺失未对相邻基因的转录造成影响;ΔdnaJ对斑马鱼的毒力明显下降,对斑马鱼的LD_(50)为5.68×10~4 CFU,约是野生株的241倍。dnaJ基因对无乳链球菌的毒力有显著影响,本试验结果为进一步探究无乳链球菌dnaJ基因的功能提供了参考依据。     

刺萼龙葵种子中适宜内参基因的筛选

入侵杂草刺萼龙葵Solanum rostratum Dunal传播扩散的主要载体是种子,研究其种子休眠萌发基因的激素调控对于其防除具有重要意义,而选择合适的内参基因可以提高相关基因表达分析的准确性。本研究以赤霉素、脱落酸和水处理的刺萼龙葵种子为材料,利用geNorm、NormFinder、BestKeeper和RefFinder 4种软件对15个候选内参基因进行表达稳定性评价,并通过检测ABI5(abscisic acid-insensitive 5)的表达验证所筛选的内参基因的适用性。结果表明,对于赤霉素、脱落酸和水处理过的种子,最稳定的内参基因分别为eIF(eukaryotic initiation factor)、SAND(SAND protein family)和ACT(β-actin);对所有种子样本而言,PP2Acs(a catalytic subunit of protein phosphatase 2A)是最稳定的内参基因。研究结果将为刺萼龙葵种子休眠萌发的遗传调控研究提供重要参考。     

利用凝胶扩散法测定刺萼龙葵种子中β-甘露聚糖酶的活性

β-甘露聚糖酶是种子萌发过程中降解胚乳细胞壁的关键酶,明确其活性的动态变化可为揭示杂草种子的休眠萌发机制提供重要依据。以外来杂草刺萼龙葵Solanum rostratum Dunal种子为材料,建立了种子中β-甘露聚糖酶活性的检测方法—凝胶扩散法。利用凝胶扩散法对不同贮存时间及贮存条件下刺萼龙葵种子中β-甘露聚糖酶的活性进行了检测,发现贮存3年以上的种子中该酶的活性为0.03 nmol/(min·mg),显著低于贮存3年以下的种子中的酶活性0.15 nmol/(min·mg),而湿润冷藏的种子中β-甘露聚糖酶的活性为0.12 nmol/(min·mg),显著高于干燥冷藏的种子的酶活性0.02 nmol/(min·mg)。实际应用结果表明,凝胶扩散法综合了传统方法的优势,检测特异性强、灵敏度高、重复性好,可同时检测大量种子样品,具有良好的实用性。     

主要枸杞品种在柴达木地区的叶形态表现

本研究对柴达木地区10个主栽品种枸杞叶片的6个性状(叶片鲜重、叶长、叶宽、叶厚、叶柄长、叶柄粗)进行了测定和比较分析。结果表明:(1)枸杞叶片表型性状在不同品种之间存在不同程度的差异;(2)根据叶片性状特征,将10个品种的枸杞聚为四类:宁杞4号单独为一类,其叶片各性状显著大于其他品种,宁杞2号、宁杞3号、宁杞6号和宁杞7号为一类,其叶长、叶宽和叶形指数仅次于宁杞4号,宁杞8号,青杞1号,蒙杞为一类,其叶形指数都比较大,宁杞1号和宁杞5号聚为一类。     

山区农村家庭适度规模养猪出现的问题及对策

1出现的新问题及原因 1．1小规模养殖 由于群众养猪技术缺乏，采取“滚雪球”的方式积累发展，养殖户对饲养、繁殖、疫病防治等来自自己实践经验的积累，没有形成整体饲养知识，缺乏科学饲养观念，对于重大疾病防治及抗御疫病能力较低，容易引起全军覆没，给养猪户带来毁灭性的打击。     

赤霉素和Vc浸种对干旱胁迫下大麻种子萌发初期幼苗生理的影响

为了探求外源物质对干旱胁迫下大麻萌发的影响,以云麻1号和巴马火麻种子为试验材料,采用纸培法,通过20%PEG-6000模拟干旱胁迫,探索不同浓度(200,400,600mg/L和800mg/L)赤霉素(GA3)和维生素C(Vc)浸种处理对干旱胁迫下大麻萌发初期幼苗生理的影响。结果表明:20%PEG-6000干旱胁迫对大麻萌发初期幼苗的生理有明显的抑制作用,适宜浓度的赤霉素和Vc浸种增加了干旱胁迫下大麻萌发初期幼苗中的可溶性蛋白和可溶性糖含量,过氧化物酶(POD)活性和超氧化物歧化酶(SOD)活性也显著提高。利用隶属函数评价得出,云麻1号分别在600mg/L赤霉素和400mg/L Vc浸种处理时生理干旱缓解效果最好,巴马火麻在600mg/L赤霉素和600mg/L Vc浸种处理时,抗旱能力更强,且赤霉素处理效果优于Vc处理。     

2006—2014 年民勤4 种典型荒漠群落结构 及物种多样性变化研究

根据2006—2014 年民勤荒漠植物4 个样区36 个样方调查数据，对该区沙蒿、梭梭、麻黄和白刺4种典型荒漠植物群落结构及物种多样性进行分析。结果表明：该区群落结构简单，物种相对单一且数量较少，植物都是以较低的芽位适应生境条件；灌木层物种的变化不大，草本层物种有所增加；多样性指数沙蒿群落、梭梭群落和白刺群落的略有增加，而麻黄群落略有减小；该区群落结构和物种多样性的变化主要由于草本层的物种变化引起。了解和掌握民勤荒漠植物群落的结构和物种多样性变化规律，对于推动干旱荒漠区植被恢复和物种多样性的保护提供依据。     

机械制图与CAD课程结合教学的研究

在分析高职机械制图与CAD两门课程传统教学的弊端及相互关系基础上,探究将两门课程有机结合的教学改革措施。实践证明,机械制图与CAD课程相结合的教学改革更有利于学生激发学习兴趣与提高学习效率,有利于培养学生的空间想象力、绘图能力、读图能力以及知识的综合运用能力,教学效果良好。     

金冬6号高产栽培技术

金冬6号（中优206）是由中国农科院作物研究所选育,具有高产、优质、抗逆性强、生态适应性等特点。2007年,昌吉州农业技术推广中心和新疆金天山农业科技有限责任公司合作共同引进试验,该品种属于高产、优质、强筋冬小麦。     

春季马铃薯种薯不同处理方式对薯块数量和产量的影响

田间小区试验结果表明,春季马铃薯在中等肥力条件下的最佳种薯处理方式为小拱棚内河沙覆盖催芽。