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2011年3月、6月、9月和12月在河北省安国市中药材基地分0~10、10~20和20~30cm 3个土层采集金银花根围土样,应用PCR-DGGE与克隆测序技术相结合的方法研究AM真菌遗传多样性及其与土壤因子的关系。结果表明,金银花根围AM真菌最佳DGGE条件为80g·L-1的丙烯酰胺、PCR产物上样量25μL、变性剂范围40%~60%、电泳时间8h、电压130V、温度60℃。以DGGE共分离出15条AM真菌条带,从中选取10条清晰粗亮的优势条带进行测序,通过同源性比对发现,10个序列均与未培养球囊霉属菌种相似性高(≥95%),说明球囊霉属为优势菌群。系统发育分析表明,10条优势条带聚为5个系统发育种,系统发育种在季节和土层上差异显著,但4个季节均未出现特有种。RDA分析表明,影响AM真菌分布的主要土壤因子是全氮、有机碳和pH。其中,AM真菌遗传多样性与土壤全氮和有机碳呈显著负相关,与pH呈显著正相关。 相似文献
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