猪细小病毒6型ORF2基因的截短表达及多克隆抗体制备

【目的】原核截短表达猪细小病毒6型(Porcine parvovirus type 6,PPV6)ORF2基因,并制备PPV6 VP1₍(348 aa-675 aa))蛋白多克隆抗体,为后续研究该蛋白的生物学功能提供材料。【方法】以PPV6分离毒株基因组为模板,PCR扩增获得ORF2截短基因片段,将其克隆至原核表达载体pET30a(+)中构建重组质粒pET30a-PPV6-ORF2。经酶切和测序鉴定后,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达,Ni-NTA树脂亲和层析纯化,通过SDS-PAGE和Western blotting鉴定纯化后重组蛋白。将纯化后的重组蛋白与弗氏佐剂混匀乳化,免疫新西兰大耳白兔制备多克隆抗体,采用Western blotting、间接免疫荧光试验(IFA)和间接ELISA鉴定免疫兔血清特异性。【结果】成功构建了pET30a-PPV6-ORF2重组表达载体,原核截短表达了PPV6 VP1₍(348 aa-675 aa))蛋白;SDS-PAGE结果显示,重组PPV6 VP1₍     

狂犬病流行现状及控制措施研究进展

狂犬病（Rabies）是世界上影响人类健康最古老的疾病之一,最早的记载见于4300年前美索不达米亚(古王国,在今伊拉克境内)的埃什努纳(Eshnunna)。该病是由狂犬病病毒（Rabiesvirus, RV）引起的一种人兽共患传染病,亦称“恐水症”,俗称“疯狗病”。临床上主要表现出神经兴奋和意识障碍,患者最终因局部或全身麻痹而死。狂犬病的流行横跨非洲、美洲、澳洲、欧洲和亚洲,从温带到热带地区甚至极地都有该病的分布,威胁着各国公共卫生安全,尤其是在发展中国家,已形成了一个严重的公共健康问题。全球每年狂犬病死亡人数超过5.5万人,每10min就有1人死亡。发展中国家受狂犬病危害极大,每年有数百万人在被犬咬伤后需进行昂贵的疫苗接种。印度狂犬病死亡人数是全球最多的国家,其死亡人数每年超过2万(大约占36％)。中国狂犬病死亡人数虽连续5年呈下降趋势,但仍居世界第二位,2006年～2010年的狂犬病死亡人数分别为3293人、3303人、2466人、2213人、2048人;伊朗每年因病犬咬伤暴露而需要预防治疗的人数已超过20万;越南2007年因狂犬病造成131人死亡。世界卫生组织（World HealthOrganization,WHO）主管狂犬病的官员FMeslin曾说：“整个埃塞俄比亚的病例数按已建立的非常保守的数学模型统计应当在5000到10000之间,仅在首都亚的斯亚贝巴就有数百例狂犬病,而在巴基斯坦和孟加拉每年的狂犬病病例数在2000～5000之间”。印尼马鲁古省西南地区2012年爆发的狂犬病已造成至少50人死亡。     

景泉气体:打造温室农业气体肥料第一品牌

<正>"时常间,儿时蔚蓝的天空,清澈的河水,此起彼伏的蛙鸣会映入我的脑海,但这都只是记忆了。"沈阳景泉气体科技有限公司创始人栾景泉时常回忆起儿时的美好,"这些年的经济发展好了,但环境却遭到了破坏。水污染了,空气浑浊了,蔬菜食品也让人提心吊胆……特别是一些农药化肥激素的大量使用,让老百姓的餐桌也变的风声鹤唳。"作为农民的儿子,栾景泉看在眼里,急在心里,期望改变这一切,成为他创立沈阳景泉气体科技有限公司(以下简称"景泉气体")的初衷。     

大肠杆菌感受态细胞制备及转化条件优化

针对大肠杆菌（Escherichia coli）DH5α，以pGM－T、pMD－18T为载体，在传统CaCl2方法的基础上，对制备及转化条件进行了改进和优化，结果表明，42℃热激的最佳时间为100 s，最适冷却时间为6～8 min。本研究将常规的50 mL离心管改成了1．5 mL EP管，有效降低了分装过程中可能产生的污染风险，简化了试验程序，提高了转化效率。     

对产后败血症的初步探讨

奶牛产后败血症多继发于奶牛胎衣不下,过去对胎衣不下都是采取剥离的办法进行治疗。现在认为剥离胎衣对子宫和产道损伤太大,而采用药物催排的方法,使胎衣进行腐化或整体排出体外。我以二十余载的临床观察和治疗认为,据患畜的本身的个体差异,子宫所患疾病及饲养管理所存在的问题,认为不能一概而论,对有差异等问题存在的牛还是要进行胎衣剥离。     

氮肥施用量对甜玉米糖分含量及农艺性状的影响

为了阐明氮肥施用量对甜玉米糖分含量及农艺性状的影响,以甜玉米品种‘耘甜8号’为试材开展田间实验,设置5个氮肥施用量处理（即0、100、200、300、400 kg N/hm²）。结果表明,氮肥施用量与可溶性糖及还原糖含量的线性模型不显著,只是在播种后的第103天,还原糖含量随施氮量的增加而微弱下降。穗重以渐近增长的模式响应氮肥施用量的增加。施氮量超过100 kg N/hm²时,穗重对氮肥施用的正响应程度将显著减弱。每公顷增施100 kg N导致穗长降低0.29 cm。氮肥施用量与穗粗、穗行数及行粒数之间的线性模型不显著。增施氮肥能降低凸尖长度。综上所述,增加氮肥施用量对甜玉米糖分含量、穗粗、穗行数及行粒数无影响,且导致穗长微弱降低。然而,增施氮肥能显著增加穗重,且能降低凸尖长度。     

猪价低迷时规模猪场的生产经营策略

市场行情的变化不是猪场老板们能左右的．但怎样根据市场行情的变化练好内功则是老板自己的事情。这就需要学习、运用现代科学养猪技术和经营方式．认真做好疫病防控，控制养猪成本．堵塞各种漏洞．创造发挥生产潜力的各种因素．以便最大限度地提高养猪经济效益。     

编辑之声：与《中国瓜莱》的作者朋友谈谈提高稿件质量问题

今年是《中国瓜菜》创刊20周年。20年来，从《中国西瓜甜瓜》到今天的《中国瓜菜》．老中青三代作者把自己用心血和智慧书写的论文像种子一样播撒在这片园地．通过她把科研成果、学术思想和从实践探索中提炼的新技术、好经验以及融合了世界科技文化精华的诸多创新理念传播到四面八方．使其扎根于古老中华民族的土地．造福于我们的国家和人民。本刊由一本薄薄的内部刊物．发展成为内容丰富、新颖实用．在业内具有较高专业水准和良好信誉并充满希望的瓜菜科技期刊和重要平台．再到去年成功入围中国科技核心期刊。