猪乙型脑炎疫苗研究新进展

流行性乙型脑炎简称乙脑,是人畜共患急性传染病。该病可导致猪发生繁殖障碍性疾病,给养猪业带来了巨大损失。目前,除常用的3种传统疫苗外,亚单位疫苗等新型疫苗的研究也取得了重大进展,在日后的乙脑免疫中,新型疫苗必定会起到更加重要的作用。     

犬流感病毒RT-LAMP快速检测方法的建立

为了建立一种便捷、灵敏的犬流感病毒(CIV)检测技术,本研究根据CIV相对保守的M片段设计3对特异性引物,建立CIV的RT-LAMP检测方法,对反应体系中的MgSO4、Betaine、Bst DNA PoLymerase、dNTP、引物浓度等分别进行了优化,并进行敏感性和特异性试验。结果表明:所建立的反应体系在恒温水浴锅中作用45min即可得到其特有的阶梯状条带,而且对犬细小病毒、犬瘟病毒和犬副流感病毒的扩增结果均为阴性。该方法对CIV RNA的最小检测限为0.1pg,灵敏性高于一步RT-PCR方法。RT-LAMP和普通RT-PCR方法检测临床样品的符合率为93.02%。该方法为犬流感病毒的临床检测提供了一种简便、实用的方法,为基层检疫提供了方便。     

H5亚型AIV诱导组织细胞凋亡的TUNEL检测

细胞凋亡（apoptosis）是指细胞在一定的生理或病理条件下，按照其自身的程序，自已逐渐结束其生命的历程，通常最后细胞脱落离体，或者裂解为若干个凋亡小体而被其他细胞吞噬。随着对细胞凋亡研究和认识的不断深入。检测细胞凋亡的方法也不断更新和多样化。Gavrieli Y等（1992）首先建立的TUNEI。方法，该方法特别适合于组织切片的细胞凋亡原位检测。     

表达SIV H1亚型HA蛋白重组腺病毒的构建与生物学特性研究

本研究对猪流感病毒A/Swine/Guangdong/3/2003(H1N1)株(SIV-GD03株)的HA基因序列进行了遗传演化分析,结果表明SIV-GD03株与GenBank中登录的全部192株H1亚型SIV中的151株核苷酸序列相似性达到85%以上,表明该毒株具有作为疫苗候选株的分子特征.将SIV-GD03的HA基因克隆到腺病毒穿梭载体pAd-CMV5-IRES-GFP中,将得到的重组穿梭质粒pAd-H1-IRES-GFP电转化至BJ5183感受态细胞中,与人5型腺病毒骨架质粒同源重组获得重组腺病毒质粒prAd-H1-IRES-GFP,该质粒线性化后转染AD-293细胞.包装出的重组腺病毒rAd-H1HA-GFP通过荧光显微镜观察、PCR和western blot鉴定,证明HA基因和GFP基因在重组腺病毒中得到高效表达,该毒株在AD-293细胞上连续传12代后表现出较好的整合稳定性及传代稳定性.     

猪支原体肺炎病的诊断及综合防制

猪支原体肺炎病又称猪喘气病(MPS)或猪地方性流行性肺炎(EPS),是由猪肺炎支原体引起的一种接触性慢性呼吸道传染病,其病原最早由Mare、Switzer(1965)和Goodwin等(1965)从患肺炎猪的肺组织中分离出,并试验复制出本病。患病猪只主要表现为咳嗽和气喘,生长缓慢,饲料报酬低,发病率高,死亡率低,常与其他病毒性或细菌性病     

猪伪狂犬病的防治及研究进展

2012年以来部分省（包括河南、山东、湖南、湖北、广东，海南）出现了伪狂犬野毒感染，主要表现为母猪流产，仔猪和保育猪出现神经症状、呕吐、腹泻、转圈、呆立，肥猪眼睛肿，用头撞墙等症状。临床剖检见典型伪狂犬病变，犬与病死猪接触后出现奇痒症状，发病犬死亡率高，给养猪业带来重大损失。     

不容忽视的潜在的人畜共患病-猪戊型肝炎

2003年,有报道称日本发现两例戊型肝炎(Hepatitis E,HE)感染病例,1例53岁患者尽管早期出现严重的肝炎症状,但很快恢复健康;另1例70岁患者出现同样的初期肝炎症状,但随后出现肝昏迷并死亡于突发性肝衰竭.病原分离得知两例患者感染的为Ⅳ型肝炎病毒;流行病学调查表明,在3个月内2人共同食用5次未熟的野猪肝[1].另外,香港明报新闻网(http://www,chinanews.com/ga/2010/12-30/2758109.shtml)在2010年年末报道了这样一则新闻,称香港食物安全中心表示,香港的戊型肝炎由1998年起逐渐上升,至2010年已达100宗,数字为历来的新高.患者通常有发烧、呕吐、眼黄及尿液呈茶色等病征,报道同时指出,戊型肝炎患者多曾去过高危地方,或曾食用贝或猪肝等食物,以致染病.虽然两则报道相距7年,但在这7年里,世界各地尤其是发展中国家类似的报道数不胜数.     

非洲猪瘟病毒诱导猪红细胞凋亡并促进猪外周血单核细胞的吞噬作用

本研究旨在探讨非洲猪瘟病毒（ASFV）对猪红细胞（RBCs）的作用以及对猪外周血单核细胞（PBMs）吞噬能力的影响。试验采用流式细胞术检测ASFV侵染猪原代肺泡巨噬细胞（PAMs）和猪红细胞（RBCs）的能力,并检测ASFV诱导RBCs发生凋亡的百分比;同时采用激光共聚焦试验（Confocal）观察ASFV诱导RBCs发生凋亡是否影响PBMs的吞噬能力。结果显示,ASFV不能入侵RBCs,但以时间和剂量依赖性方式诱导RBCs发生凋亡。0.1 MOI ASFV接种RBCs后1、3、5和7 d可分别诱导1.27%、3.23%、7.39%和8.56%的RBCs发生凋亡;1 MOI ASFV接种RBCs后1、3、5和7 d可分别诱导1.54%、3.73%、8.46%和10.74%的RBCs发生凋亡;3 MOI ASFV接种RBCs后1、3、5和7 d可分别诱导2.65%、5.01%、12.44%和18.61%的RBCs发生凋亡。同时,凋亡的RBCs可以增加PBMs对黄绿色荧光微球的吞噬数量,ASFV诱导RBCs凋亡的百分比越高,PBMs吞噬黄绿色荧光微球的数量越多。综上所述,ASFV不能侵染猪RBCs,但可以以时间和剂量依赖性方式诱导RBCs发生凋亡并增强PBMs的吞噬功能。     

2017年福建地区PRRSV分子检测及ORF5基因变异分析

目的 研究2017年福建地区中小规模猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）毒株的分子流行情况。方法 从福建地区中小规模猪场收集83份疑似蓝耳阳性病料,对编码GP5蛋白的ORF5基因进行了RT-PCR检测和遗传进化分析。结果 采集的83份疑似蓝耳病料中阳性率为73%,测得的序列之间ORF5的核苷酸相似性达80.3%~100.0%,其中所测的各个分支毒株与其所属分支的代表毒株NADC30、GM2和JXA1的核苷酸相似性分别为92.6%~93.9%、89.8%~93.0%和93.4%~99.3%,检测到新分支中新出现的毒株与JXA1的核苷酸相似性为91.0~93.0%。GP5氨基酸比对结果显示不同亚群GP5信号肽区、诱导表位、主要中和表位及高变区等功能区发生了显著变异。结论 福建地区出现了PRRSV新分支,使福建PRRSV变异种类更加多样化,建议加强PRRSV流行及变异的监测。     

广东地区猪链球菌的耐药性特点及四环素耐药基因携带情况

猪链球菌(Streptococcus suis,SS)是危害世界养猪业的重要细菌性病原菌之一,本研究旨在了解猪链球菌临床分离株的耐药性特点和四环素耐药基因的携带情况,为临床上该病的防控提供科学依据。本试验采用K-B法和CLSI推荐的肉汤微量稀释法检测猪链球菌广东分离株对18种抗菌药物的耐药性。结果显示,被检菌株对四环素类、磺胺类和氨基糖苷类抗菌药物表现较强的耐药性,尤其对四环素类药物的耐药率高达98.2%;对头孢菌素类药物比较敏感;菌株都耐受6种或6种以上的抗菌药物,其中以6和14重耐药菌株的数量最多,分别占20%和17%。本试验设计了4对引物检测四环素耐药基因携带情况,结果发现56株菌中以携带tetM基因为最多(85.71%)。结果表明tetM很可能是介导广东SS分离株对四环素产生极高耐药率的主要原因之一。