山羊传染性胸膜肺炎病例分子病原学诊断

对贵州省某规模化养羊场出现疑似山羊传染性胸膜肺炎（CCPP）症状的山羊采用分子生物学方法进行CCPP病原核酸检测,并通过生物信息学分析对病原进行确定性诊断。结果表明,本次疫情确诊为CCPP,临床病料经分子生物学和生物信息学分析认为病原基因与绵羊肺炎支原体（Mo）Y98标准株在分子进化上一致,表明引起该场CCPP的病原为...     

贵州省牛羊产业屠宰加工环节的现状、问题及对策

本文从产业生产、市场需求、屠宰加工等3方面综合阐述了贵州省牛羊产业屠宰加工环节现状,旨在为贵州省牛羊屠宰加工业的发展提供技术支撑。调查研究表明,贵州省牛羊产业屠宰加工环节中存在市场需求大、养殖规模小,家庭作坊多、认证企业少,标准化建设滞后、自动化水平较低,产品多样化不足、同质化严重,品牌辐射局限、盈利空间较小等问题,由此提出在养殖规模化上求突破,保障原料供给;在产业集聚化上求突破,盘活加工资源;在生产标准化上求突破,提升产品质量;在价值最大化上求突破,增加产业附加值;在营销品牌化上求突破,推动牛羊出山等对策建议。     

应用荧光定量PCR筛选绵羊肺炎支原体最适生长培养基

为筛选绵羊肺炎支原体(Mo)最适生长培养基,针对Mo 16S rRNA基因设计特异性引物FQs/FQa,建立可定量检测Mo 16S rRNA基因FQ-PCR方法,通过检测不同培养时间各Mo培养液中Mo Y98株核酸含量,比较Mo于不同培养基中培养特性,以筛选Mo最适生长培养基。结果,以Broth-ame与TSB1培养Mo 7,10和14 d时Mo核酸检测值较高,较Frey-ame、PPLO-ame更适合Mo生长。本研究为后续Mo生物学特性分析奠定了基础。     

绵羊肺炎支原体LAMP检测方法的建立及初步应用

针对绵羊肺炎支原体(Mo) 16S rRNA基因设计4条环介导等温扩增(LAMP)引物,通过优化反应条件与体系,建立了Mo检测LAMP方法,并对其进行特异性、敏感性及临床应用性检测.结果显示,于60℃保温60 min即可最优化检测Mo,且所建方法仅能特异扩增Mo,最低检出分子拷贝数为1.0×102copies/μL,具有良好的特异性和敏感性.对4份已知阳性病料进行LAMP检测均为阳性,表明所建LAMP可初步应用于临床检测,为羊Mo感染病例诊断提供了新方法.     

猪源沙门氏菌的分离鉴定与耐药性分析

对采自贵州省某规模化养猪场的57份腹泻仔猪肠道样本进行沙门氏菌的分离鉴定,并用药敏纸片法对其进行耐药性分析。结果,共分离鉴定沙门氏菌20株;药敏试验表明所鉴定沙门氏菌对抗菌药物的耐药率从高到低依次是麦迪霉素、红霉素、卡那霉素、庆大霉素和诺氟沙星,且均为多重耐药株,耐药种类达12种以上。研究结果对合理使用药物控制仔猪沙门氏菌感染提供了理论依据。     

预防猪寄生虫病的措施

猪寄生虫病多目前常发生于管理及环境差的养猪场或养殖户.常与饲养方式,猪舍构造,卫生管理,猪只密度,排泄物生理,猪栏土质和气候有关.因此切实做好寄生虫的防治工作对养殖过程中增加经济效益有着重大意义.     

猪圆环病毒继发细菌感染的实验室诊断

采集临床病死仔猪脏器组织,用分子生物学和细菌学方法进行确定性诊断。结果:在病死仔猪肺脏与淋巴结中均检测到猪圆环病毒核酸,并分离到4株埃希氏大肠杆菌;药敏试验表明:分离细菌对头孢噻呋钠敏感,对其他抗生素均表现耐药性。诊断结果为贵州省规模场防制猪圆环病毒感染提供了一定的技术支持。     

贵州省猪流行性腹泻病毒ORF3、M基因克隆及序列分析

为了解贵州省猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)毒株ORF3及M基因的遗传变异情况,试验于2014年4月－2015年3月从贵州省5个地区采集105份腹泻仔猪的粪便,应用RT-PCR方法进行PEDV检测,从中选择8份PEDV阳性样本,扩增其ORF3及M基因,测序并进行序列比对分析.结果显示,从采集的105份粪便样本中可检出75份PEDV阳性样本,阳性率为71.43%;8株PEDV贵州株ORF3及M基因序列均无碱基缺失或插入;ORF3基因核苷酸及推导的氨基酸同源性在95.1%~100.0%与95.1%~99.6%之间,M基因核苷酸及推导的氨基酸同源性在98.4%~100.0%与98.7%~100.0%之间;氨基酸系统进化树分析结果显示,2014~2015年贵州流行株与近年来中国毒株、韩国毒株及泰国毒株亲缘关系较近,与疫苗株Attenuated DR13及CV777株亲缘关系较远.提示目前贵州省仔猪腹泻病原主要是PEDV,且为PEDV强毒株.     

腹泻仔猪肠道致病性大肠埃希氏菌和沙门氏菌的分离鉴定与耐药性研究

为探明仔猪细菌性腹泻肠道致病性大肠埃希氏菌和沙门氏菌流行的血清型、耐药表型及耐药基因型,本试验采集了贵州省5个地（州）市7个规模化养猪场的128份腹泻仔猪肠道样本,并对采集的样本进行了大肠埃希氏菌和沙门氏菌分离与鉴定,通过动物试验鉴定菌株的致病性,利用血清学方法鉴定其血清型,并通过药敏纸片法对主要致病菌进行耐药性研究,采用PCR技术检测各致病菌株耐药相关基因,分析细菌耐药表型和耐药基因型相关性。结果显示,本研究共分离鉴定到78株致病性大肠埃希氏菌与21株沙门氏菌,致病性大肠埃希氏菌血清型以O138、O87为主,沙门氏菌血清型以鼠伤寒沙门氏菌、肠炎沙门氏菌居多;药敏试验结果表明,本试验分离到的78株致病性大肠埃希氏菌对β-内酰胺类药物耐药率达80%以上,对其他种类的抗菌药耐药率均超过40%,分离鉴定的21株沙门氏菌对氨基糖苷类药物耐药率达50%以上,对其他种类的抗菌药耐药率均达20%以上;本试验分离鉴定的致病性大肠埃希氏菌共检出12种耐药相关基因,沙门氏菌共检出10种耐药相关基因,两种细菌耐药基因型与耐药表型符合率均达60%以上,且均为多重耐药。本研究为仔猪腹泻的综合防控提供了理论依据。